组化试验相关试剂
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1、组化实验相关试剂振动切片封闭液 (PNBS):10ml PNBS:终浓度：储液：10%NS( 二抗种属正常动物血清 )NS1ml2%BSA10%BSA2ml5%蔗糖20% 蔗糖2.5ml+PBS PH7.4to10mlMEMFA ：（10ml ）终浓度：储液：0.1M MOPS1M MOPS1ml0.1mM EGTA10mM EGTA2ml1mM MgSO41M MgSO410l3.7%PFA10%PFA3.7ml+d2 H2Oto10mlAP-CDS ： (100ml)终浓度：储液：100mM Tris-Cl PH9.51MTris-Cl PH9.510ml50mM MgCl1M MgCl5ml100mM NaCl5M NaCl2ml0.1% Tween-20Tween-20100l5mM levamisole1M levamisole500l+d2 H2Oto100mlHRP-CDS: (1ml)(1)6.6l H 2 O2 in 100 l 0.1M TB PH 7.5(2)20l DAB （ 0.05g/ml in d 2H2O） +5l(1) 液 +0.1M TB PH 7.
2、5to 1ml10% 多聚甲醛配制方法：(100ml)称取 10 克多聚甲醛 (SIGMA P6148) 粉末，置于 250ml 锥形瓶中， 加入 80ml 1xPBS ，再加入 5-6 滴（ 1ml 吸头） 10N NaOH,于 65 C 水浴中溶解3-4 小时，完全溶解后冷却至室温，调整 PH 值至 7.4, 溶液定容至100ml， 过滤后分装成每管4ml 或 8ml, 保存于 -20 C。使用前将贮液置于80 C 水浴中溶解， 1xPBS 稀释至 4%，即可使用。 (配好后 4 C 密闭保存， 24小时内使用。 )或直接配制4%PFA, 方法同上（可不加NaOH 促溶，则不用调PH），配好后 4 C 密闭贮存， 24 小时内使用。0.5% 明胶处理载玻片方法：800ml 处理液：1. 溶解 4g 明胶和 4g 硫酸铬钾于 800ml d 2H2 O 中， 65 C 加热 30min 左右，使其溶解（不要使溶液沸腾）2.过滤溶液，并将溶液在室温下放置至50 C 左右。3. 将玻片在溶液中浸提 3-4 次。4. 将处理的玻片在室温下过夜使其蒸发干，为防止灰尘，用保鲜膜覆盖。5. 130 C 烤干 3 小时以上。6. 干燥保存。处理液使用后，可加入0.05%NaN 3，4 C 保存。下次使用时将溶液加热至50 C 即可。蛋白胶配制方法：取新鲜鸡蛋清充分搅拌，4 C 过滤，清液加入等体积无荧光甘油，再加入0.05%NaN 3充分混合，分装成每管1ml ，-20 C 保存。荧光封片剂（Mowiol ）配制方法：（约24ml）将 2.4g mowiol、6g 甘油和6ml去离子水放入50ml离心管中，室温2 小时，直至mowiol完全长大变透明。加12ml0.2M Tris buffer（ pH 8.5 ），50 C（过夜），直到mowiol完全溶解。 4000-5000 rpm离心20 minutes。分装成每管1ml ， -20C 保存。
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