体外诊断试剂注册检测中的溯源性要求-北京市医疗器械检验所

体外诊断试剂注册检测中的溯源性要求北京市医疗器械检验所体外诊断检验室2016年4月5日序言：题目注册检测中的要求，而不是指检测机构的要求，和大家分享的主要是围绕这些要求我们该如何实施，实现真正意义上的量值可溯源，我们知道注册检测是对产品性能特征的复核性验证试验，而检测中并未进行溯源性验证方面的试验，事实上是完全建立量值可溯源的基础之上，也就是说，注册检测最重要也是最主要的隐含条件是测量结果的溯源性已建立。注册检测中的溯源要求和国家/国际上相关标准文件的要求是一致的，没有特殊的。谈到溯源，大家第一个想到的就是ISO标准，想必GB/T 21415(ISO 17511)的内容培训大家都接受了很多，在这里就不逐条对该标准说明，汇报的内容主要是参照以下文件，结合一些实例谈谈我们围绕诸多的要求如何来实现量值溯源：1.CNAS关于测量结果的量值溯源要求；2.GB/T 21415要求的框架；3.ISO 17511国际标准修订进展情况；4.其他文件ISO 18113、GUIDE30、GUIDE35、JCTLM。目录123溯源的意义溯源的定义溯源的要求意 义溯源溯源是IVD最基本的要求没有溯源的IVD测量系统会存在哪些问题?1.量值准确度无法表达（不确定度）2.测量结果之间不具有可比性3.导致错误的诊断和治疗4.产品质量控制的缺乏溯源的意义测量结果的溯源性辅助诊断可靠性结果可比量值传递准确度空间时间有效性为什么要溯源-举例TG项目举例：以各自校准物校准后测量同一份正常血清检验医学的目标临床样本测量结果具有计量可比性定 义溯源术语和定义溯源性的说明1.参照对象；2.校准等级序列；3.时间顺序（技术更新）；4.多输入量情况；5.不能保证不发生错误；6.隐形校准情况；7.规范表述：计量溯源性溯源相关术语参考物质校准物质不确定度和互换性有证参考物质质量控制物质测量标准参照对象关系H&SH&SC&U质量控制物质校准物质IQC&EQA参考物质测量标准CAL有证参考物质CAL、ME测量标准C&U参考物质参照对象溯源就是校准物x的量值通过校准向测量结果y传递的过程溯源就是使用同一源进行校准系统的测量结果，要在最大程度上保证所得到的测量结果之间具有可比性溯源通过校准将计量学高一级的物质/程序的真实度传递给下一级的物质/程序溯源基本要求GB/T 21415-2008溯源性YY/T 0638-2008溯源性-酶学CNAS-CL06:2014要求1234CNAS-GL18:2008实施指南GB/T 15000.3-2008统计原则GB/T 219192008参考实验室567 GB/T 197022005参考测量程序GB/T 197032005参考物质8JJF 1059.12012不确定度9溯源的总体要求测量结果的可靠程度计量学有效1.通过校准实现赋值不确定度2.估计结果分散性2013年ILAC-P10：作为有效的计量溯源性证明的证书中应包含溯源性和测量不确定度信息溯源测量结果量值1.处于不同校准等级的校准物、正确度控制物质的量值溯源2.只要求到产品校准物等级（ISO17511：2003已经把样本结果列入溯源链，样本测量终端用户实施，没有明确提及溯源性）1.处于不同校准等级的校准物、正确度控制物质、样本测量结果的溯源（修订中）2.试剂“标准化”，试剂与校准物的关系3.测量终端用户进行，但测量结果的溯源主体是生产者适用范围1.定量测量（Ratio&interval scales）2.定性测量（以定量结果为基础）定义首先通过文件规定的不间断的校准链：各级校准文件定义测量结果与参照对象联系起来的特性：量值的传递，从上到下在文件中要有量值，也就是赋值文件对于一个产品而言，性能验证是建立在量值准确可靠（也就是具有溯源性）的前提下，当然，“具有溯源性”这词包含的情况较多定义每一校准等级对不确定度的贡献要考虑：不确定度的评定文件，每一校准等级又包括两个方面的来源（校准物质、校准过程）除了校准贡献外，同时还应有校准物特性和方法特性方面的贡献：主要有均匀性、稳定性。技术方面建立溯源性的过程就是赋值的全过程（各校准等级）测量：方法学考察统计处理：合理、有效的统计方法（赋值和性能评价中数据的取舍）不确定度评估：科学、有效、合理结果报告：表述正确、严谨ISO 17511计量溯源性的描述：简洁而不简单校准等级：各等级校准方案，应包括物质、方法、影响因素的研究、每个阶段赋值不确定度的评估、所用统计技术的描述溯源、量值传递：参照-测量结果/赋值结果规范的表述1.当测量项目参照对象（测量标准）具有较高级别（非产品级）的计量学水平时（源头表述）：试剂盒测量结果或校准物赋值溯源至XXX国家参考物质（试剂盒标准化或校准物赋值时，使用XXX国家标准物质作为校准物，进行校准传递，保证测量结果或校准物赋值的溯源性）规范的表述2.当测量项目参照对象（单位定义、程序）具有较高级别的计量学水平时：试剂盒测量结果或校准物赋值溯源至SI单位或XXX参考测量程序（参考测量程序的有效性、地位）规范的表述3.1测量项目的参照对象（测量标准、程序）没有明确的计量等级时：工作校准物赋值时使用纯物质工作校准物赋值时使用血清使用替代物质（声称溯源至制造商的工作校准品）规范的表述3.2测量项目的参照对象（测量标准、程序）没有明确的计量等级时：EIA、ID-MS等定值方法：不应声称溯源至EIA、ID-MS等方法（声称溯源至制造商的工作校准品）规范的表述3.3测量项目的参照对象（测量标准、程序）没有明确的计量等级时：比对方式：属于内部程序（工作校准品）；如果没有通过比对确定校准物量值和或不确定度，只是简单的比对，原则上不属于溯源。溯源性保证校准（与量值直接关联）举例：量值传递应讲究有效，外推应合理（线性，外推可以，非线性，外推风险较大）什么是有效：IU/ML=NG/ML AFP在AFP 1st RP(IS)104 IU，在溯源时应考虑其实际含量（纯度、水分等）、分子量（预期用途、细胞培养和肿瘤来源的是否有区别）等 信息后可以进行这两个单位的换算尽量缩短溯源中的校准等级溯源性保证产品级（溯源链中最低级别）校准物的使用：1.不符合量值溯源要求，没有任何机构赋予校准物该功能；2.使用者实验室（制造商）无法进行质量控制；3.校准物说明书给出的只是标示值（同有证参考物质区分），产品级别的校准物不是测量标准（计量上更高级别）；4.在其说明书上明确了预期校准的系统（两个方面的问题不清楚，系统由仪器和试剂组成，仪器是明确的，试剂信息在其说明书中并未明确。这其中存在两种情况：1.XXX系统，指XXX仪器及其声称配套的试剂所赋的值；2.XXX仪器、校准物制造商自己的试剂，第二种情况比较常见溯源性保证产品级（溯源链中最低级别）校准物的使用：对于测量而言，仪器大部分只是提供测量信号输出（相对、比较），其量值传递的关键在于试剂本身,加上产品校准物的量值亦真亦假，因此使用最低级别的校准物进行的量值传递无法保证量值可靠性；同时应考虑校准物的互换性（不同厂家试剂的反应性可能尽不相同）从量值溯源的角度看：如果试剂盒使用的是标准化的方法（参考方法），那么每个厂家的结果在线性范围内是可比的。但事实上，每个厂家试剂成分、原料来源、稳定性、配制方法、以及样本试剂体积比等方面各有差异，在同样的线性范围下、使用该校准物校准后测量结果之间还是否可比。对溯源的要求不确定度溯源图参照选择赋 值溯源基质效应及互换性研究ML选择的测量程序ML常设的测量程序实 施溯源参考测量系统实现溯源的途径参考测量方法标准化（参考系统）参考物质参考实验室一致化我国参考测量体系的建立情况ICP-MS、ID-MS、分光光度法参考测量程序酶学、血脂、代谢物和小分子、无机离子、血细胞参考物质参考测量实验室国际上的RMP国际上的CRM溯源链定义一级参考测量程序二级参考测量程序一级参考物质二级参考物质工作校准物产品校准物制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序样本结果溯源标准修订进展情况等级组成：基本与原版保持一致溯源图：类别的重新划分（JCTLM2008年会议）系统（校准物+试剂）：测量结果的溯源性定义一级参考测量程序一级参考物质一级/适用的RM&RMP：绝大多数情况下指纯品定义一级参考测量程序二级参考测量程序一级参考物质二级参考物质二级/较高级RM&RMP：考虑互换性，参考物质或血清盘定义一级参考测量程序二级参考测量程序一级参考物质二级参考物质RM：符合ISO 15194RMP：符合ISO 15193定义一级参考测量程序二级参考测量程序用户的常规测量程序一级参考物质二级参考物质有效的系统（校准物和试剂）老版 修订SI1一级参考测量程序一级参考物质二级参考测量程序二级参考物质制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI老版一级参考测量程序一级参考物质二级参考物质2二级参考测量程序制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果修订SI一级参考测量程序一级参考物质2二级参考测量程序二级参考物质制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI老版一级参考测量程序一级参考物质二级参考物质3二级参考测量程序制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI修订一级参考测量程序一级参考物质二级参考测量程序WHO3二级参考物质CAL制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI老版一级参考测量程序一级参考物质二级参考物质二级参考测量程序4制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI修订一级参考测量程序一级参考物质二级参考物质4二级参考测量程序（H）制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果非SI老版一级参考测量程序一级参考物质二级参考测量程序二级参考物质工作校准物产品校准物5制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序样本结果非SI修订一级参考测量程序二级参考测量程序一级参考物质5 二级参考物质（pools or panels）制造商选择的测量程序制造商常设的测量程序用户的常规测量程序工作校准物产品校准物样本结果溯源校准确认计量学溯源校准应具备以下条件：1.测量的量2.程序结果之间的关系3.校准物互换性不满足时，不能保证常规样本结果向参考测量程序的溯源溯源校准确认计量学溯源校准确认：1.工作校准物的互换性评估2.产品校准品考虑互换性（实际样本）3.斜率与截距4.产品校准品定值（使用人源样本组）建立溯源性时的考虑总体考虑测量结果/赋值结果量值通过参照对象进行量值传递测量程序存在多个输入量，每个输入量均应分别溯源关键影响因素应进行相关验证/确认法定计量范围内的设备的计量，其他内部确认数据处理的科学性考虑校准物互换性科学合理评定不确定度报告的规范性校准链被测量定义的不足（血清、血浆、尿液）技术局限性（物质的量）分析物的异质性（亚型、衍生物）描述困难（酶、抗体、糖蛋白）特异性与选择性不同（胆红素）分析物复杂性（总蛋白）样本特殊处理（修饰）对象：所有输入量例如，测量模型：对象：关键影响量例如，试剂纯度、称量、温度（测量、试剂、样本）、pH、时间、波长互换性与可互换物质30年前，酶互换性与基质效应：数学关系一致性可修正(CRM)互换性：考虑其互换性，不是必须具有互换性互换性举例-工作校准物互换性举例-产品校准物赋值及不确定度赋值1.赋值方法的选择2.统计技术的选择（M&M）3.可接受标准的制定4.赋值方式的选择校准值修正系统偏移不确定度1.识别影响因素：可能影响结果的所有方面2.评估关键因素：1/3、1/103.正确表达：末位对齐、有效位数、扩展因子4.预期用途：确认不确定度是否满足终端用户要求不确定度规定每个校准等级的目标不确定度通过减少校准次数来降低不确定度正确理解、看待不确定度建立溯源性的