精编制作免疫组化结果的分析和判断PPT课件
44页1、免疫组化结果分析和判断 第一节免疫组化结果的判断原则免疫组化结果的判断原则概括起来有以下几点 必须同时设对照染色 没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的 抗原表达必须在特定部位 如LCA应定位在细胞膜上 CK应定位在细胞浆内 PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内 EMA应定位在细胞膜上 等等 不在抗原所在部位的阳性着色 一概不能视为阳性 阴性结果不能视为抗原不表达 由于检测方法灵敏度有高低之分 有时可因染色方法灵敏度不够 而导致阴性反应 判断时应注意 尽量避开出血 坏死及切片刀痕和界面边缘细胞的阳性表达 特别是酶免疫标记 因为这类阳性着色多系内源干扰 或系人为因素所致 对免疫组化标记结果的意义不能绝对化 应结合临床资料 X线等影像学及实验结果综合分析 第二节对照染色设计 一 对照染色的目的设对照的目的是为了排除假阴性和假阳性 假阴性的原因主要有三 组织处理不当 抗原丢失过多或被遮蔽 抗体失活 效价过低或稀释度不合适 主要指一抗 即特异性抗体 染色步骤遗漏及差错 或显色剂的选择 缓冲液的pH和离子强度不当等 假阳性均系由多种因素造成的非特异着色所致 原因主要有 自发荧光或内源酶等干扰
2、抗体试剂不纯 特别是一抗 操作失误 如污染 切片干枯或显色剂操作不当等 Fc受体的干扰 等等 二 对照的种类及其选用目的对照染色大致可分为阳性组织对照 阴性组织及阴性试剂对照和自身对照四大类 阳性组织对照指用已证实含有靶抗原的同源及不同源组织切片或细胞涂片与待检实验切片同时作同样处理和免疫染色的组织对照 正确的结果应呈现阳性 目的是为了证实所用免疫组化染色流程的有效性 排除假阴性的可能 阴性组织对照指用已证实不含靶抗原的同步处理和免疫标记染色的组织对照 正确的结果应为阴性 目的是除外假阳性 阴性试剂对照是指用于证实在免疫组化染色中所用试剂 尤其是特异性抗体试剂的有效性和可靠性而所设立的同步免疫染色对照 包括有 空白对照 替代对照 吸收试验和抑制试验 等 目的在于除外假阳性和证实所用免疫组化试剂及其技术方法的有效性和待检实验切片免疫标记阳性结果的可靠性 空白对照指以缓冲液 PBS TBS等 取代第一抗体 主要的 必要时还可做第二抗体及桥联抗体的空白取代 其他各步不变的试剂对照染色 结果应为阴性 取代对照指以所用方法第一抗体同源动物的正常血清 或与本实验无关的抗体 靶生物缺如的 取代第一抗
《精编制作免疫组化结果的分析和判断PPT课件》由会员ahu****ng3分享,可在线阅读,更多相关《精编制作免疫组化结果的分析和判断PPT课件》请在金锄头文库上搜索。
超过竞争对手的创新能力(145页PPT)
高速公路技术创新点介绍(60页PPT)
设计方法学与创新设计(99页PPT)
菜品创新培训讲义(60页PPT)
结构化研讨的创新实践(128页PPT)
管理设计以创新(57页PPT)
课程评价制度的创新教材(52页PPT)
科技型中小企业技术创新基金申请培训材料(149页PPT)
科技型中小企业技术创新基(57页PPT)
股权激励与机制创新(2小时)郑翔洲(82页PPT)
研究生科研创新思维的培养王振宁XXXX815(50页PPT)
绩效管理赢在考核创新(51页PPT)
标准与创新(66页PPT)
社会建设与社会管理创新教材(248页PPT)
科技创新政策解读(50页PPT)
苏州村级经济发展路径和模式创新讲义(57页PPT)
新常态下的非遗传承与创新课件(50页PPT)
社会管理创新教材(56页PPT)
职业培训及其课程开发与教学模式创新(103页PPT)
联盟驱动型创新政策的新发展讲义(68页PPT)
2023-09-09 110页
2023-09-09 107页
2023-03-07 70页
2023-03-07 178页
2022-07-14 64页
2022-07-14 95页
2022-07-14 52页
2022-07-14 56页
2022-07-13 43页
2022-07-13 44页