《课时纯化大肠杆菌》ppt课件
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专题2 :微生物的培养与应用,课题1 微生物的实验室培养,淮北市天一中学,生物组 李伟,三、实验操作,（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）,1计算、称量,操作步骤,2溶化,3调pH： pH76 4过滤：这一步可以省去。,5加塞 6包扎,7灭菌: 高压蒸气灭菌 8倒平板: 待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 9无菌检查： 将灭菌的培养基放入37的温室中培养2448小时，以检查灭菌是否彻底。,（二）纯化大肠杆菌,接种方法有： 平板划线法 稀释涂布平板法,微生物的接种技术：,平板划线的操作,稀释涂布平板法,本课题知识小结:,选择培养基,加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞,问题讨论,若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻混合在一起，我们配置什么样的培养即可以将三种微生物分离？,谢谢观赏,倒平板技术,1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？,问题讨论,答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。,2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？,答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。,3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？,4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？,答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。,答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。,平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法,
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