葡萄糖淀粉酶.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,*,,*,,,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,*,,*,葡萄糖淀粉酶,,淀粉酶,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,葡萄糖淀粉酶——GA,,,,,,,,,,催化域,连接域,结合域,基本结构,三个功能区,,,O-Glycosylated Linker,,基本结构,黑曲霉糖化酶,,,,,GA Ⅱ,GA Ⅰ,催化域CD,,O-糖基化域,,淀粉结合域SBD,限制性水解,不含淀粉结合域SBD，少数甚至不含O-糖基化域,,催化域CD结构,含13股α-螺旋，折叠成桶状（α/α）,6,结构，桶的核心为一个口袋状，催化中心位于其中,,催化机制,酸碱催化,,,,,连接域结构,起连接CD和SBD的作用，一般被O-糖基化修饰,,不同真菌来源的糖化酶该区域的氨基酸序列可变性较大,,在生物活性条件下，甘露糖比半乳糖更容易以O-方式连接到连接域的Ser和Thr残基上,,连接域结构与功能的关系,,,GAGpI:,增加了一段重复的,O-,糖基化连接域,2个重组,,蛋白酶,GAΔ470-493：缺少O-糖基化连接域中Ala,470,-Thr,493,氨基酸序列,结果：GAGpI的热稳定性及PH稳定性都有所提高，这主要是由于它含有额外的O-糖基化连接域，增加了糖基化位点，因此碳水化合物的含量也增加,,淀粉结合域结构,具有八条β折叠股，形成两个主要的β片层：第一个包括五个反平行的β链，第二个包括一个平行和一对反平行的链,,淀粉结合域功能,使得不溶性底物与溶液中的酶相互作用,使底物结合到催化区域的活性位点上,破坏淀粉颗粒的表面，提高淀粉水解率,,水解过程,先为吸附，然后形成一种复合体，破坏维系淀粉分子螺旋结构的氢键，然后不断水解淀粉的糖苷键，水解使得淀粉颗粒的表面形成一系列的空穴，最后达到破坏淀粉结构的效果。

水解速率,,实际应用中存在的问题及拟解决途径,水解α-1,6糖苷键,,的性能差,热稳定性不够,PH稳定性低,,,1,.定点突变某,,些氨基酸,,,酶稳定性高的,,菌株,定点突变,,Thank you,,汇报结束,谢谢大家,!,请各位批评指正,。