好氧发酵机制.ppt

第四章 好氧发酵机制,第一节 有机酸发酵机制,柠檬酸的发酵机制,磷酸烯醇式丙酮酸,,丙酮酸,乙酰辅酶A,,柠檬酸,,顺乌头酸,,衣康酸,异柠檬酸,草酰琥珀酸,α－酮戊二酸,谷氨酸,,琥珀酰辅酶A,琥珀酸,延胡索 酸,葡萄糖,苹果酸,草酰乙酸,,,乙醛酸,,乙酰辅酶A,,,,,1,2,3,3,16,4,5,15,6,7,8,9,10,12,11,14,13,,,,,,TCA循环与乙醛酸循环,ATP,,降低,,,抑制,抑制,,激活,激活,关键酶,α-酮戊二酸脱氢酶,,,,,,磷酸烯醇式丙酮酸,,丙酮酸,乙酰辅酶A,,柠檬酸,,顺乌头酸,,衣康酸,异柠檬酸,草酰琥珀酸,α－酮戊二酸,谷氨酸,,琥珀酰辅酶A,琥珀酸,延胡索酸,葡萄糖,苹果酸,草酰乙酸,,,,乙醛酸,,乙酰辅酶A,,,,,1,2,3,3,16,4,5,15,6,7,8,9,10,12,11,14,13,,,,,,,,,,TCA循环与乙醛酸循环,,反馈抑制,,CO2,,参与嘌呤和嘧啶的合成,,脂肪酸,,,天冬氨酸,,参与蛋白 质合成,,参与蛋白 质合成,葡萄糖,,,,,,磷酸烯醇式丙酮酸,丙酮酸,乙酰CoA,,CO2,,,,,柠檬酸的生物合成途径,实现柠檬酸积累： 一、设法阻断代谢途径，实现柠檬酸的积累 二、代谢途径被阻断部位之后的产物，必须有适当的补充机制,CO2,,,,ATP,ADP,CO2,,,ADP,ATP,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶,丙酮酸羧化酶,顺乌头酸酶,,阻断,柠檬酸积累的代谢调节,糖酵解及丙酮酸代谢的调节 黑曲霉在缺锰的培养基中培养时，可提高 NH4+浓度，高浓度NH4+可有效解除ATP、 柠檬酸对磷酸果糖激酶的抑制。

三羧酸循环的调节 及时补加草酰乙酸,葡萄糖,葡萄糖-6-磷酸,,,ATP,ADP,⑴,,果糖-6-磷酸,,ATP,,ADP,Mg2+,⑵,果糖-1，6-二磷酸,⑶,,甘油醛- 3-磷酸,,二羟丙酮 磷酸,,⑷,⑸,,,2Pi,⑹,1，3-二磷酸甘油酸,,2ADP,,2ATP,⑺,3-磷酸甘油酸,,⑻,2-磷酸甘油酸,,,2H2O,Mg2+,⑼,磷酸烯醇式丙酮酸,,,2ATP,2ADP,⑽,烯醇式丙酮酸,,丙酮酸,,乳酸,⑾,,2CO2,乙醛,+2H+,⑿,⒀,2NAD+,2(NADH+H+),,,,,+2H+,,,乙醇,⒁,糖酵解和酒精发酵的全过程,,磷酸果糖激酶,,活化,,抑制,,解除,柠檬酸,,磷酸烯醇式丙酮酸,,丙酮酸,乙酰辅酶A,,柠檬酸,,顺乌头酸,,衣康酸,异柠檬酸,草酰琥珀酸,α－酮戊二酸,谷氨酸,,琥珀酰辅酶A,琥珀酸,延胡索酸,葡萄糖,苹果酸,草酰乙酸,,,,乙醛酸,,乙酰辅酶A,,,,,1,2,3,3,16,4,5,15,6,7,8,9,10,12,11,14,13,,,,,,,,,,TCA循环与乙醛酸循环,,CO2,乌头酸脱羧酶,衣康酸及其酯类是制造合成树脂、合成纤维、塑料、柠檬酸、离子交换树脂、表面活性剂和高分子鳌合剂等的良好添加剂和单体原料。

作为交联剂和乳化剂，添加1%～5%时，生产的苯乙烯-丁二烯共聚物是质轻、易塑、绝缘、防水、抗蚀性均好的塑料和涂料衣康酸和丙烯酸的共聚物是一种高分子鳌合剂，用作水处理中的除垢剂，对防止碱性钙、镁垢的形成非常有效 Bentley学说 Shimi学说,,1.5葡萄糖,EMP,3乙醇,,乙酸,,琥珀酸,,,衣康酸,第二节 氨基酸发酵机制,氨基酸发酵的代谢控制,控制发酵的环境条件 氨基酸发酵受菌种的生理特征和环境条件的影响 控制细胞渗透性 通过改变细胞渗透性，实现谷氨酸的积累控制旁路代谢,D-苏氨酸,L-苏氨酸,,,α-酮基丁酸,,L-异亮氨酸,,L-苏氨酸 脱氢酶,反馈抑制,D-苏氨酸 脱氢酶,降低反馈作用物的浓度,控制反馈作用物浓度是克服反馈抑制和阻遏，使氨基酸的生物合成反应能顺利进行的一种手段 消除终产物的反馈抑制与阻遏 通过使用抗氨基酸结构类似物突变株的方法来进行 促进ATP的积累，以利于氨基酸的生物合成,葡萄糖,,6-磷酸葡萄糖,NADPH2,,乙酰辅酶A,,6-磷酸果糖,6-磷酸葡萄糖酸,5-磷酸核糖,,,3-磷酸甘油醛,果糖-1，6-二磷酸,苹果酸,,③,,丙酮酸,,,CO2,,,异柠檬酸,,CO2,②,草酰乙酸,顺乌头酸,,CO2,,乳酸,,NAD+ NADH2,⑨,柠檬酸,,NADP+,,,CO2,NADH2,,⑧,,,NAD+,草酰琥珀酸,α－酮戊二酸,琥珀酸,,,,延胡索酸,,,谷氨酸,,,NADPH2,NADP+,⑤,,NADP+,NADPH2,,④,乙醛酸,,,,乙酰辅酶A,,,,CO2,⑥,,CO2,,,⑦,葡萄糖生物合成谷氨酸的代谢途径,,EMP 途径,HMP 途径,,,TCA循环,乙醛酸循环,谷氨酸发酵机制,,天冬氨酸,,,磷酸烯醇式 丙酮酸羧化酶,鸟氨酸、瓜氨 酸、精氨酸发酵机制,谷氨酸,,N-乙酰谷氨酸,,,,N-乙酰-γ-谷氨酰磷酸,N-乙酰谷氨酸-γ-半醛,N-乙酰鸟氨酸,,,,,鸟氨酸,瓜氨酸,精胺琥珀酸,精氨酸,,,,负反馈控制,N-乙酰谷氨酸激酶,Arg-,Cit -,谷氨酸产生菌因环境条件变化而引起的发酵转换,,,乳酸和琥珀酸,,,α－酮戊二酸,（通气不足）,（适中）,（通风过量，转速过快）,NH4+,α－酮戊二酸,,,谷氨酸,,,谷氨酰胺,（适量）,（缺乏）,（过量）,pH值,谷氨酰胺，N-乙酰谷酰胺,,,,,,,谷氨酸,（pH值5～8，NH4+过多）,（中性或微碱性）,磷酸,缬 氨 酸,谷氨酸,（高浓度磷酸盐）,（磷酸盐适中）,生物素,乳酸或琥珀酸,谷氨酸,（过量）,（限量）,影响谷氨酸产生菌细胞膜通透性的物质,,生物素,油酸,表面活性剂,,其作用是引起细胞膜的脂肪 成分的改变，尤其是改变油 酸的含量，从而改变细胞膜 通透性,一,二：青霉素：抑制细胞壁的合成,,O,=,C,,,HN,NH,,,HC,CH,,,,H2C,C,S,,,,H,,,,,,（CH2）4,C,NH,,,BCCP赖氨酸残基,生物素羧基载体蛋白 （biotin carboxyl carrier protein BCCP）,生物素,O,=,H,OH,+,,H2O,,ATP,,ADP,CO2,,生物素羧化酶,-,酶,BCCP-羧基生物素,BCCP-羧基生物素在转羧酶作用下，形成丙二酰CoA 丙二酰CoA与乙酰CoA缩合并脱羧，生成丁酰CoA，如此反复进行合成高级脂肪酸，再合成磷脂 生物素不足时，就抑制了不饱和脂肪酸的生成，从而影响了磷脂的生成，导致磷脂含量不足，使细胞膜结构不完全，从而提高细胞膜的通透性,表面活性剂对不饱和脂肪酸的生物合成有拮抗作用，从而抑制不饱和脂肪酸的生物合成，导致形成磷脂含量不足的不完全细胞膜，从而解除了细胞膜对谷氨酸渗透的屏障，使谷氨酸易于排出胞外,CH2OH,,,,O,,,,,,,,,CH2OH,,,O,,,,,,,,O,,,,O,,CH3-CH-C=O,NH,,,,,,,,,,,,C,CH3,H,C=O,NH,C,H,-OOC,,,（CH2）2,C=O,C=O,NH,C,(CH2)4,H,,,,OH,,NH,C,=,O,CH3,NH,C,=,O,CH3,,,,,,,,L-Ala,D-Glu,,NH3+,NH,C,CH3,H,C=O,,,L-Lys,D-Ala,,,,,,,,,,,,,,（Gly）5,NAM,NAG,肽聚糖结构,,N,,H,NAG,,NAM,,,,NAG,NAM,,,,,,L-ala,D-glu,D-ala,,,,L-ala,D-glu,D-ala,,gly5,,,gly5,,NAG,,NAM,,,,NAG,NAM,,,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,gly5,,,gly5,,NAG,,NAM,,,,NAG,NAM,,,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,NAG,,NAM,,,,NAG,NAM,,,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,,,L-ala,D-glu,DAPA,D-ala,,gly5,,,gly5,,细胞壁的粘多肽结构,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,,D-ala,谷氨酸,,N-乙酰谷氨酸,,,,,,,,,,N-乙酰-γ-谷氨酰磷酸,N-乙酰谷氨酸半缩醛,N-乙酰鸟氨酸,鸟氨酸,瓜氨酸,精氨酸,,反馈抑制,天冬氨酸,天冬氨酰胺磷酸,天冬氨酸半缩醛,,高丝氨酸,,苏氨酸,,赖氨酸,,,天冬氨酸激酶,协同反 馈抑制,,第三节 核苷酸发酵机制,嘌呤核苷酸的生物合成途径,,全合成途径,补救途径,嘌呤核苷酸的代谢调节,葡萄糖,,,,,,,,,,5-磷酸核糖,,ATP,,ADP,Mg2+，HPO42- PRPP合成酶,磷酸核糖焦磷酸 （PRPP）,,,谷氨酰胺 +H2O,,谷氨酸 +HP2O73-,5-磷酸核糖酸 （PRA）,,Mg2+,GAR合成酶,甘氨酸,,,ATP,ADP+Pi,甘氨酰胺核苷酸 （GAR）,N10-甲酰THFA,H2O,,THFA,甲酰甘氨酰胺核苷酸 （FGAR）,磷酸核糖甘氨酰 胺转甲酰酶,Gln H2O,GLU,ADP,ATP,+Pi,甲酰甘氨 咪核苷酸 （FGAM）,Mg2+,K+,,ATP,ADP+Pi,5-氨基咪唑核苷酸 （AIR）,CO2,,AIR羧化酶,5-氨基-4-甲 酸咪唑核苷酸 （CAIR）,5-氨基-4- （N-琥珀基） 甲酰胺核苷酸 （CAIR),,ASP,ATP,ADP+Pi,Mg2+,SAICAR合成酶,,延胡索酸,腺苷酸琥珀 酸裂解酶,5-氨基-4-氨甲 酰咪唑核苷酸 （AICAR）,5-甲酰胺基咪唑 -4-氨甲酰核苷酸 （FAICAR）,N10-甲 酰THFA,,H2O,IMP环化 脱水酶,次黄嘌呤 核苷酸 (IMP),,THFA,,,,PRPP 转酰胺酶,GMP、IMP AMP、GDP、ADP,IMP,腺苷琥珀酸 （SAMP）,,,,SAMP 裂解酶,,延胡索酸,AMP,SAMP 合成酶,GDP+Pi,,GTP+ 天冬氨酸,,,,黄嘌呤 核苷-磷酸 （XMP）,NAD+,,NADH,鸟嘌呤核苷酸 （GMP）,GMP 还原酶,XMP 氨化酶,谷氨酰胺,,谷氨酸,+AMP+PPi,+ATP+H2O,AMP 脱氨酶,IMP 脱氢酶,,ADP,,ATP,,,GDP,GTP,PRPP,谷氨酰胺,,,PRA,,AICAR,,谷氨酸,,,,,,,,PRATP,,,,咪唑甘油磷酸,组氨酸,嘌呤核苷酸的代谢调节,,抗生素发酵机制,次级代谢产物及特征 初级代谢产物：是指微生物产生的、生长和繁殖所必需的物质。

次级代谢产物：是指由微生物产生的，与微生物生长和繁殖无关的一类物质 次级代谢产物的特征： 次级代谢产物是由微生物产生的，不参与微生物的生长和繁殖次级代谢产物的生物合成是与初级代谢产物合成无关的遗传物质有关 次级代谢产物发酵经历两个阶段，即营养增殖期（trophophase）和生产期（idiophase） 一般都产生结构上相类似的多种副组分 生产能力受微量金属离子和磷酸盐等无机离子的影响次级代谢酶的底物特异性在某种程度上是比较广泛的 培养温度过高或菌移植次数过多，会使抗生素的生产能力下降 次级代谢中与一个酶相对应的底物和产物也可以成为其他酶的底物 在多数情况下，增加前体是有效的生物合成抗生素与初级代谢的关系 从菌体生化代谢方面分析 次级代谢产物是以初级代谢产物为母体衍生出来的 从遗传代谢方面分析 次级代谢产物除与初级代谢产物一样受核内DNA的调剂控制外，还受到与初级代产物合成无关的遗传物质的控制葡萄糖,,丙糖,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,丙酮酸,乙酸,草酰乙酸,柠檬酸,α-酮戊二酸,谷氨酸,次级代谢产物,,,,天冬氨酸,次级代 谢产物,CO2,,,。