河北省邢台市2017届高三生物二轮复习基因工程二选修3
5页1、基因工程(二)1.纤维素分子不能进入酵母细胞,为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,构建了含3种不同基因片段的重组质粒,下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答:(1)本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶,其识别序列如下图,为防止酶切片段的自身环接,可选用的限制酶组合是_或_(2) 设置菌株为对照,是为了验证_不携带纤维素酶基因。(3) 纤维素酶基因的表达包括_和_过程,与菌株相比,在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有_。(4)在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、,菌株_不能存活,原因是_。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是_,产生酒精时细胞的呼吸方式是_,在利用纤维素生产酒精时,菌株更具有优势,因为导入的中重组质粒含有_。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁,减少因培养液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率。2.胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白 A、B分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题: (1)图1基因
2、表达载体中没有标注出来的基本结构是 _ 。 (2)图1中启动子是 _ 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 _ 。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 _ 。 (4)-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 _ 。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 _ 。 (6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _ ,理由是 _ 。 3.将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质拉上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。(1)过程需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用培养基。(2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是_。(3)若过程仅获得大量的根,则应在培
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