基因扩增实验室常用仪器设备的使用和维护 卫健委临床检验中心

基因扩增实验室常用仪器设基因扩增实验室常用仪器设备的使用和维护备的使用和维护卫生部临床检验中心 王露楠常用仪器设备t试剂准备区t加样器加样器t洁净工作台洁净工作台t标本制备区t高速高速(冷冻冷冻)离心机离心机t漩涡振荡混旋器漩涡振荡混旋器t恒温水浴箱（金属浴）恒温水浴箱（金属浴）t加样器加样器t扩增区（产物检测区）tPCR热循环仪（热循环仪（DNA扩增仪）扩增仪）加样器放置地点：试剂准备 标本制备 （扩增和产物检测）标识：所在区域 校准状态加样器-类型t t单道连续可调式移液器单道连续可调式移液器t t多通道连续可调式移液器多通道连续可调式移液器t t单道连续移液器单道连续移液器t t单道移液管配合使用的移液器单道移液管配合使用的移液器加样器加样器-型号和取液范围型号和取液范围t t型号型号所用量程范围（所用量程范围（L）t t GILSON eppendorft tP10 0.5-10 0.5-10 t tP20 2-20 2-20t tP100 20-100 10-100t tP200 20-200 20-200t tP1000 200-1000 100-1000加样器加样器-使用使用加样器加样器-使用使用t前进式t倒退式加样器加样器-使用使用t放出液体完全打出，吸头尖靠内壁，排出最后的液滴完全打出，吸头尖靠内壁，排出最后的液滴按钮待液体完全打出后再放松按钮待液体完全打出后再放松血清和粘性液体的吸液和放液速度都血清和粘性液体的吸液和放液速度都要保持缓慢要保持缓慢移取易挥发液体可以先在液体里反复移取易挥发液体可以先在液体里反复吹打吹打3-5次次,使液面和活塞之间的空气使液面和活塞之间的空气柱充满饱和的液体分子柱充满饱和的液体分子,再进行移取再进行移取!加样器加样器-使用使用t把按钮压至第一停点垂直握持把按钮压至第一停点垂直握持 加样器，使吸嘴浸入液样中，加样器，使吸嘴浸入液样中，浸入液体深度视型号而定：浸入液体深度视型号而定：tP2和和P10 1mmtP20和和P100 2-3mmtP200和和P1000 2-4mmtP5000 3-6mmtP10ML 5-7mm加样器加样器-使用使用调节刻度至合适的体积调节刻度至合适的体积从大量程调节至小量从大量程调节至小量程，精度最佳程，精度最佳从小量程调节至大量从小量程调节至大量程，最好先调至略大程，最好先调至略大一点，再返回一点，再返回大体积至小体积大体积至小体积小体积至大体积小体积至大体积旋转刻度调节旋转刻度调节旋钮，可精确到第四位数字旋钮，可精确到第四位数字严格的精确调节方法严格的精确调节方法加样器加样器-使用使用加样器-技术指标型号型号容量容量 准确度（标准误差）准确度（标准误差）精度（重复性）精度（重复性）2 (L)绝对误差绝对误差(L)相对误差相对误差(%)标准误差标准误差(L）相对离差相对离差(%)P2 最小最小 0.2 0.024 12 0.012 6 0.5 0.025 5 0.012 2.50 最大最大 2 0.030 1.5 0.014 0.70P10 最小最小 1 0.025 2.5 0.012 1.25 5 0.075 1.5 0.030 0.60 最大最大 10 0.10 1 0.040 0.40P20 最小最小 2 0.1 5.0 0.03 1.50 5 0.1 2.0 0.04 0.80 10 0.1 1.0 0.05 0.50 最大最大 20 0.2 1.0 0.06 0.30P100 最小最小 20 0.35 1.8 0.10 0.5 50 0.4 0.8 0.12 0.24 最大最大 100 0.8 0.8 0.15 0.15 加样器-技术指标型号型号 容量容量(L)不准确度不准确度(%)不精密度不精密度(%)P10 最小最小 0.5 5.0 2.8 1 2.5 1.8 最大最大 10 1.0 0.4P20 最小最小 2 5.0 1.5 最大最大 20 1.0 0.3P100 最小最小 10 3.0 1.0 最大最大 100 0.8 0.2 P200 最小最小 20 2.5 0.7 最大最大 200 0.6 0.2P1000 最小最小 100 3.0 0.6 最大最大 1000 0.6 0.2 加样器加样器-校准校准t校准方式校准方式 计量局 厂家 自校t时间时间 视使用频率定(6个月-1年）加样器加样器-校准校准型号型号P1000出厂编号出厂编号L26069L发证日期发证日期2002-7-4本移液器已按照国际本移液器已按照国际ISOISO标准，以吉尔森原厂零配件进行维修及校准，标准，以吉尔森原厂零配件进行维修及校准，达到吉尔森产品说明书规定的性能指标，并自发证日起免费担保六个月达到吉尔森产品说明书规定的性能指标，并自发证日起免费担保六个月 （易损零配件不包括在内）。（易损零配件不包括在内）。测定次数测定次数 4 4 次次低点校准低点校准 设定值设定值 200 200 ul ul 平均容积平均容积 198.6198.6 ulul 绝对误差绝对误差 -1.4-1.4 Ul Ul 相对误差相对误差 -0.7-0.7%标准离差标准离差 0.1010.101 ul ul 相对离差相对离差 0.2020.202%高点校准高点校准 设定值设定值 1000 1000 ul ul 平均容积平均容积 999.37999.37 ulul 绝对误差绝对误差 -0.63-0.63 Ul Ul 相对误差相对误差 -0.063-0.063%标准离差标准离差 0.7830.783 ul ul 相对离差相对离差 0.0780.078%更换部件更换部件 O O型密封圈型密封圈测试环境测试环境:温度温度 2525 C C 湿度湿度 3838%测试液体：测试液体：蒸馏水蒸馏水测试用吸嘴：测试用吸嘴：吉尔森吉尔森DiamondDiamond标准盒装吸嘴标准盒装吸嘴加样器-使用注意事项t根据所需取液量选择根据所需取液量选择 相应的移液器及吸头，相应的移液器及吸头，基因扩增实验要求使基因扩增实验要求使 用带用带滤芯滤芯的吸头，防的吸头，防 止交叉污染。止交叉污染。t吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液器头吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液器头上；打出液体后拇指应缓慢松开按钮，避免液体回吸。上；打出液体后拇指应缓慢松开按钮，避免液体回吸。t在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意计在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。数器显示的数值不要超过其可调范围。t连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有液体连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有液体时不可平放或倒置。时不可平放或倒置。加样不准确的原因加样不准确的原因t用大量程的移液器移取小体积的液体用大量程的移液器移取小体积的液体t装配吸头时气密性不好，吸头不匹配装配吸头时气密性不好，吸头不匹配t吸取的液体具有强挥发性吸取的液体具有强挥发性t液体的密度与水有明显差异液体的密度与水有明显差异t吸液速度和放液速度太快吸液速度和放液速度太快加样器-使用注意事项t操作时要慢和稳，吸嘴浸入液体操作时要慢和稳，吸嘴浸入液体 深度深度要合适，吸液过程要合适，吸液过程深度深度尽量尽量 保持不变；保持不变；t改吸不同液体、样品或试剂前改吸不同液体、样品或试剂前更换更换新吸嘴新吸嘴t发发现现吸吸嘴嘴内内有有残残液液时时必必须须更更换换；新新吸吸嘴嘴使使用用前应先前应先质检质检。t为为防防止止液液体体进进入入移移液液器器套套筒筒内内，注注意意以以下下几几点点：压压放放按按钮钮时时保保持持平平稳稳；移移液液器器不不得得倒倒转转；吸嘴中有液体时不可将移液器平放；吸嘴中有液体时不可将移液器平放；t使使用用了了酸酸或或有有腐腐蚀蚀蒸蒸气气的的溶溶液液后后，最最好好拆拆下下套筒，用蒸馏水套筒，用蒸馏水清洗清洗活塞及密封圈。活塞及密封圈。加样器-使用注意事项t连续可调式移液器在取样加样过连续可调式移液器在取样加样过 程中应注意移液嘴不能触及其他程中应注意移液嘴不能触及其他 物品，以免被污染；物品，以免被污染；t移移液液嘴嘴盒盒（架架子子）、废废液液瓶瓶、所所取取试试剂剂及及加加样样的的样样品品管应摆放合理，以方便操作过程、管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染避免污染为原则。为原则。t连连续续可可调调式式移移液液器器在在使使用用完完毕毕后后应应置置于于以以液液器器架架上上，远离潮湿及腐蚀性物质。远离潮湿及腐蚀性物质。t在在取取液液之之前前，所所取取液液体体应应在在室室温温（15-25 C）平平衡衡；液液体体温温度度与与室室温温有有异异时时，将将吸吸嘴嘴预预洗洗多多次次再再用用；移移液液温度不得超过温度不得超过70。t不可把容量计数调超其适用范围。不可把容量计数调超其适用范围。加样器-清洁维护t清洁频率：清洁频率：日维护日维护 月（季）维护月（季）维护 严重污染时严重污染时t方法方法1一一般般维维护护可可用用中中性性洗洗涤涤剂剂（如如洗洗餐餐具具用用的的洗洗涤涤灵灵）清清洁洁，或或者者用用60%的的异异丙丙醇醇。然然后后用用蒸蒸馏馏水水反反复复洗洗涤涤，去去除除洗洗涤涤剂剂或或异异丙丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。2如如果果有有液液体体进进入入加加样样器器内内的的严严重重污污染染，可可以以将将加加样样器器拆拆开开后后进进行行清清洁洁，具具体体拆拆开开步步骤骤参参照照加加样样器器说说明明书书（不不同同的的加加样样器器的的拆拆开方式有所不同）。开方式有所不同）。3高高压压消消毒毒，有有的的加加样样器器的的吸吸管管部部分分可可高高压压消消毒毒（121及及1巴巴压压力力下下消消毒毒20分分钟钟），如如Eppendor的的Research单单道道可可调调加加样样器器。但消毒时不可超温超时，也不能挤压放置，以免造成变型。但消毒时不可超温超时，也不能挤压放置，以免造成变型。4各各区区（试试剂剂准准备备、样样本本提提取取、扩扩增增和和产产物物检检测测）的的加加样样器器应应有有各自的标识，清洁和消毒各自的标识，清洁和消毒 时，时，应分别处理。应分别处理。加样器-清洁维护具体清洁步骤具体清洁步骤t移液器外壳的清洁，可使用肥皂液、洗洁精移液器外壳的清洁，可使用肥皂液、洗洁精或或60异丙醇来擦洗异丙醇来擦洗t移液器内部的清洗，需要先将移液器下半部移液器内部的清洗，需要先将移液器下半部分拆卸开分拆卸开t再用上述溶液清洗再用上述溶液清洗拆卸下来的部件拆卸下来的部件清洗过后清洗过后的部件须用双蒸水进行淋洗晾干或者用纸将的部件须用双蒸水进行淋洗晾干或者用纸将移液器各部件擦干移液器各部件擦干t将移液器重新组装将移液器重新组装 加样器-清洁维护高速（冷冻）离心机t电机t转速 最低转速、最高转速、t转头t消毒方式t标准配件系统 t噪音离心机-使用方法t t离心机放置：离心机放置：离心机放置：离心机放置：水平坚固的地板或平台上，以免离心时造成机器震动水平坚固的地板或平台上，以免离心时造成机器震动水平坚固的地板或平台上，以免离心时造成机器震动水平坚固的地板或平台上，以免离心时造成机器震动t t打打打打开开开开电电电电源源源源开开开开关关关关，按按按按要要要要求求求求装装装装上上上上所所所所需需需需的的的的转转转转头头头头，将将将将预预预预先先先先平平平平衡衡衡衡好好好好的的的的样样样样品品品品放放放放置置置置于于于于转转转转头头头头样样样样品品品品架架架架上上上上（离离离离心心心心筒筒筒筒须须须须与与与与样样样样品品品品同同同同时时时时平衡），关闭机盖。平衡），关闭机盖。平衡），关闭机盖。平衡），关闭机盖。t t按按按按功功功功能能能能选选选选择择择择键键键键，设设设设置置置置各各各各项项项项要要要要求求求求：温温温温度度度度、速速速速度度度度、时时时时间间间间、加加加加速速速速度度度度及及及及减减减减速速速速度度度度，带带带带电电电电脑脑脑脑控控控控制制制制的的的的机机机机器器器器还还还还