药品检测-检验分析方法的验证和确认

1分析方法的验证和确认分析方法的验证和确认黑龙江省食品药品检验检测所战战 丹丹可靠的可靠的检验检验结果结果方法验证方法验证仪器校准仪器校准培训培训3内容：内容：一、法规要求一、法规要求 二、分析方法验证二、分析方法验证 三、分析方法确认三、分析方法确认 四、分析方法验证和确认总结四、分析方法验证和确认总结41 1、法规要求：新版、法规要求：新版GMPGMP（20102010年年 修订）修订）第二百二十三条物料和不同生产阶段产品的检验应当至少第二百二十三条物料和不同生产阶段产品的检验应当至少符合以下要求：符合以下要求：（一）企业应当确保药品按照注册批准的方法进行全项检验；（一）企业应当确保药品按照注册批准的方法进行全项检验；（二）符合下列情形之一的，应当对检验方法进行（二）符合下列情形之一的，应当对检验方法进行验证验证：1.采用新的检验方法；采用新的检验方法；2.检验方法需变更的；检验方法需变更的；3.采用采用中华人民共和国药典中华人民共和国药典及其他法定标准未收载的检及其他法定标准未收载的检验方法；验方法；4.法规规定的其他需要验证的检验方法。法规规定的其他需要验证的检验方法。（三）对不需要进行验证的检验方法，企业应当对检验方法进（三）对不需要进行验证的检验方法，企业应当对检验方法进行行确认确认，以确保检验数据准确、可靠；，以确保检验数据准确、可靠；51 1、法规要求：中国药典（、法规要求：中国药典（20102010年年 版）凡例版）凡例检验方法和限度检验方法和限度二十三、本版药典正文收载的所有品种，均应按规定的二十三、本版药典正文收载的所有品种，均应按规定的方法进行检验。如采用其他方法，应将该方法与规定的方法进行检验。如采用其他方法，应将该方法与规定的方法做比较试验，根据试验结果掌握使用，但在仲裁时方法做比较试验，根据试验结果掌握使用，但在仲裁时仍以本版药典规定的方法为准。仍以本版药典规定的方法为准。61 1、法规要求：中国药典（、法规要求：中国药典（20102010年年 版）凡例版）凡例检验方法和限度检验方法和限度二十三、本版药典正文收载的所有品种，均应按规定的二十三、本版药典正文收载的所有品种，均应按规定的方法进行检验。如采用其他方法，应将该方法与规定的方法进行检验。如采用其他方法，应将该方法与规定的方法做比较试验，根据试验结果掌握使用，但在仲裁时方法做比较试验，根据试验结果掌握使用，但在仲裁时仍以本版药典规定的方法为准。仍以本版药典规定的方法为准。1 1、法规要求：、法规要求：分析方法确认或验证相关指南分析方法确认或验证相关指南机构或组织机构或组织 文件名称文件名称 美国药典（美国药典（USP）Validation of compendial procedures方法验证方法验证 Verification of compendial procedures方法确认方法确认人用药品注册技术要求国人用药品注册技术要求国际协调会（际协调会（ICH）Q2（R1）Validation of Analyt8ical ProceduresQ2（R1）分析方法验证）分析方法验证 中国药典中国药典2010年版年版 一部附录一部附录“中药质量标准分析方法中药质量标准分析方法验证指导原则验证指导原则”二部附录二部附录“药品质量标准分析方法药品质量标准分析方法验证指导原则验证指导原则”。8内容：内容：一、法规要求一、法规要求 二、分析方法验证二、分析方法验证 三、分析方法确认三、分析方法确认 四、分析方法验证和确认总结四、分析方法验证和确认总结9二、分析方法验证二、分析方法验证1 1、分析方法验证的定义、分析方法验证的定义2 2、分析方法验证的目的、分析方法验证的目的3 3、分析方法验证范围、分析方法验证范围4 4、分析方法验证的时机、分析方法验证的时机5 5、需验证的分析方法类型、需验证的分析方法类型6 6、分析方法验证的具体内容、分析方法验证的具体内容7 7、验证检测项目小结、验证检测项目小结8 8）分析方法验证的方式和步骤）分析方法验证的方式和步骤9 9）分析方法验证常见问题）分析方法验证常见问题 10二、分析方法验证二、分析方法验证1 1、分析方法验证的定义：、分析方法验证的定义：是根据检测项目的要求，预先设置一是根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的要求。能否符合检测项目的要求。2 2、分析方法验证的目的：、分析方法验证的目的：1 1）证明）证明采用的分析方法采用的分析方法是是科学、合理，科学、合理，2 2）证明）证明分析方法能有效控制药品的内在质量。分析方法能有效控制药品的内在质量。验证过程和结果均应记载在标准起草或修订说明中验证过程和结果均应记载在标准起草或修订说明中。二、分析方法验证二、分析方法验证p3 3、分析、分析方法验证方法验证范围范围p适用范围适用范围化学药品的理化分析方法和仪器分析方法的验证与确认化学药品的理化分析方法和仪器分析方法的验证与确认清洁验证方法的验证清洁验证方法的验证p不适用不适用化学药品的微生物方法化学药品的微生物方法生物制品分析方法验证生物制品分析方法验证4 4、分析方法验证的时机分析方法验证的时机1 1）建立建立新的新的药品质量标准；药品质量标准；2 2）药品生产工艺变更；药品生产工艺变更；3 3）制剂的组分变更；制剂的组分变更；4 4）对原分析方法进行修订时。对原分析方法进行修订时。方法验证理由、过程和结果均应记载在药品标方法验证理由、过程和结果均应记载在药品标准起草说明或修订说明中。准起草说明或修订说明中。二、分析方法验证二、分析方法验证二、分析方法验证二、分析方法验证5 5、需验证的分析方法类型需验证的分析方法类型1 1）鉴别试验鉴别试验2 2）杂质定量或限度检查（仪器或非仪器检测方法），杂质定量或限度检查（仪器或非仪器检测方法），3 3）原料药或制剂中活性成分以及制剂中选定组分（如防腐原料药或制剂中活性成分以及制剂中选定组分（如防腐剂等）的定量测定含量测定剂等）的定量测定含量测定4 4）化学药品化学药品/中药制剂中其他需控制成分中药制剂中其他需控制成分(如残留物、添加如残留物、添加剂等）的测定剂等）的测定5 5）制剂溶出度、释放度等检查制剂溶出度、释放度等检查6 6）原料药粒度检测原料药粒度检测 -1 1）专属性专属性2 2）线性线性3 3）范围范围4 4）准确性准确性5 5）精密度精密度6 6）检测限检测限7 7）定量限定量限8 8）耐用性耐用性9 9）系统适用性系统适用性 6 6、分析方法验证的分析方法验证的具体具体内容内容根据根据检测的类型检测的类型采用的技术采用的技术检测方法检测方法确定确定具体方法拟订验证的内容具体方法拟订验证的内容二、分析方法验证二、分析方法验证1 1）专属性专属性p 鉴别、杂质和含量测定的方法学验证中应进行专属性鉴别、杂质和含量测定的方法学验证中应进行专属性研究，证明专属性所采用的方法取决于分析方法的预定检研究，证明专属性所采用的方法取决于分析方法的预定检测对象。测对象。一种分析方法不太可能对某一特定的被分析物具有专一种分析方法不太可能对某一特定的被分析物具有专属性属性(完全辨别完全辨别)，在此情况下，建议采用两种或两种以上，在此情况下，建议采用两种或两种以上的分析方法以达到所需的辨别水平。的分析方法以达到所需的辨别水平。1 1）专属性专属性p鉴别鉴别 合适的鉴别实验应能区别出可能存在结构相似的化合适的鉴别实验应能区别出可能存在结构相似的化合物。可以通过与已知参比物比较，从含有被分析物的样合物。可以通过与已知参比物比较，从含有被分析物的样品中得到的正结果和不含被分析物的样品中得到的负结果品中得到的正结果和不含被分析物的样品中得到的负结果来确定。此外，也可以采用与被测物结构相似或相关的物来确定。此外，也可以采用与被测物结构相似或相关的物质进行鉴别实验。对于这些可能会有潜在干扰的物质的选质进行鉴别实验。对于这些可能会有潜在干扰的物质的选择应当基于对这些干扰的物质做出合理的科学评判。择应当基于对这些干扰的物质做出合理的科学评判。1 1）专属性专属性 含量测定和杂质检测含量测定和杂质检测 对于色谱方法来说，应当用具有代表性的色谱图来证对于色谱方法来说，应当用具有代表性的色谱图来证明专属性，并在图上适当地标出每一种成分，其他分离技明专属性，并在图上适当地标出每一种成分，其他分离技术也应当有相似的考虑。应当在适合的程度上研究关键的术也应当有相似的考虑。应当在适合的程度上研究关键的色谱分离度。对于关键的分离度，能够通过两个洗脱最靠色谱分离度。对于关键的分离度，能够通过两个洗脱最靠近的化合物之间的分辨率来证明方法的专属性。近的化合物之间的分辨率来证明方法的专属性。当用非专属性方法做含量测定时，应当采用其他辅助当用非专属性方法做含量测定时，应当采用其他辅助性的分析方法来证明整体的专属性，例如：当为了放行而性的分析方法来证明整体的专属性，例如：当为了放行而采用滴定法测定原料药含量时，可以合并采用这种含量测采用滴定法测定原料药含量时，可以合并采用这种含量测定方法以及一种适当的杂质检查方法。定方法以及一种适当的杂质检查方法。1 1）专属性专属性常用的试验方法常用的试验方法:空白阴性对照试验空白阴性对照试验 比较同一分析系统对照品与供试品相应色谱峰的比较同一分析系统对照品与供试品相应色谱峰的吸收光谱吸收光谱 色谱色谱-质谱联用验证待测成分质谱联用验证待测成分2 2）线性线性 线性系指在设计的范围内，测试结果与供试品中被测物线性系指在设计的范围内，测试结果与供试品中被测物浓度直接呈正比关系的程度。浓度直接呈正比关系的程度。试验方法试验方法制备至少包含制备至少包含5 5个浓度（梯度浓度）的对照品溶液，分别进样个浓度（梯度浓度）的对照品溶液，分别进样测定测定以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性线性最小二乘法进行线性回归最小二乘法进行线性回归 数据要求：数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图应列出回归方程、相关系数和线性图 3 3）范围范围 范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。测试方法适用的高低限浓度或量的区间。确认方法是通过把含有被测物的样品在范围确认方法是通过把含有被测物的样品在范围的两个极端和范围内进行测试，考察是否可达到的两个极端和范围内进行测试，考察是否可达到精密度、准确度的线性的要求。精密度、准确度的线性的要求。3 3）范围范围实验项目实验项目限度限度范围范围含量测定含量测定标示量标示量90-110%90-110%测试浓度测试浓度80-120%80-120%杂质检查杂质检查限度值限度值限度值的限度值的50-120%50-120%溶出度溶出度限度值限度值限度值的限度值的20%20%释放度释放度1 1小时后小时后20%20%，2424小时后达到小时后达到90%90%，应为标示量的应为标示量的0-110%0-110%。含量均匀度含量均匀度测试浓度测试浓度测试浓度的测试浓度的70-130%70-130%3 3）范围（中药和复方制剂）范围（中药和复方制剂）含量限度有含量限度有上下限上下限的，一般设定范围低限为含量限度下限的的，一般设定范围低限为含量限度下限的50507070，范围的高限为含量限度上限的范围的高限为含量限度上限的130130150150。含量限度含量限度仅有低限仅有低限的，一般设定范围为含量限度的的，一般设定范围为含量限度的50507070至含量限度的至含量限度的2 25 5倍倍以上。以上。以以标示量规定标示量规定含量限度的，可参照化学药，含量限度的，可参照化学药，一般设定范围为一般设定范围为标示量的标示量的8080120120。中药含量限度的确定中药含量限度的确定 含量限度应根据中药制剂实