不同产地黄精中多糖含量的比较.doc

不同产地黄精中多糖不同产地黄精中多糖 含量的比较含量的比较【摘要】目的比较不同产地黄精（Polygonatum sibiricum）中多糖的含量方法改进的硫酸苯酚比色法结果以葡萄糖计，泰山生黄精、安徽生黄精、浙江生黄精、泰山熟黄精、浙江熟黄精中多糖含量分别为12.56%、9.92%、8.54%、7.36%、2.33%结论不同产地黄精中多糖含量差异明显，其中以泰山生黄精多糖含量为最高；炮制黄精多糖含量低于生黄精 【关键词】 黄精；多糖;含量 Comparison of polysaccharide in Polygonatum sibiricum from different placesWANG Xiaodan1, TIAN Fang2 , SHI Guiyun2 , HAO Jifu1, LI Tongde1(1. Dept. of Pharmacology, Taishan Medical College, Taian 271000, China;2. Affiliated Hospital of Taishan Medical College, Taian 271000, China)Abstract:Objective: To compare the content of polysaccharide in Polygonatum sibiricum derived from different places. Methods: Modified phenolsulfutic acid method was used. Results: The content of polysaccharide in raw Polygonatum sibiricum from Mountain Tai was12.56%，raw Polygonatum sibiricum from Anhui was 9.92%，raw Polygonatum sibiricum from Zhejiang were 8.54%，Polygonatum sibiricum after processing from Mountain Tai was 7.36%，Polygonatum sibiricum after processing from Zhejiang was 2.33%. Conclusion: The contents of polysaccharide in Polygonatum sibiricum from different places are significantly different, and the one of raw Polygonatum sibiricum from Mountain Tai is the highest.Key words:polygonatum sibiricum; polysaccharide; contain黄精（Polygonatum sibiricum Red.）为百合科多年生草本植物，别名鸡头黄精、鸡头根、黄鸡菜，常生长在山地林下，灌丛或山坡半阴处。

黄精可食部分是地下横生的肉质根茎，具有补中益气、滋润心肺、强壮筋骨等作用，久服可以延年益寿，为常用传统中药之一［1］ 《本草纲目》记载：“黄精补诸虚，填精髓“，可“使五脏调和，肌肉充盛，骨髓坚强，其力倍增，多年不老，颜色鲜明，发白更黑，齿落更生“药理研究表明，黄精具有抗菌、降压、降血糖及防止动脉粥样硬化等作用［2］ 近年来研究还证明黄精多糖具有抗病毒及免疫激发作用［34］ ，说明多糖是黄精的主要活性成分之一黄精药用资源丰富，分布较广，为评价不同产地黄精的质量，强调道地药材的开发和利用, 重视中药产地与质量的关系, 本文采用改良的苯酚硫酸比色法测定不同产地黄精中多糖的含量［5］ ，为黄精的合理应用提供依据1 试剂与仪器：1.1 试剂 黄精以及炮制黄精，分别产自于泰山，安徽，浙江等地，标本经鉴定保存于泰山医学院药学院药学综合实验室；苯酚、浓硫酸、无水乙醇、丙酮及乙醚均为分析纯1.2 仪器 S54 紫外可见分光光度计，上海棱光科技有限公司2 方法与结果：2.1 苯酚溶液的制备 取苯酚 20.0 g，加铝片 0.1 g 与 NaHCO3 0.05 g，干馏，收集 182 ℃馏分称取此馏分 5.0 g，加蒸馏水定容至 100 ml 棕色容量瓶中摇匀备用。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖标准品 85.0 mg，置 100 ml 容量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得标准贮备液2.3 样品溶液的制备 分别称取 60 ℃干燥至恒重的泰山生黄精、安徽生黄精、浙江生黄精、泰山熟黄精、浙江熟黄精等各10.0 g，加 100 ml 蒸馏水煮沸提取 3 次，滤过，合并滤液，减压浓缩至 20ml，加 1% 活性炭脱色 2 次，抽滤，滤液加入 95% 乙醇，使滤液含醇量达 80%，静置，离心（5000 rpm）30 min，将沉淀依次用 95% 乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，真空干燥，转移沉淀并定容至 50ml 容量瓶中，取 0.5 ml稀释至 100 ml, 得样品溶液2.4 最大吸收波长的选择 精密移取上述葡萄糖标准溶液及样品溶液各 1 ml， 分别置于具塞刻度试管中，准确加入 1 ml 苯酚溶液，摇匀，然后迅速精密滴加浓 H2SO4 5 ml，以涡漩混合仪快速混匀，静置 5 min 后于沸水浴中加热 15 min，取出后迅速冷却至室温；另以蒸馏水 1 ml 按照上述操作方法加入苯酚溶液和浓 H2SO4，以此溶液作为空白对照，在波长 400800 nm扫描，样品溶液和对照品溶液均在 490 nm 处有最大吸收。

如图1 所示图 1 最大波长的选择2.5 标准曲线的制备 分别精密移取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml 于 10 ml 具塞刻度试管中，依次加蒸馏水使最终体积为 1.0 ml，按“2.4“项下操作方法在 490 nm 处测定吸光度，以吸光度 A 为纵坐标，葡萄糖浓度 C 为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=0.0121C0.0048（r=0.9991）2.6 精密度试验 取样品溶液（泰山生黄精）0.2 ml 于 10 ml具塞刻度试管中，按“2.4“项下操作方法在 490 nm 处测定吸光度，计算，得泰山产黄精中多糖平均含量为 12.56%，RSD=0.52% (n=5)，结果表明仪器的精密度良好2.7 重现性试验 分别吸取对照品溶液 0.5 ml(5 份)，置 10 ml 具塞刻度试管中, 按照“2.4“项下操作方法，测得吸光度分别为 0.5958、0.5956、0.5951、0.5962 和 0.6004，RSD=2.16% (n =5)，结果表明重现性良好2.8 稳定性实验 取样品溶液（泰山生黄精）0.2 ml，按照“2.4“项下操作方法, 分别在 0.5 h，1 h，1.5 h，2 h，2.5 h，3 h 测定其吸光度，结果如表 1 所示，表明样品在室温下 3 h 内能保持较好的稳定性。

表 1 稳定性实验2.9 回收率测定 取样品溶液(泰山生黄精)适量，分别加入同量的对照品溶液，按“2.4“ 项下操作, 在 490 nm 处测定吸收度，计算多糖含量，测得加样回收率为 98. 6%2.10 样品测定 分别取样品溶液各 0.2 ml，按“2.4“项下操作方法在 490 nm 处测定吸光度，结果见表 2 表 2 样品分析结果3 讨 论本实验结果表明，泰山黄精生药样品中黄精多糖含量比其他两个产地的含量高以水提乙醇沉淀法获取黄精多糖，用改进的硫酸苯酚比色法测定其含量，方法简便易行，结果准确，精密度好对黄精的炮制研究表明，生品黄精经炮制后其多糖含量明显下降，可能是由于大的根茎经炮制过程不断反复的熏蒸，使其部分多糖和低聚糖水解转化为单糖，可溶性单糖部分流失，黄精多糖总量减少的缘故本次实验不足之处是由于所获得的黄精样品较少，不能进一步比较其他产区的黄精多糖含量参考文献】［1］黄芳，陈桃林，蒙义文,等. 黄精多糖对老龄大鼠记忆获得和记忆再现的影响［J］ ，应用与环境生物学报，1999，5（1）：3639.［2］王筠默,王恒芬,许长照. 中药研究与文献检索.上海:上海远东出版社，1994:797.［3］曾庆华.黄精多糖制剂治疗家兔单纯疱疹病毒性角膜炎的实验观察［J］. 成都中医学院学报, 1988, 11 (1) : 30.［4］谈恒山.黄精多糖的免疫激发作用［J］. 中草药, 1989, 20 (11) : 36.［5］董群，郑丽伊，方积年,等. 改良的硫酸苯酚法测定多糖和寡糖含量的研究［J］.中国药学杂志，1996,31(9) :2023.作者：王晓丹，田芳，史桂云， 郝吉福，李同德作者单位：泰山医学院药学院，山东 泰安 271000 。