精编制作三维细胞培养技术培训PPT课件
31页1、主讲人 赛哲生物 曾宏彬 水凝胶三维细胞培养 广州赛哲生物科技有限公司 服务热线 400 888 4242 什么是三维细胞培养 如何实现三维细胞培养 水凝胶三维细胞培养 更多问题 2 341 广州赛哲生物科技有限公司 服务热线 400 888 4242 什么是三维细胞培养 建立体外三维培养模型将有助于跨越二维细胞培养与动物实验之 间的鸿沟 通过模仿体内环境的特性 并利用传统的细胞培养研究工 具 三维细胞模型提供了独特的视角来观察干细胞的行为 组织器官 和肿瘤的发展过程 这些研究模型有利于加速癌症生物学和组织工程 领域的转化研究 Kenneth M Yamada and Edna Cukierman Modeling Tissue Morphogenesis and Cancer in 3D J cell 130 601 610 1 1 什么是三维细胞培养 3D2D VS 2 如何实现三维细胞培养 水凝胶固体支架磁力悬浮 2 如何实现三维细胞培养 固体支架三维培养 组织工程支架作为组织工程的平台 不仅提供了细胞生长的框架 使之形成特 定的组织或器官形状 而且作为细胞外基质成分之一 是细胞
2、间信号传导和相互作 用的媒介 同时也是细胞生长所必需的生物活性剂 目前用于组织工程支架的人工合成可降解聚合物主要包括脂肪族聚酯 聚偶磷 氮 聚酸酐等 其中研究最多的是脂肪族聚酯 特别是聚乳酸 PLA 聚乙醇酸 PGA 及其共聚物等 2 如何实现三维细胞培养 磁力悬浮三维培养 美国莱斯大学和德克萨斯大学M D Anderson 癌症中心的研究人员开发出一种生物装配器 bioassembler 这个系统使用磁力让细胞悬浮 并促使细胞生长成三维的形状 尤其适于培养肝脏 和心脏这种细胞密度比较大的实体器官 文章发表在2013年3月14日的 Nature Nanotechnology 上 2 如何实现三维细胞培养 将细胞培植在一定的细胞外基质中 细胞外基质 extracellularmatrix ECM 蛋白充当生长支架 水凝胶三维培养 3 水凝胶三维细胞培养 Matrigel Collagen I Agarose 3 水凝胶三维细胞培养 从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基 底膜基质 其主要成分由层粘连蛋白 型胶原 巢蛋白 硫酸肝 素糖蛋白等组成 还包含生长因子
3、和基质金属蛋白酶等 Matrigel 在室温条件下 聚合形成具有生物学活性的三维基质 模拟体内细胞基底膜的结 构 组成 物理特性和功能 有利于体外细胞的培养和分化 以及对细胞形态 生化 功能 迁移 侵染和基因表达的研究 可促进上皮细胞 肝细胞 Sertoli细胞 黑色素瘤细胞 血管内皮细胞 甲状腺 细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化 同时 Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达 支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化 高浓度的Matrigel适用于研究体 内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等 3 水凝胶三维细胞培养 I型胶原在大部分组织中都有分布 尤其在骨组织 肌腱以及 真皮组织中含量极其丰富 I型胶原一般是分离自大鼠尾中 也常 被称为鼠尾胶 Agarose 在酸性条件下成液态 一般保存于醋酸溶液中 使用时 需用PBS稀释成合适的 浓度 大于1 mg ml 并用氢氧化钠调节PH值至7 2 7 4 可聚合形成具有生物学活 性的三维基质 一般用于软骨细胞 骨细胞的三维培养 血管形成试验等 3 水凝胶三维细胞培养 美国布朗大学的生物工程师 Jeffrey Morgan 利用琼脂糖
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