河北省邢台市2017届高三生物二轮复习基因工程二选修3

基因工程（二）1.纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答：（1）本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是_或_(2) 设置菌株为对照，是为了验证_不携带纤维素酶基因。(3) 纤维素酶基因的表达包括_和_过程，与菌株相比，在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有_。（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、，菌株_不能存活，原因是_。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是_，产生酒精时细胞的呼吸方式是_，在利用纤维素生产酒精时，菌株更具有优势，因为导入的中重组质粒含有_。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。2.胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白 A、B分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题: (1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 _ 。 (2)图1中启动子是 _ 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 _ 。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 _ 。 (4)-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 _ 。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 _ 。 (6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _ ,理由是 _ 。 3.将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有TDNA片段能转移到植物细胞中）。（1）过程需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用培养基。（2）过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_。（3）若过程仅获得大量的根，则应在培养基中增加_以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_。（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是_。种植转基因抗虫棉能减少的使用，以减轻环境污染。4. 生物选修3：现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：（1）理论上，基因组文库含有生物的 基因；而cDNA文库中含有生物的 基因。（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中 出所需的耐旱基因。（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的 _，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的 是否得到提高。（4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。5.（12分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：.利用大肠杆菌表达BglB酶（1）PCR扩增bglB基因时，选用_基因组DNA作模板。（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_。.温度对BglB酶活性的影响（4） 据图1、2可知，80保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。A.50 B.60 C.70 D.80.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性。在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。（5） 与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。A. 仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变基因工程（二）1.【答案】（1）B (或C) C (或B) (2)质粒DNA和酵母菌基因组（3） 转录 翻译 内质网、高尔基体 II 缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到胞外，细胞无可利用的碳源（5）细胞质基质 无氧呼吸 A基因片段2. (1)终止子  (2)RNA 聚合 作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 (3)限制酶和 DNA 连接酶  (4)防止胰岛素的 A、B 链被菌体内蛋白酶降解 (5) -半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素 A、B 链中不含甲硫氨酸 (6)至少2 个 两条肽链的一端各有一个游离的氨基,氨基酸 R 基团中可能还含有 游离的氨基 3.答案：（1）限制选择（2）TDNA片段筛选出含目的基因的受体细胞（3）细胞分裂素部分细胞也能产生生长素（4）接种害虫农药4.【答案】（1）全部 部分（2）筛选（3）乙 表达产物 耐旱性（4）同源染色体的一条上5.【答案】（1）嗜热土壤芽孢杆菌（2）Nde BamH（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶（4）失活 B（5）A、C1