分光光度法测食品中的亚硝酸盐
5页1、第二法 分光光度法8 原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定,硝酸盐采用镉柱还原法测定。试样经沉淀蛋白质、 除去脂肪后, 在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后, 再与盐 酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料, 外标法测得亚硝酸盐含量。 采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝 酸盐,测得亚硝酸盐总量,由此总量减去亚硝酸盐含量,即得试样中硝酸盐含量。9 试剂和材料除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯。水为 GB/T 6682 规定的二级水或去离子水。9.1 亚铁氰化钾(K4Fe(CN)6 3H2O)。9.2 乙酸锌(Zn (CH3COO)2 2H2O)。9.3 冰醋酸( CH3COOH)。9.4 硼酸钠(Na2B4O7 1OH2O)。9.5 盐酸(p= 1.19 g/mL )。9.6 氨水( 25 %)。9.7 对氨基苯磺酸 (C6H7NO3S)。9.8 盐酸萘乙二胺(C12H14N22HCI)。9.9 亚硝酸钠( NaNO2)。9.10 硝酸钠( NaNO3) 。9.11 锌皮或锌棒。9.12 硫酸镉。9.13亚铁氰化钾溶液(106 g/L):称取106.0 g亚铁氰化钾(9.1),用水溶解,并稀释至1
2、000mL 。9.14 乙酸锌溶液 (220 g/L): 称取220.0 g 乙酸锌( 9.2),先加30 mL 冰醋酸( 9.3)溶解, 用水稀释至 1000 mL。9.15 饱和硼砂溶液 (50 g/L): 称取5.0 g 硼酸钠(9.4),溶于100 mL 热水中, 冷却后备用。9.16 氨缓冲溶液(pH 9.69.7):量取30 mL盐酸(9.5),力口 100 mL水,混匀后加65 mL氨水(9.6),再加水稀释至1000 mL,混匀。调节pH至9.69.7。9.17氨缓冲液的稀释液:量取 50 mL氨缓冲溶液(9.16),加水稀释至500 mL,混匀。9.18 盐酸(0.1 moI/L) : 量取5 mL 盐酸,用水稀释至 600 mL。9.19对氨基苯磺酸溶液 (4 g/L):称取0.4 g对氨基苯磺酸 (9.7),溶于100 mL 20 % (V/V ) 盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存。9.20盐酸萘乙二胺溶液(2 g/L ):称取0.2 g盐酸萘乙二胺(9.8),溶于100 mL水中,混 匀后,置棕色瓶中,避光保存。9.21亚硝酸钠标准溶液(200卩g /mL :准
3、确称取0.1000 g于110 C120 C干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解移入 500 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。9.22亚硝酸钠标准使用液(5.0卩g/m):临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.00 mL ,置于200 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度。9.23硝酸钠标准溶液(200卩g/mL以亚硝酸钠计):准确称取 0.1232 g于110 C120 C 干燥恒重的硝酸钠,加水溶解,移于入 500 mL 容量瓶中,并稀释至刻度。9.24硝酸钠标准使用液(5卩g/mL :临用时吸取硝酸钠标准溶液2.50 mL ,置于100 mL容量瓶中,加水稀释至刻度。10 仪器和设备10.1 天平:感量为 0.1 mg 和 1 mg。10.2 组织捣碎机。10.3超声波清洗器。10.4恒温干燥箱。10.5分光光度计。10.6镉柱10.6.1海绵状镉的制备:投入足够的锌皮或锌棒于500 mL硫酸镉溶液(200 g/L)中,经过3h4 h,当其中的镉全部被锌置换后,用玻璃棒轻轻刮下,取出残余锌棒,使镉沉底,倾去 上层清液,以水用倾泻法多次洗涤,然后移入组织捣碎机中,加500 mL水,捣碎约2 s,
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