临床医学检验技士考试'辅导之2019年度检验技士精编体验课
20页1、2019年检验技士精选体验课四、血液涂片制备 一张良好的血片 厚薄适宜 头体尾明显 细胞分布均匀 血膜边缘整齐 并留有一定空隙血涂片的制备 手工推片法2530夹角 血滴大小、推片与载玻片间夹角、推片速度、血细胞比容。 厚血膜涂片法 疟原虫、微丝蚴等。五、血液细胞染色 瑞氏染色法 1.染料组成 染料组成 酸性染料伊红(E-) 钠盐 阴离子碱性染料亚甲蓝(M) 氯盐 阳离子 将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中。 甲醇的作用:一是溶解亚甲蓝和伊红;二是固定细胞形态。2.染色原理 物理吸附与化学亲和作用 中性颗粒呈等电状态与E-和M+结合淡紫红色 红细胞原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。 3.pH值的影响 细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液pH而定,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红,细胞核呈淡蓝色或不染色;在偏碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,嗜酸性颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗粒
2、偏粗,呈紫黑色。pHpIPr带正电荷多易与E-结合染色偏红pHpIPr带负电荷多易与M+结合染色偏蓝磷酸盐缓冲液(pH6.46.8)保证细胞受色时恒定最佳pH条件4.注意事项 (1)血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。 (2)冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。(3)染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。六、方法学评价 1.血涂片制备 用血量少、操作简单,是应用最广泛的方法。疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。2.血液细胞染色 瑞氏染色法:最经典、最常用。对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果,但对细胞核的着色能力略差。 吉姆萨染色法:对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好,结构更清晰,但对细胞质成分的着色能力略差。 瑞-吉姆萨复合染色:使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。 瑞氏染料的质量规格用吸光度比值(rA)来评价。 新配制染料rA接近2,降到(1.30.1)染料即可使用。 新鲜配制的
3、染料偏碱,须在室温或是37下贮存一定时间,待亚甲蓝逐渐变为天青B,贮存时间愈久,染色效果愈好。在贮存过程中,必须加塞,以防甲醇挥发和氧化成甲酸。所用甲醇须为AR级,若其中含过多丙酮,会使染色偏酸,白细胞着色不良。七、质量控制 1.血涂片制备 血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚,反之则愈薄。 血细胞比容增高、血液黏度较高时,采用小血滴、小角度、慢推;血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。 2.血液细胞染色 染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH值密切相关。 血清与血浆的区别是A.血清缺少某些凝血因子 B.血浆缺少某些凝血因子 C.血清缺少凝血酶 D.血浆缺少凝血酶 E.血清缺少纤维蛋白 正确答案A 答案解析血清与血浆的差别是:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子(纤维蛋白原)、(凝血酶原)、等。婴幼儿做血常规检查时,多使用的采血部位是A.颈外静脉 B.耳垂毛细血管 C.足跟毛细血管 D.肘部静脉 E.以上都是 正确答案C 答案解析手指采血操作方便,检查结果比较恒定,世界卫生组织(WHO)推荐采集左手无名指指端内侧血液,婴幼儿可采集大踇趾或足跟
4、内外侧缘血液,严重烧伤患者,可选择皮肤完整处采血。下列说法错误的是 A.采血前要仔细检查针头是否安装牢固 B.采血前要仔细检查针筒内是否有空气和水分 C.使针头与皮肤成30角斜行快速刺入皮肤 D.抽血时针栓可以外抽和内推 E.取下注射器针头,将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中 正确答案D 答案解析抽血时只能外抽,不能内推。导致溶血的因素不包括 A.抽血速度太快B.血液注入容器时未取下针头C.注入抗凝管后剧烈振荡混匀D.注射器干燥E.取血后直接放入4冰箱 正确答案D 答案解析注射器中有水会导致溶血,干燥不会。血液标本4保存,可使血液分析仪A.红细胞计数结果减低B.红细胞分布宽度增加C.血小板计数结果增加D.血小板计数结果减低E.白细胞计数结果减低 正确答案D 答案解析血浆在4保存24h后,某些凝血因子活性减少95%,低温(4)保存血液可使血小板计数结果减低。影响血涂片时血膜厚度的因素有 A.血滴大小 B.血黏度高低C.推片角度D.推片速度E.以上都是正确答案E 答案解析制备涂片时,血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚,反之则愈薄。血细胞比容增高、血液黏度较高时,应采用小血滴、小角度、慢
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