【生物】微生物的培养技术及应用(1)课件-2023-2024学年高二下学期人教版(2019)选择性必修3
81页1、1.2 微生物的培养技术及应用微生物的基本培养技术一、微生物难以用肉眼观察的微小生物的统称。2、微生物的类群1、概念原核生物(细菌、蓝细菌等)真菌(如酵母、霉菌等)原生生物(草履虫、衣藻等)SARS病毒蓝细菌草履虫青霉菌病毒微生物微生物培养条件:提供合适的营养和环境条件确保其它微生物无法混入培养基无菌技术1、培养基的概念及其作用;2、培养基的种类;3、培养基的营养构成。一、培养基的配制(9-10)一一微生物的基本培养技术微生物的基本培养技术一、培养基的配制1培养基的概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。3培养基种类(按物理性质分类)固体培养基液体培养基加入凝固剂(如琼脂)(1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂,不能为微生物生长提供能量和碳源。(2)病毒为非细胞结构生物,只能在活细胞中营寄生生活,目前不能利用人工培养基来培养。(1)按物理性质分类(2)按功能分类选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基:人为提供有利于目的菌生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。:用于鉴别不同类型微生物的培养基。4
2、培养基的营养构成(1)主要营养物质:水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。(2)某种常见的细菌培养基牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g碳源、氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如:在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性;在培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。思考题:1、为什么培养基要加氮源?2、是否所有培养基都要加碳源、氮源?培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。例如:分离固氮菌不需要额外添加氮源,其可以直接利用空气中的氮气。不是;分离自养型生物不需要额外添加碳源,其能利用无机碳源合成含碳有机物。二、无菌技术获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染,主要包括消毒和灭菌。阅读10-11页,找出:(1)消毒的概念、适用对象及其主要方法;(2)灭菌的概念、适用对象及其主要方法;二、无菌技术1消毒(1)
3、概念:指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。(2)适用对象:操作的空间、操作者的衣着和手等。(3)主要方法:煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、化学药物消毒法等。消毒主要方法具体操作应用范围巴氏消毒法煮沸消毒法紫外线消毒法化学药物消毒法消毒的主要方法及应用范围消毒的主要方法及应用范围6365消毒30min7276处理15s8085处理1015s牛奶、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体100煮沸56min家庭餐具等生活用品紫外灯照射30min(损伤细菌的DNA结构)(喷洒苯酚或煤酚皂)接种室、接种箱或超净工作台酒精氯气双手、伤口(酒精)有活性的生物材料(次氯酸钠)水源(氯气)2灭菌(1)概念:指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。(2)适用对象:用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等。(3)常用方法:湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。灭菌主要方法具体操作应用范围灼烧灭菌干热灭菌灭菌灭菌的主要方法及应用范围的主要方法及应用范围直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧涂布器、接种环、接种针或其他金属用具,试管口或瓶口等干热灭菌箱中,160170
4、的热空气中维持12h耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金属用具等100kPa、121维持1530min培养基、无菌水等湿热灭菌(高压蒸汽灭菌效果最好 干热灭菌箱 灼烧灭菌高压蒸汽灭菌锅3.比较消毒和灭菌项目消毒灭菌作用强度消灭微生物的数量能否消灭芽孢、孢子适用对象常用方法较为温和的物理、化学或生物强烈的物化方法物体表面或内部一部分微生物物体内外的所有微生物消灭全部芽孢和孢子操作空间、操作者的衣着和手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药物消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌课前阅读1.什么种类的培养基会长菌落?2.能用牛肉膏蛋白胨培养基培养病毒吗?3.培养乳酸菌,需要在培养基中添加哪种特殊营养物质?4.培养细菌时,培养基的酸碱度有何要求?5.获得纯净的微生物培养物的关键是?6.酒制醋的反应式?7.泡菜液和果醋表面上都会长菌膜,分别是什么微生物形成的菌膜?8.培养基中一定要添加碳源或氮源吗?自养微生物 固氮菌三、微生物的纯培养1概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。2步骤微生物的纯培养包括配制培养
5、基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。探究实践酵母菌的纯培养(一)原理:将聚集的微生物分散成单个细胞,单个细胞繁殖成单个菌落。菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。(二)接种微生物的方法:采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。酵母菌的纯培养1、目的要求(1)学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。(2)学会进行无菌操作。(3)尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸)、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。2、材料用具1.1.配制培养基:配制培养基:2.2.灭菌:灭菌:3.3.倒平板:倒平板:3、步骤(1)制备培养基(马铃薯琼脂培养基)3、步骤(1)制备培养基(马铃薯琼脂培养基)配制培养基灭菌称取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加
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