Thermo U-3000 液相色谱 操作规程.doc

Thermo U-3000 液相色谱操作规程一、 仪器操作1. 准备工作1) 检查管道氮气、流动相流路与压力是否正常如不合适请调整气路、气源与流动相流路2) 检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常温度保持在21-25 oC，；湿度保持在70%以下如不合适请联系相关维修人员3) 确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积50%；有机流动相使用HPLC级与HPLC级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用HPLC级与HPLC级以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一周4) 流动相中仅能加入5 mM浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵等5) 所有新配置的流动相均充分混匀后在超声10分钟，排除气泡2. 开机过程：1) 打开电脑进入windows的桌面2) 打开液相各个模块的电源（没有顺序）3) 打开氮气管道开关阀，确证压力指示在0.3 Mpa4) 打开变色龙服务器软件，点击连接数据传输5) 打开变色龙色谱工作站6) 在Create Program窗口中编辑液相方法并保存7) 打开液相色谱流路，平衡液相系统8) 点击进样按钮开始进样3. 待机过程：1) 待机前，将色谱流动相流路切换至90%乙腈水溶液，以0.3 mL/min流速冲洗色谱柱20分钟。

2) 在5分钟内将色谱流速从1 mL/min 缓慢降至0 mL/min3) 关闭柱温箱加热功能，关闭CAD检测器氮气气路4. 长假关机过程：1) 关闭液相色谱各模块的加热功能2) 关闭流动相流速3) 关闭所有软件和电脑4) 关闭液相所有模块的电源5) 关闭氮气减压阀6) 关机结束二、 仪器维护1. 做完实验：使用纯水、纯乙腈冲洗色谱管路；2. 关闭紫外检测器，关闭柱温箱的加热功能3. 废气与废液排放空间通畅；三、 液相可能存在的问题与排查方法1. 可能存在的问题1) 灵敏度突然间降低2) 空白溶液背景很高2. 排查方法1) 检查流动相是否新鲜配置2) 检查各个温度，气体流速，流动相流路3) 检查进样系统是否正常工作4) 检查紫外检测器是否工作正常5) 检查色谱柱是否堵塞，是否漏液。