各论第一章羧酸及其酯类药物的分析详解.ppt

1,1,第一章 羧酸及其酯类药物的分析,药物分析学 各论,2019/9/6,2,药物分析学,,质量控制,,药 典,,鉴 别,纯度检查,含量测定,2019/9/6,3,各类（个）药物,分析方法,,,,Relationship,?,2019/9/6,4,本章要求,掌握芳酸及其酯类药物的结构特点和主要性质 掌握鉴别和含量测定的基本原理和方法（以水杨酸类为代表） 熟悉阿司匹林等的特殊杂质检查 了解脂肪酸及其酯类药物的分析,2019/9/6,5,芳酸,酸性强度依次: 无机酸、芳酸、 碳酸、 苯酚,,注意（芳酸类结构）：,共同特点：苯环、羧基,药理作用：抗炎、止痛、退热、抗凝血,羧基游离、形成盐或酯,PKa 3-6,pKa1 6.38,9.95,2019/9/6,6,典型的非甾体抗炎药物,水杨酸类 苯甲酸类 芳基乙酸类 芳基丙酸类 其他芳酸类,,——阿司匹林、对氨基水杨酸钠 ——甲芬那酸、丙磺舒、苯甲酸钠 ——双氯芬酸钠 ——布洛芬 ——普利类、他汀类、 氯钡丁酯,2019/9/6,7,一、典型药物结构,sodium aminosalicylate 对氨基水杨酸钠,,,,,水杨酸类,,,,2019/9/6,8,苯甲酸类,,,2019/9/6,9,芳基烷酸类,布洛芬 ibuprofen,,,2019/9/6,10,氯贝丁酯 clofibrate,,其他芳酸类,2019/9/6,11,结构特点,苯环 (phenyl ring) 羧基 (carboxyl) 邻位-酚羟基 (phenol hydroxyl) 个别药物特征取代基,2019/9/6,12,,游离羧基,阿司匹林,酯键,苯环 光谱,,pKa = 3.49,,H,2019/9/6,13,理化性质,溶解性 相似相溶的原则 对氨基水杨酸钠 溶于水 阿司匹林 溶于乙醇,2019/9/6,14,芳酸的酸性强度与分子中芳环、取代基(吸电子、给电子)、及其连接位置有关,酸性 芳酸具游离羧基，呈酸性 pKa为3～6，属中等强度的酸或弱酸,——可用于含量测定,2019/9/6,15,如酸性大小比较： 水杨酸 阿司匹林 苯甲酸,,OCOCH3,邻位-OH，吸电子基团 酸性增加 分子内氢键，增加其极性 酸性增加,pKa 2.95,3.49,4.26,2019/9/6,16,16,水解性 芳酸酯可水解，碱性条件下水解完全,——可用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定,酸性介质: 水解-酯化平衡，不可能全部水解,碱性介质: 过量碱(氢氧化钠和碳酸钠)中和产生的酸， 可水解完全,2019/9/6,17,,含酚羟基、潜在酚羟基的水杨酸类,,,与三氯化铁试液反应，显色,重氮化反应、重氮化-偶合反应,含芳伯氨基的对氨基水杨酸钠,含硫的丙磺舒 分解生成硫化物,,官能团反应特性,UV和IR特征,——可用于鉴别、含量测定,——可用于鉴别、含量测定,2019/9/6,18,,碱性条件：加速水解、完全水解,,二、鉴别试验,水解反应,2019/9/6,19,+ CH3COONa,,,,,,2019/9/6,20,,,加水煮沸水解,加氢氧化钠煮沸水解,稀盐酸酸化成弱酸性,阿司匹林：,对氨基水杨酸钠：,双水杨酯：,紫色类配位化合物,FeCl3反应,2019/9/6,21,具酚羟基或潜在酚羟基的药物,,,,,水杨酸及其盐类：,强酸会导致分解褪色，碱性会导致铁盐水解产生Fe(OH)3,2019/9/6,22,水杨酸 ChP（2010） [鉴别] （1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色,例子,阿司匹林 ChP（2010） [鉴别] （1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色,2019/9/6,23,,,苯甲酸类：,丙磺舒钠盐在pH 5.0~6.0 水溶液中与三氯化铁试液反应，生成米黄色沉淀,,2019/9/6,24,应用：对氨基水杨酸钠、贝诺酯水解产物，在稀盐酸中与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐再进一步偶合作用得到有色产物,具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,重氮化-偶合反应,,,2019/9/6,25,,,,,,丙磺舒的鉴别：,熔融,显硫酸盐反应,分解产物的反应,2019/9/6,26,紫外光谱法,最大、最小吸收波长 最大波长及其吸收系数或吸光度 两特征吸收波长及其吸光度之比,应注明所用溶剂、药物的浓度等条件,UV鉴别参数：,2019/9/6,27,例子,2019/9/6,28,——广泛应用于该类药物的原料药,中红外：4000~400 cm-1 特征区： 4000~1300 cm-1 2800  3000 cm-1 —CH3 1600  1850 cm-1 —C=O 指纹区：1250~400 cm-1,红外光谱法,2019/9/6,29,阿司匹林,,,,,,,,羟基OH3230 cm–1,羰基c=o 1660 cm–1,邻位取代苯环 δ Ar-H 775cm–1,苯环 C=C 1610、1570、1480、1460 cm–1,羧酸酯C–O 1310、1230、1188 cm–1,,,,2019/9/6,30,,阿司匹林中特殊杂质的检查 对氨基水杨酸钠中间氨基酚等 有关物质的检查 甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的检查,三、特殊杂质检查,2019/9/6,31,,阿司匹林中特殊杂质的检查,检查方法： （阿司匹林溶于碳酸钠，杂质不溶）,溶液的澄清度,检查碳酸钠试液中的不溶物：,未反应完全的水杨酸脱羧产生的 苯酚,乙酸苯酯 水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯,一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清。

苯酚发生副反应产生的,无羧基,2019/9/6,32,Chp(2005) 检查原理及方法： 阿司匹林无酚羟基，不能与直接高铁盐作用 水杨酸可直接与高铁盐反应呈色,,游离水杨酸,来源：生产中乙酰化不完全、贮藏中水解都会产生 检查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物质,,对照法：与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，控制游离水杨酸的限量2019/9/6,33,,游离水杨酸,Chp(2010)检查方法： 流动相： 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： ODS 定量方法：外标一点法,限量规定： 原料 0.1% 阿司匹林片 0.3% 阿司匹林肠溶片 1.5% 阿司匹林栓 3.0%,HPLC法,为什么原料药和制剂都要进行水杨酸的检查？,2019/9/6,34,,有关物质,检查方法：HPLC,除“游离水杨酸”之外的其他合成副产物 包括：,对照液：供试液稀释200倍 固定相： ODS 流动相: A为乙腈- 四氢呋喃- 冰乙酸-水（20∶5∶5∶70） B为乙腈（ 梯度洗脱）,,苯酚 乙酸苯酯 水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯 双水杨酯 乙酰水杨酰水杨酸 水杨酸酐 乙酰水杨酸酐,主成分自身对照法,杂质峰面积和不得大于对照液主峰面积,2019/9/6,35,,对氨基水杨酸钠中间氨基酚等有关物质的检查,检查方法：HPLC,有关物质：间氨基酚、5- 氨基水杨酸、其他未知杂质,来源：未反应完全的间氨基酚原料，贮藏过程中脱羧产生,检查原因：易氧化成醌型化合物，使药物变色；有毒,间氨基酚：外标法定量,其它有关物质：主成分自身对照法，限量检查,固定相：ODS 流动相：甲醇-10% 四丁基氢氧化钠溶液 -0.05 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 200∶19∶400∶400）,2019/9/6,36,,酸碱滴定法 UV法 HPLC法,直接滴定法 水解后剩余滴定法 非水溶液滴定法,,四、含量测定,2019/9/6,37,直接滴定法 水解后剩余滴定法 两步滴定法,酸碱滴定法,强碱滴定本类药物的羧基,2019/9/6,38,水杨酸类的酚羟基可以发生 A. 三氯化铁反应 B. 水解反应 C. 酯化反应 D. 沉淀反应 E. 重氮化-偶合反应,,课前回顾,2019/9/6,39,水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是 A. pH10.0 B. pH2.0 C. pH7～8 D. pH4～6 E. pH2.0±0.1,,2019/9/6,40,区别阿司匹林和丙磺舒，最常用的试液是 A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾,,2019/9/6,41,阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是 A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸 C. 水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯,,2019/9/6,42,阿司匹林中要求检查的已知杂质为 A. 乙酰水杨酸酐 B. 乙酰水杨酸水杨酸 C. 水杨酸 D. 水杨酰水杨酸 E. 以上都不对,,2019/9/6,43,阿司匹林中水杨酸的检查为什么由对照法改为HPLC？ A. 除了水杨酸还有有关物质 B. 对照法无法比较结果 C. 没有水杨酸对照品 D. 检查过程中阿司匹林可能水解 E. 以上都不对,,2019/9/6,44,对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是 A. 水杨酸 B. 间氨基酚 C. 氨基酚 D. 苯酚 E. 苯胺,,2019/9/6,45,酸碱中和，反应摩尔比1:1,乙醇作用：溶解ASA 防止ASA在滴定过程水解,中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性,直接滴定法,,,2019/9/6,46,阿司匹林 ChP（2010）,注意事项,用中性乙醇作溶剂 不断搅拌、稍快滴定，以防止局部碱度过大，促使水解 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定,2019/9/6,47,USP（32）,,,同时进行空白试验：,不加供试品的空白试剂相同条件下试验,水解后剩余滴定法,,酸碱中和、酯键水解，反应摩尔比1:2,2019/9/6,48,剩余滴定法为什么进行空白试验？,1ml 氢氧化钠（0. 5mol/l） 1ml 硫酸（0. 25mol/l）,相当,,消除空白试剂及CO2的影响 空白消耗的体积与含量计算有关,滴定液吸收CO2转变成Na2CO3 由于酚酞为指示剂 硫酸回滴时化学计量关系不同,2019/9/6,49,,,,,空 白,滴 定,NaOH,H2SO4,V0,,V,V2,V1,剩余滴定法消耗NaOH,V1＝ V0-V,,,NaOH,H2SO4,,,,2019/9/6,50,案例： 某药检所抽取某医院药房阿司匹林片，测定结果为94.8%，低于含量限度（95.0%-105.0%），按药品法规要求，应没收作劣药处理，并进行罚款。

因为含量处于边缘，对疗效不会造成很大影响，医院从经济角度出发，力争继续使用双方为此发生激烈争执问题： 阿司匹林片可以采用酸碱滴定法吗？辅料会不会干扰测定？测定条件？干扰因素？,（片剂含酒石酸、水杨酸和醋酸等酸性稳定剂）,2019/9/6,51,反应原理：反应分两步进行 第一步 中和（酸杂质） 第二步 水解、剩余滴定,两步滴定法,适用对象：阿司匹林片、肠溶片等制剂,2019/9/6,52,第一步 中和,,,2019/9/6,53,第二步 水解后剩余滴定,水解：,2NaOH（过量）＋H2SO4 ＝Na2SO4＋2H2O,剩余滴定,,,反应摩尔比为1∶1,同时进行空白试验,2019/9/6,54,片剂含量测定结果的计算,原料含量,,2019/9/6,55,ChP 水杨酸二乙胺乳膏剂、丙磺舒片剂,紫外分光光度法,直接UV法,,2019/9/6,56,,,丙磺舒片剂含量测定：取本品10 片，精密称定，研细，精密称取适量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 与盐酸溶液（9 → 100）4 ml，置70℃水浴上加热30 min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml 量瓶中，加盐酸溶液（9 → 100）2 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，在249 nm 波长处测定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系数为338 计算含量。