中药有效成分提取分离和结构鉴定.ppt

第二节第二节 中药有效成分的提取、分离方法中药有效成分的提取、分离方法[基本要求基本要求]v掌握掌握: 溶剂提取法的原理；浸渍法、煎煮法、回流提溶剂提取法的原理；浸渍法、煎煮法、回流提取法和连续回流提取法的适用范围及特点；渗漉法的取法和连续回流提取法的适用范围及特点；渗漉法的特点；两相溶剂萃取法的原理和方法；结晶纯度的判特点；两相溶剂萃取法的原理和方法；结晶纯度的判定；色谱法在中药化学成分分离中的应用定；色谱法在中药化学成分分离中的应用v熟悉：熟悉：其它内容其它内容 提取分离中药有效成分有提取分离中药有效成分有提取分离中药有效成分有提取分离中药有效成分有两种两种两种两种情况：情况：情况：情况：　　　　　　　　第一，从中药中提取已知的有效成分，或已知的第一，从中药中提取已知的有效成分，或已知的第一，从中药中提取已知的有效成分，或已知的第一，从中药中提取已知的有效成分，或已知的化学结构类型者　　化学结构类型者　　化学结构类型者　　化学结构类型者　　　　第二，对中药有效成分的性质一无所知　　第二，对中药有效成分的性质一无所知　　第二，对中药有效成分的性质一无所知　　第二，对中药有效成分的性质一无所知。

　　　　对中药所含成分进行提取时：对中药所含成分进行提取时：对中药所含成分进行提取时：对中药所含成分进行提取时：•使杂质不被提取出来使杂质不被提取出来使杂质不被提取出来使杂质不被提取出来•或在处理过程中尽可能地除去杂质或在处理过程中尽可能地除去杂质或在处理过程中尽可能地除去杂质或在处理过程中尽可能地除去杂质•最后获得有效成分最后获得有效成分最后获得有效成分最后获得有效成分  注意事项注意事项 ！！！！！！ 1、、 基原鉴定基原鉴定 2、查阅文献，了解前人的经验查阅文献，了解前人的经验 3、对未知成分，综合考虑以上因素对未知成分，综合考虑以上因素 4、化合物的结构与极性、化合物的结构与极性 （（1）极性基团与非极性基团的性质与数量极性基团与非极性基团的性质与数量 （（2）分子体积大小分子体积大小 （（3）酸性基团加碱成盐为极性物质；碱性基团加酸）酸性基团加碱成盐为极性物质；碱性基团加酸成盐为极性物质；分子易于形成分子内氢键极性变成盐为极性物质；分子易于形成分子内氢键极性变小。

小 极性基团：极性基团：-COOH、、–OH、、-NH2等等 中等极性基团：中等极性基团：-O-R、、-COOR等等 非极性基团：非极性基团：烷基等烷基等•室温、加热，冷提杂质较少，冷时难溶，而室温、加热，冷提杂质较少，冷时难溶，而热提效率较高，热时易溶；热提效率较高，热时易溶；•一般采用温和的条件，不用酸碱；一般采用温和的条件，不用酸碱；•水、有机溶剂（缺点）；水、有机溶剂（缺点）；•有效成分伴有杂质时，溶解度显著增加；有效成分伴有杂质时，溶解度显著增加；•工厂生产方法和实验室方法工厂生产方法和实验室方法•溶剂提取法溶剂提取法•水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法•超临界流体萃取法超临界流体萃取法•升华法升华法•超声波提取法超声波提取法•微波辅助提取法微波辅助提取法•酶法、半仿生提取法酶法、半仿生提取法•破碎提取法破碎提取法•压榨法压榨法中药化学成分提取方法分类1 1、溶剂提取法、溶剂提取法 　　 选用适当的溶剂将中药中的被测成分溶出的方法选用适当的溶剂将中药中的被测成分溶出的方法1 1）原理）原理 根据中药中有效成分在溶剂中的溶解性质，选用根据中药中有效成分在溶剂中的溶解性质，选用对有效成分溶解度大，对其他成分溶解度小的溶剂，对有效成分溶解度大，对其他成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。

而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法一、提取方法一、提取方法（（（（2 2 2 2）溶剂选择）溶剂选择）溶剂选择）溶剂选择 遵循遵循““相似相溶相似相溶””原则即中药成分的亲水性或原则即中药成分的亲水性或亲亲 脂性应与溶剂的此项性质相当脂性应与溶剂的此项性质相当 选择溶剂要注意以下三点：选择溶剂要注意以下三点： ①①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小； ② ②溶剂不能与中药的成分起化学变化；溶剂不能与中药的成分起化学变化； ③ ③溶剂要经济、易得、使用安全等溶剂要经济、易得、使用安全等常用提取溶剂按极性由弱到强的顺序常用提取溶剂按极性由弱到强的顺序石油醚＜四氯化碳＜苯＜二氯甲烷＜氯仿石油醚＜四氯化碳＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇 ＜丙酮＜乙醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜甲醇＜水Simple percolate assembly 1、溶剂提取法、溶剂提取法（（（（3 3）具体方法）具体方法）具体方法）具体方法1) 冷提：冷提：适用于受热不稳定的成分适用于受热不稳定的成分。

浸渍浸渍 (Maceration) 渗漉（渗漉（Percolation））一、提取方法一、提取方法工业生产用的渗漉装置工业生产用的渗漉装置 一、提取方法一、提取方法2) 热提：煎煮法（热提：煎煮法（Decoction）） 回流（回流（Refluxing）） 连续回流（连续回流（Continuous Refluxing））Simple refluxing assembly Assembly of Soxhlet extractor 一、提取方法一、提取方法•水水 糖类、有机酸、酚类、鞣质、无机盐、氨基酸、蛋糖类、有机酸、酚类、鞣质、无机盐、氨基酸、蛋白质、果胶、苷类、水溶性生物碱白质、果胶、苷类、水溶性生物碱•甲醇、乙醇、丙酮甲醇、乙醇、丙酮 黄酮、蒽醌、有机酸、酚类、香豆素、苷类、生物黄酮、蒽醌、有机酸、酚类、香豆素、苷类、生物碱及其盐碱及其盐•正丁醇正丁醇 皂苷皂苷•乙酸乙酯：乙酸乙酯：黄酮苷黄酮苷•氯仿：乙醇＝氯仿：乙醇＝2 2：：1 1 强心苷强心苷 •乙醚、氯仿乙醚、氯仿 生物碱、苷元、醌生物碱、苷元、醌　　　　　　　　　　　　　　•石油醚、己烷石油醚、己烷 蜡、树脂和叶绿素、挥发油、萜类、甾体、脂肪油蜡、树脂和叶绿素、挥发油、萜类、甾体、脂肪油、脂溶性色素、苷元、脂溶性色素、苷元2. 水蒸气蒸馏法（水蒸气蒸馏法（water-steam distillation ）） 提取具有挥发性，能随水蒸气提取具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。

蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油 Simple water-steam distillation refluxing assembly 一、提取方法一、提取方法3. 升华法（升华法（ sublimation ）） 用于具有升华性的成分提取，如香豆素，蒽醌，用于具有升华性的成分提取，如香豆素，蒽醌，樟脑等 一、提取方法一、提取方法l 超超临临界界流流体体的的密密度度与与液液体体很很接接近近，，而而它它又又具具有有气气体体扩散性能扩散性能l常用的临界流体有常用的临界流体有CO2、、N2O、、 乙烷、丙烷乙烷、丙烷等4. 超临界流体提取法（超临界流体提取法（supercritical fluid extraction SFE) 利用溶剂在超临界条件下特殊的流体性能对样品进利用溶剂在超临界条件下特殊的流体性能对样品进行提取，为行提取，为20世纪世纪80年代迅速发展起来的一种提取方法年代迅速发展起来的一种提取方法 一、提取方法一、提取方法控温面板控温面板高压泵高压泵超临界超临界超临界超临界COCO2 2萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图原原料料萃取柱萃取柱玻玻璃璃珠珠脱脱脂脂棉棉超临界萃取实验装置与实验方法超临界萃取实验装置与实验方法CO2钢瓶P PCOCO2 2冷温槽恒恒恒恒温温温温箱箱箱箱流量计接接收收瓶瓶小试实验装置图小试实验装置图实验装置实验装置－小试实验装置－小试实验装置•上世纪上世纪上世纪上世纪5050年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青•7070、、、、8080年代，年代，年代，年代，SFESFE越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取•9090年年年年代代代代，，，，开开开开始始始始从从从从植植植植物物物物药药药药中中中中提提提提取取取取成成成成分分分分，，，，如如如如蛇蛇蛇蛇床床床床子子子子、、、、茵茵茵茵陈陈陈陈蒿、桑白皮中提取成分。

蒿、桑白皮中提取成分蒿、桑白皮中提取成分蒿、桑白皮中提取成分中中小小型型SFESFE装装装装置置置置图图图图 为物理过程，无化为物理过程，无化学反应，生物活性不学反应，生物活性不减大能量的超声波减大能量的超声波产生的极大压力造成产生的极大压力造成植物物细胞壁及整个植物物细胞壁及整个生物体破裂，胞内物生物体破裂，胞内物质的释放、扩散及溶质的释放、扩散及溶解5. 超声提取法（超声提取法（ultrasonic extraction)实验室用小型超声仪实验室用小型超声仪 一、提取方法一、提取方法工工业业生生产产用用超超声声仪仪6. 微波提取法（微波提取法（microwave extraction）） •具具有有穿穿透透力力强强、、选选择择性性高高、、加加热热效效率率高高等等显显著著特特点点，，而而且且其其操操作作简简便便、、快快速速、、节节能能、、高效•缺缺点点：：工工业业化化设设备备少少、、成成分分变变化化、、生生物物活活性性变化工业生产用微波提取罐工业生产用微波提取罐 一、提取方法一、提取方法二、分离与精制方法二、分离与精制方法1 1、根据物质的、根据物质的分配比分配比2 2、根据物质的、根据物质的溶解度溶解度3 3、根据物质的、根据物质的吸附性吸附性4 4、根据物质的、根据物质的解离程度解离程度5 5、根据物质的、根据物质的分子大小分子大小  二、分离与精制方法二、分离与精制方法1.1.根据物质在两相溶剂中的根据物质在两相溶剂中的分配比分配比不同进行分离不同进行分离 （（1 1）两相溶剂萃取法：）两相溶剂萃取法：利用混合物中各组成成分在两利用混合物中各组成成分在两相溶剂（互相饱和的水相与有机相）中分配系数不相溶剂（互相饱和的水相与有机相）中分配系数不同而达到分离的方法。

同而达到分离的方法分配系数分配系数K=C1/C2K=C1/C2C1C1、、C2C2为被分离物质在上相和下相中浓度为被分离物质在上相和下相中浓度影响分离的因素影响分离的因素①①分离因子分离因子ββ，，分配系数分配系数K K β= KA/ KB β= KA/ KB ②②pHpH值值 对于酸性、碱性、两性化合物，对于酸性、碱性、两性化合物，pHpH值可改变它们值可改变它们的存在状态的存在状态二、分离与精制方法二、分离与精制方法 药材药材甲醇或乙醇提取，回收醇两相溶剂萃取在操作中的注意要点：两相溶剂萃取在操作中的注意要点： ①①先用小试管猛烈振摇约先用小试管猛烈振摇约1min1min，观察萃取后二液，观察萃取后二液层分层现象层分层现象如果容易产生如果容易产生乳化乳化，大量萃取时要，大量萃取时要避免猛烈振摇，可延长萃取时间避免猛烈振摇，可延长萃取时间 乳化现象解决办法乳化现象解决办法•将乳化层分出，再用新溶剂萃取；将乳化层分出，再用新溶剂萃取；•或将乳化层抽滤；或将乳化层抽滤；•或将乳化层稍稍加热；或将乳化层稍稍加热；•或将乳化层稍稍加盐；或将乳化层稍稍加盐；•或较长时间放置并不时旋转，令其自然分层；或较长时间放置并不时旋转，令其自然分层；•或离心。

或离心②②水提取液的浓度最好在比重水提取液的浓度最好在比重1.11.1～～1.21.2之间，过稀则溶之间，过稀则溶剂用量太大，影响操作剂用量太大，影响操作 ③③溶剂与水溶液应保持一定量的比例溶剂与水溶液应保持一定量的比例④④一般萃取一般萃取3 3～～4 4次即可⑤⑤如为小量萃取，可在分液漏斗中进行；如系中量萃取，如为小量萃取，可在分液漏斗中进行；如系中量萃取，可在下口瓶中进行可在下口瓶中进行 （（2 2）酸碱性成分的分离）酸碱性成分的分离——pH-pH-梯度萃取法梯度萃取法 按酸碱性强弱不同分离酸性、碱性、中性物质，按酸碱性强弱不同分离酸性、碱性、中性物质，改变改变pHpH值使酸碱成分呈不同状态值使酸碱成分呈不同状态 酸水：酸水：0.1%-1%H2SO4、、HCl、、HOAc 碱水：碱水：0.3～～0.5％％NaOH 酸性化合物酸性化合物可分为可分为强酸性、弱酸性和酚性强酸性、弱酸性和酚性三种，它们三种，它们分别溶于分别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠，借此可达到，借此可达到分离。

分离 内酯类化合物内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐溶于不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐溶于水，再加酸酸化，又重新形成内酯环从溶液中析出，水，再加酸酸化，又重新形成内酯环从溶液中析出，从而与其它杂质分离从而与其它杂质分离 生药生药H+/H2O药渣药渣Alk OH-/H2OH+/H2OOH-弱碱及杂质弱碱及杂质亲水性亲水性Alk（（3 3）液）液- -液分配柱色谱法液分配柱色谱法 色色谱谱法法或或色色谱谱学学，，又又称称为为色色层层法法或或层层析析法法，，是是一种一种物理化学分离物理化学分离和和分析分析方法 色色谱谱法法是是基基于于样样品品组组分分在在互互不不相相溶溶的的两两““相相””溶溶剂剂之之间间的的分分配配系系数数之之差差（（分分配配层层析析）），，吸吸附附剂剂对对组组分分吸吸附附能能力力不不同同（（吸吸附附层层析析）），，离离子子交交换换，，分分子子的大小的大小（排阻层析）的微小差异而分离排阻层析）的微小差异而分离  色谱法分类色谱法分类①①按两相物理状态分类按两相物理状态分类 流动相为气体称流动相为气体称气相色谱气相色谱，流动相为液体称，流动相为液体称液相色谱液相色谱。

固定相可以是液体或固体，可组合成四种色谱类型：固定相可以是液体或固体，可组合成四种色谱类型：气－固色谱气－固色谱 GSC（（gas-solid chromatography) ) 气－液色谱气－液色谱 GLC(gas-liquid chromatography) 液液——固色谱固色谱 LSC(liquid-solid chromatography) 液－液色谱液－液色谱 LLC（（Liquid-liquid chromatography) ②②按固定相的形态分类按固定相的形态分类 ⅰ.ⅰ.柱色谱柱色谱( (column chromatograaphy) ) 固定相装在色谱柱内称为柱色谱固定相装在色谱柱内称为柱色谱 ⅱ.ⅱ.平板色谱平板色谱( (planar chromatograaphy) ) 固定相呈平板状，包括薄层色谱和纸色谱固定相呈平板状，包括薄层色谱和纸色谱 A A 薄层色谱薄层色谱( (TLC) ) 固定相以均匀薄层涂敷在玻璃板或塑料板上，或固定相以均匀薄层涂敷在玻璃板或塑料板上，或将固定相直接制成薄板状将固定相直接制成薄板状 B B 纸色谱纸色谱( (PC) ) 用滤纸作固定相或固定相载体的色谱用滤纸作固定相或固定相载体的色谱③③按分离过程物理化学原理分类按分离过程物理化学原理分类 ⅰ ⅰ 吸附色谱吸附色谱(adsoption chromatograaphy) 用固体吸附剂用固体吸附剂( (硅胶、中性氧化铝、活性炭、聚酰胺硅胶、中性氧化铝、活性炭、聚酰胺) )作色谱固定相，样品各组分在吸附剂上吸附力的大小作色谱固定相，样品各组分在吸附剂上吸附力的大小不同，因而吸附平衡常数不同，据此可将各组分分离。

不同，因而吸附平衡常数不同，据此可将各组分分离 硅硅 胶：皂苷、蒽醌苷、强心苷、生物碱胶：皂苷、蒽醌苷、强心苷、生物碱 氧化铝：生物碱、甾、萜氧化铝：生物碱、甾、萜 活性炭：氨基酸、糖、苷活性炭：氨基酸、糖、苷 聚酰胺：黄酮、蒽醌、鞣质聚酰胺：黄酮、蒽醌、鞣质ⅱ ⅱ 分配色谱分配色谱(partition chromatograaphy) 用液体作固定相，利用试样组分用液体作固定相，利用试样组分( (亦称为溶质亦称为溶质) )在固在固定相中溶解、吸收或吸着定相中溶解、吸收或吸着(sorption)能力不同，因而在能力不同，因而在两相间分配系数不同将组分分离两相间分配系数不同将组分分离 在液－液分配色谱中，根据流动相和固定相相对极在液－液分配色谱中，根据流动相和固定相相对极性不同，又分为性不同，又分为: : A A 正相分配色谱正相分配色谱 B B 反相分配色谱反相分配色谱正相分配色谱正相分配色谱, ,简称正相色谱简称正相色谱(NPC): (NPC): 以强极性、亲水性物质或溶液为固定相（氰基与氨以强极性、亲水性物质或溶液为固定相（氰基与氨基基CN-NH2CN-NH2），非极性、弱极性或亲脂性溶剂为流动相，），非极性、弱极性或亲脂性溶剂为流动相，为正相分配色谱。

为正相分配色谱分离：极性、中等极性分子分离：极性、中等极性分子反相分配色谱，简称反相色谱（反相分配色谱，简称反相色谱（RPCRPC）：）： 若以弱极性、亲脂性物质为固定相（十八烷基硅若以弱极性、亲脂性物质为固定相（十八烷基硅烷烷ODSODS），极性、亲水性溶剂或水溶液为流动相），极性、亲水性溶剂或水溶液为流动相( (甲甲醇醇- -水，乙腈水，乙腈- -水），则称为反相分配色谱水），则称为反相分配色谱分离：非极性、中等极性分子分离：非极性、中等极性分子（（3）液）液-液分配柱色谱液分配柱色谱①①正正相相色色谱谱：：固固定定相相极极性性大大，，如如水水、、缓缓冲冲液液等等；；流流动动相相极性小极性小，如氯仿、乙酸乙酯等如氯仿、乙酸乙酯等载体：硅胶（含水可达载体：硅胶（含水可达17%），硅藻土，纤维素等硅藻土，纤维素等分离极性大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等分离极性大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等 洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来 ②②反反相相色色谱谱：：固固定定相相极极性性小小于于流流动动相相如如HPLC反反相相柱，反相板。

柱，反相板 固定相固定相：硅胶硅醇基结合烷基，如：硅胶硅醇基结合烷基，如RP-2，，RP-8，，RP-18亲脂性：亲脂性：RP-18 >RP-8 >RP-2 流动相流动相(洗脱剂洗脱剂)：：MeOH-H2O，，CH3CN-H2O 洗脱顺序：洗脱顺序：分离极性小的成分分离极性小的成分，极性大者先洗脱，极性大者先洗脱下来 （（4 4）逆流连续萃取法）逆流连续萃取法（（5 5）逆流分配法（）逆流分配法（CCDCCD））（（6 6）液滴逆流分配法（）液滴逆流分配法（DCCCDCCC））（（7 7）高速逆流色谱（）高速逆流色谱（HSCCCHSCCC）） 二、分离与精制方法二、分离与精制方法2. 2. 根据根据溶解度溶解度差别进行分离差别进行分离2.1 2.1 沉淀法沉淀法 定义：定义：中药提取物的溶液加入某些试剂后可降低某些中药提取物的溶液加入某些试剂后可降低某些成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出，或有些中药成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出，或有些中药化学成分能与某些试剂生成沉淀的一种方法化学成分能与某些试剂生成沉淀的一种方法 分类：分类：试剂沉淀法、铅盐沉淀法、盐析法试剂沉淀法、铅盐沉淀法、盐析法 二、分离与精制方法二、分离与精制方法（（1 1）试剂沉淀法）试剂沉淀法 ①①分级沉淀法（水提醇沉法）分级沉淀法（水提醇沉法） ② ②碱提酸沉法：酸性成分碱提酸沉法：酸性成分③③酸提碱沉法：生物碱的分离酸提碱沉法：生物碱的分离④④专属试剂沉淀法专属试剂沉淀法 某些试剂能选择性地沉淀某类成分。

某些试剂能选择性地沉淀某类成分 雷氏铵盐雷氏铵盐----生物碱；生物碱； 胆甾醇胆甾醇----甾体皂苷；甾体皂苷； 明胶或蛋白质明胶或蛋白质----鞣质（（2 2）铅盐沉淀法）铅盐沉淀法 原理：原理：利用利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅中性醋酸铅或碱式醋酸铅在在水或稀醇水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐，而用于溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐，而用于分离中药成分分离中药成分 如中性醋酸铅用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、如中性醋酸铅用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、粘液质、鞣质、树脂、酸性皂苷、部分黄酮等粘液质、鞣质、树脂、酸性皂苷、部分黄酮等（（3 3）盐析法）盐析法 在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐（（氯化钠氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等），至一、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等），至一定浓度或饱和状态，使某些中药成分在水中溶解定浓度或饱和状态，使某些中药成分在水中溶解度降低而析出，或用有机溶剂萃取出来度降低而析出，或用有机溶剂萃取出来二、分离与精制方法二、分离与精制方法2.2 2.2 结晶法结晶法（纯化时常用）（纯化时常用） 化合物由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过化合物由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程称为程称为结晶结晶。

初析出的结晶往往不纯，进行再次结初析出的结晶往往不纯，进行再次结晶的过程称为晶的过程称为重结晶结晶经重结晶后所得各部分结晶经重结晶后所得各部分母液，再经处理又可分别得到第二批、第三批结晶，母液，再经处理又可分别得到第二批、第三批结晶，称为称为分步结晶法或分级结晶分步结晶法或分级结晶 结晶的目的结晶的目的 一个固体成分达到了一定的纯度，在一定的一个固体成分达到了一定的纯度，在一定的条件下，就会呈结晶状，这样就可使结晶和母条件下，就会呈结晶状，这样就可使结晶和母液分开，以达到进一步分离纯化的目的。

液分开，以达到进一步分离纯化的目的结晶的条件结晶的条件1 1、有效成分在欲结晶的混合物中的含量、有效成分在欲结晶的混合物中的含量 2 2、合适的溶剂条件、合适的溶剂条件3 3、有效成分在所选择的溶剂中的浓度、有效成分在所选择的溶剂中的浓度 4 4、合适的温度和时间、合适的温度和时间 3.1 3.1 吸附分类：吸附分类： 物物理理吸吸附附：：无无选选择择性性的的吸吸附附，，吸吸附附－－解解析析发发生生迅迅速速吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等； 化化学学吸吸附附：：不不可可逆逆性性如如碱碱性性氧氧化化铝铝对对酚酚酸酸性性成成分分的吸附等的吸附等 半化学吸附半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附 分离与精制方法分离与精制方法3.3. 根据物质的根据物质的吸附性吸附性差别进行分离差别进行分离————吸附色谱法吸附色谱法吸附原理：相似相吸吸附原理：相似相吸影响吸附过程的三要素：影响吸附过程的三要素： 吸附剂（固定相）；吸附剂（固定相）； 溶质（被分离物质）；溶质（被分离物质）； 溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相）溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相） 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.2 3.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝： 极性吸附剂极性吸附剂：载样量大，吸：载样量大，吸附力强附力强 硅胶硅胶：应用最广，：应用最广，适用于各适用于各类成分分离类成分分离 氧化铝氧化铝：有中性、酸性、碱：有中性、酸性、碱性氧化铝。

性氧化铝碱性氧化铝不适合碱性氧化铝不适合于分离酸性成分，多用于分离于分离酸性成分，多用于分离生物碱生物碱 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝： ①①被分离物质吸附力与结构的关系被分离物质吸附力与结构的关系 被分离物质极性大，吸附力强，被分离物质极性大，吸附力强，Rf值小，洗脱难，值小，洗脱难，后被洗脱下来后被洗脱下来比移值（比移值（Rf）＝原点中心至斑点中心的距离）＝原点中心至斑点中心的距离 / 原点中原点中心至溶剂前沿的距离心至溶剂前沿的距离 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝：官能团极性大小排列顺序：官能团极性大小排列顺序： -COOH > Ar-OH > R-OH > R-NH2，，RNHR ', RNR ' R " > R-CO-NR'R"> RCHO > RCOR ' > RCOOR ' > ROR ' >RH②②溶剂溶剂( (洗脱剂洗脱剂) )的极性与洗脱力的关系的极性与洗脱力的关系洗脱剂极性越大洗脱剂极性越大, , 洗脱力越强洗脱力越强 二、分离与精制方法二、分离与精制方法 练习练习: : 从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分成分, , 比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序。

比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序名称名称RR’黄夹苷黄夹苷ACHO(D-Glc)2黄夹苷黄夹苷BCH3(D-Glc)2黄夹次苷黄夹次苷ACHOH黄夹次苷黄夹次苷BCH3H黄夹次苷黄夹次苷CCH2OHH黄夹次苷黄夹次苷DCOOHH单乙酰黄夹单乙酰黄夹次苷次苷BCH3H单乙酰黄夹次苷单乙酰黄夹次苷B R”=COCH3, 其它其它R”=H 二、分离与精制方法二、分离与精制方法 二、分离与精制方法二、分离与精制方法答案：答案：1. 1. 极性大极性大 小：黄夹苷小：黄夹苷A A＞黄夹苷＞黄夹苷B B ＞次＞次苷苷D D＞次苷＞次苷C C＞次苷＞次苷A A＞次苷＞次苷B B ＞单乙酰次苷＞单乙酰次苷B2. 2. 硅胶柱上的出柱顺序：后硅胶柱上的出柱顺序：后 先先 3.3 活性炭活性炭——非极性吸附剂非极性吸附剂•①①吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系 分子量大者分子量大者 > 分子量小者分子量小者 芳香族芳香族> 脂肪族脂肪族•②②洗脱力与溶剂的关系洗脱力与溶剂的关系 吡啶吡啶 > 醇醇 > 含水醇含水醇>H2O•③③应用应用: 黄酮、生物碱的富集，糖的分离、脱色等。

黄酮、生物碱的富集，糖的分离、脱色等 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.4 聚酰胺聚酰胺(Polyamide): 是由己酰胺聚合成的一类高是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物分子化合物二、分离与精制方法二、分离与精制方法分离原理分离原理：主要通过：主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键氢键，产生，产生吸附吸附作用吸附力取决于作用吸附力取决于形成氢键缔合的形成氢键缔合的能力能力 3.4 聚酰胺聚酰胺 ①①吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系 a.a.形成氢键的基团数目越多形成氢键的基团数目越多, , 吸附力越强吸附力越强; ; b.b.形成分子内氢键者形成分子内氢键者, , 吸附力减少吸附力减少; ; 二、分离与精制方法二、分离与精制方法d.d.芳香苷苷元芳香苷苷元> >苷苷, , 单糖苷单糖苷> >双糖苷双糖苷> >叁糖苷叁糖苷 c.c.芳香化程度越高或共轭键越多芳香化程度越高或共轭键越多, ,吸附力越强吸附力越强; ; 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.4 聚酰胺聚酰胺 ①①吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系②②溶剂的洗脱能力溶剂的洗脱能力 水水< <含水醇含水醇< <醇醇< <丙酮丙酮<

分离黄酮类；除鞣质二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.5 大孔吸附树脂大孔吸附树脂(macro-reticular resin)①①分离原理分离原理: : 吸附吸附( (范德华力和氢键范德华力和氢键) )和和分子筛分子筛作用作用( (多多 孔性结构孔性结构) )　　②②树脂类型树脂类型: : 非极性、中等极性和极性三种非极性、中等极性和极性三种 非极性非极性：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称 芳香吸附树脂芳香吸附树脂 中等极性中等极性：含脂基的吸附树脂：含脂基的吸附树脂 极极 性性：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、 硫不同极性功能的吸附树脂硫不同极性功能的吸附树脂 二、分离与精制方法二、分离与精制方法3.5 大孔吸附树脂大孔吸附树脂 ③③洗脱剂洗脱剂: H2O 及不同比例的含水醇。

及不同比例的含水醇 洗脱分离洗脱分离: H2O 洗洗: 糖，水溶性色素糖，水溶性色素 30% EtOH: 极性大的成分极性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷类皂苷类 95% EtOH: 极性小成分极性小成分 ④④应用应用: 除多糖，水溶性色素，富集苷类成分除多糖，水溶性色素，富集苷类成分 二、分离与精制方法二、分离与精制方法4. 根据物质根据物质解离解离程度不同程度不同进行分离进行分离—离子交换法离子交换法 固定相固定相：离子交换树脂（聚苯乙烯高分子化合物，引：离子交换树脂（聚苯乙烯高分子化合物，引 入交换基团）入交换基团） 分类：分类： 阳离子交换树脂：强酸型阳离子交换树脂：强酸型 RSO3-H+ 弱酸型弱酸型 RCOO-H+ 阴离子交换树脂：强碱型阴离子交换树脂：强碱型 RN+(CH3)3Cl- 弱碱型弱碱型 RNH2, RNHR’, RNR’R” 二、分离与精制方法二、分离与精制方法4.1 4.1 交换原理交换原理: : 阴离子交换树脂：阴离子交换树脂： 阳离子交换树脂：阳离子交换树脂：4.2 4.2 应用：应用：主要用于主要用于生物碱生物碱和和有机酸有机酸的分离。

的分离 二、分离与精制方法二、分离与精制方法4. 根据物质根据物质解离程度不同解离程度不同进行分离进行分离—离子交换色谱法离子交换色谱法 透析法透析法: : 半透膜半透膜, , 分子筛滤过作用分子筛滤过作用 超速离心法超速离心法: : 溶质在超速离心作用下具有不同的溶质在超速离心作用下具有不同的 沉降性或浮游性沉降性或浮游性 凝胶滤过法凝胶滤过法: : 分子筛的作用分子筛的作用( (排阻色谱排阻色谱), ), 被分离物被分离物 质按分子质按分子由大到小由大到小的顺序流出色谱柱的顺序流出色谱柱5.5.根据物质根据物质分子大小差别分子大小差别进行分离进行分离——凝胶滤过法凝胶滤过法 二、分离与精制方法二、分离与精制方法5.1 5.1 主要的几种方法主要的几种方法5.2 5.2 凝胶种类凝胶种类①①葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶(Sephadex G): 只适于在只适于在水水中应用中应用, 分离多糖分离多糖、、 蛋白质等蛋白质等.②②羟丙基葡聚糖凝胶羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-10或或LH-20)：： 适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性外，还起到反相分配色谱的效果。

外，还起到反相分配色谱的效果 常用溶剂有常用溶剂有甲醇、氯仿甲醇、氯仿-甲醇甲醇等二、分离与精制方法二、分离与精制方法5.5.根据物质根据物质分子大小差别分子大小差别进行分离进行分离——凝胶滤过法凝胶滤过法第一节第一节 中药化学成分及生物合成简介中药化学成分及生物合成简介第二节第二节 中药有效成分的提取、分离方法中药有效成分的提取、分离方法第三节第三节 中药有效成分化学中药有效成分化学结构研究结构研究方法方法一、化合物纯度的鉴定一、化合物纯度的鉴定一、化合物纯度的鉴定一、化合物纯度的鉴定（（（（Identification of PurityIdentification of Purity）））） 1. 测熔点测熔点: 看熔程看熔程 2. 外观结晶色泽外观结晶色泽: 均一性均一性 3. 色谱法色谱法: TLC 三种组成不同的溶剂系统三种组成不同的溶剂系统, 单一斑点单一斑点; HPLC 单一峰；单一峰； GC 单一峰；单一峰； 4. 核磁法核磁法：不主张。

不主张 第第三节三节 结构研究方法结构研究方法二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定（（（（Known compounds)Known compounds) 1. 有标准品有标准品(或对照品或对照品): Co-TLC (共薄层，三种系统共薄层，三种系统) 测混合熔点测混合熔点(相同溶剂结晶相同溶剂结晶); 测测IR (考察是否重叠）考察是否重叠） 2. 无标准品无标准品: 与文献值对照与文献值对照(相同的溶剂条件下：相同的溶剂条件下：mp, IR, UV, 1H-NMR, 13C-NMR等等) 第三节第三节 结构研究方法结构研究方法三、未知化合物三、未知化合物 －多种谱学结合的结构解析－多种谱学结合的结构解析 1. 紫外光谱紫外光谱(Ultraviolet spectra，，UV) ①①为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息 用于判断结构中的共轭系统、结构骨架（如香用于判断结构中的共轭系统、结构骨架（如香豆素、黄酮）豆素、黄酮） UV谱一致，不一定是一个化合物谱一致，不一定是一个化合物。

②②应用：应用：确定确定平面的结构骨架，平面的结构骨架，立体结构的构型、立体结构的构型、构象 第三节第三节 结构研究方法结构研究方法2. 红外光谱红外光谱(Infrared spectra，，IR)提供各种官能团的信息提供各种官能团的信息如：如： 芳香环芳香环:   1600-1480cm-1，， OH:   >3000 cm-1, C=O :   1700 cm-1. IR相同者为同一化合物相同者为同一化合物 第三节第三节 结构研究方法结构研究方法3.3.质谱质谱(Mass spectra，，MS) 给出分子量给出分子量(M+)，， 给出基团或片段信息，可计给出基团或片段信息，可计算分子式算分子式; ; MS图一致图一致( (同一型号仪器，同一条件同一型号仪器，同一条件) )一般为同一般为同一化合物一化合物 第三节第三节 结构研究方法结构研究方法4. 核磁共振谱核磁共振谱 （（Nuclear magnetic resonance，， NMR））氢谱（氢谱（1H-NMR）） 化学位移化学位移: : H的化学环境的化学环境 偶合常数偶合常数: : 判断判断H与与H的关系的关系 积分面积积分面积: : 确定确定H的数目的数目碳谱（碳谱（13C-NMR）） 化学位移：化学位移：C处的化学环境处的化学环境 第三节第三节 结构研究方法结构研究方法The End 。