检验科全套SOP文件5生化室作业指导书

1、生化室作业指导书 文件编号：ABCD-3-SF-0161第A版编制： 审核： 批准： 生效日期：2008年8月8日ABCD医学检测中心 209 / 209目 录序号主 题 内 容 代 号页 号1血清总胆红素测定ABCD-3-SF-0162血清直接胆红素测定ABCD-3-SF-02103血清总蛋白液体双缩脲法测定ABCD-3-SF-03134血清白蛋白溴甲酚绿法测定ABCD-3-SF-04165血清丙氨酸氨基测定ABCD-3-SF-05196血清天门冬氨酸氨基测定ABCD-3-SF-06237血清碱性磷酸酶测定ABCD-3-SF-07278血清-淀粉酶测定ABCD-3-SF-08319血清葡萄糖己糖激酶法测定ABCD-3-SF-093510血清尿素氮谷氨酸测定ABCD-3-SF-103911血清肌酐苦味酸法测定ABCD-3-SF-114312血清尿酸TBHBA法测定ABCD-3-SF-124613血清总胆固醇酶试剂法测定ABCD-3-SF-135014血清甘油三酯酶试剂法测定ABCD-3-SF-145415血清镁二甲苯胺蓝法测定ABCD-3-SF-155816血清无机磷磷钼酸法测定ABC

2、D-3-SF-166117血清钙偶氮胂法测定ABCD-3-SF-176518血清载脂蛋白A1测定ABCD-3-SF-186819血清载脂蛋白B测定ABCD-3-SF-197220血清高密度脂蛋白胆固醇测定ABCD-3-SF-207621血清低密度脂蛋白胆固醇测定ABCD-3-SF-218022血清肌酸激酶(CK) 法测定ABCD-3-SF-228423血清肌酸激酶MB同工酶测定ABCD-3-SF-238824血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ABCD-3-SF-249225血清乳酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-259626血清a-羟丁酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-269927血清总胆汁酸循环酶法测定ABCD-3-SF-2710328OLYMPUS钠、钾、氯离子测定ABCD-3-SF-2810629血清二氧化碳酶试剂法测定ABCD-3-SF-2911230血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定ABCD-3-SF-3011531尿液或脑脊液总蛋白测定ABCD-3-SF-3111832血清g-谷氨酰转移酶测定ABCD-3-SF-3212133钾的电极电位法测定ABCD-3-SF-3312434钠离子电极电位

3、法测定ABCD-3-SF-3412735氯的电极电位法测定ABCD-3-SF-3513236钙的比色法测定ABCD-3-SF-3613737血、尿、脑脊液葡萄糖测定ABCD-3-SF-3714238血、尿液尿素氮（BUN）测定ABCD-3-SF-3814739血、尿液肌酐（Cr）测定ABCD-3-SF-3915240血清天门冬氨酸测定ABCD-3-SF-4015741动脉血气电极法测定ABCD-3-SF-4116342血清乳酸脱氢酶速率法测定ABCD-3-SF-4216843血、尿液淀粉酶两点法测定ABCD-3-SF-4317344血清蛋白电泳法检查ABCD-3-SF-4417845高铁血红蛋白还原试验比色法ABCD-3-SF-4518146血清二氧化碳酶反应终点法测定ABCD-3-SF-4618347正常值、病理值复合控制品ABCD-3-SF-4718848载脂蛋白A1、B复合控制品ABCD-3-SF-4819049复合校准品ABCD-3-SF-4919250载脂蛋白A1、载脂蛋白B校准品ABCD-3-SF-5019451高、低密度脂蛋白胆固醇校准品ABCD-3-SF-5119652

4、722分光光度计维护规程ABCD-3-SF-5219853血气分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5320154Medical低温冰箱操作维护规程ABCD-3-SF-5420355MEDICA 90纯水机操作维护规程ABCD-3-SF-5520556AU1000 ISE分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5620757AU1000生化分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5720958电泳仪操作维护规程ABCD-3-SF-5821459干化学分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5921760离心机操作维护规程ABCD-3-SF-60222 修 订 页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021血清总胆红素(T-BIL)测定1. 实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才

5、能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素+DCA 红色偶氮化合物 表面活性剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3. 标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6. 实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂1试剂2）6.1.1 试剂组成试剂1：664 ml 磷酸缓冲液 40mmol/L氯化钠 9g/L表面活性剂,稳定剂 适量试剂2：616 ml2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/L盐酸 30mmol/L表面活性剂 适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染

6、，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件。8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件。9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以Tr

7、uCal U复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au总胆红素(mol/L) = 校准液浓度 As12. 参考值范围：婴儿： 出生24小时内 150mol/L出生第2天 22-193mol/L出生第3天 12-217mol/L出生第46天 1.7-216mol/L儿童： 一个月 3.4-17mol/L成年人： 1.7-21mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14. 操作性能14.1 线性范围：1.2513mol/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于3%或SD0.07，总精密度小于5%或SD0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的N

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