金黄色葡萄球菌的测定
4页1、金黄色葡萄球菌的测定1 卫生学意义金黄色葡萄球菌定性检验(增菌培养法):适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。 2 检验方法2.1 术语与定义金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为一种革兰氏染色阳性球形细菌。显微镜下排列成葡萄串状,金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛,大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。2.2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:(1)恒温培养箱:361。(2)冰箱:25。(3)恒温水浴箱:3765。(4)天平:感量0.1g。(5)无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。(6)无菌锥形瓶:容量100mL、500mL。(7)无菌培养皿:直径90mm。(8)pH计或pH比色管或精密pH试纸。2.3 培养基和试剂(1)7.5%氯化钠肉汤1)成分:蛋白胨:10.0g;牛肉膏:5.0g;氯化钠:75g;蒸馏水:1000mL;pH:7.4;2)制法:将上述成分加热溶解,调节pH,分装,每瓶225mL,121高压灭菌15min。(2)BP琼脂平
2、板1)成分:胰蛋白胨:10.0g;牛肉膏:5.0 g;酵母膏:1.0g;丙酮酸钠:10.0g;甘氨酸:12.0g;氯化锂(LiCl6H2O):5.0g;琼脂:20.0g;蒸馏水:950mL;pH:7.00.22)增菌剂的配法:30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL 混合,保存于冰箱内。3)制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,调节pH。分装每瓶95mL,121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50,每95mL加入预热至50的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。(3)脑心浸出液肉汤(BHI)1)成分:胰蛋白质胨:10.0g;氯化钠:5.0g;磷酸氢二钠(K2HPO4):2.5g;葡萄糖:2.0g;牛心浸出液:500mL;pH:7.40.2;2)制法:加热溶解,调节pH,分装16 mm160 mm 试管,每管5mL置121,15min灭菌。(4)磷酸盐缓冲液1)成分:磷酸二氢钾(KH2PO4):34.0g;蒸馏水:500mL;pH:7.2;2)制法:贮存液:称取34.0 g的磷酸二氢钾溶
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