碱性磷酸酶同工酶检测试剂盒
4页1、简介:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于 哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.29.&碱性磷酸酶同工酶有肝、骨、小肠、胎盘、 胆汁等同工酶。碱性磷酸酶同工酶检测试剂盒(抑制敏感法)采用磷酸苯二钠比色法,其检测原理是磷酸 苯二钠在碱性条件下,可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。在碱性条件下酚与氨 基安替比林结合,并经氧化生成红色醌式结构物,呈深浅不一的红色,产物红色越深,说 明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过比色法(分光光度计或酶标仪)测定吸光度, 据此通过比色分析就可以计算出总的碱性磷酸酶活性水平。同时通过尿素、苯丙氨酸抑制 后测定残余ALP活性,以确定同工酶的性质。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或 匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。如果用分光光度计,100T的检 测试剂盒可检测33次左右;如果用酶标仪,100T的检测试剂盒可检测330次左右。该试 剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。组成:编号 名称一一TE0010100TStorage试剂(A): ALP Assa
2、y buffer50ml4C避光试剂(B): ALP显色液50ml-20C避光试剂(C):显色基液150ml-20C避光试剂(D): Phe nol 标准(1mg/ml)2mlRT试剂(E): ddH2O10mlRT使用说明书1份自备料:1、离心管或96孔板2、水浴锅或恒温箱3、分光光度计或酶标仪操作步骤(仅供参考):1、酉己制标准品工作液:取出Phenol标准(1mg/ml)恢复至室温后,取溶解于ddH2O,使浓度达到,即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。按照下表稀释系列标准品溶液。012345Phe nol(0.05mg/ml)(ml)00.10.20.30.40.5ddH2O(ml)0.550.450.350.250.150.05相当于金氏单位(U/L)010203040502、准备样品: 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离 心取上清,冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。 血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的 测定,尿液通常也可以直接用于测定,冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需 设置加了血浆
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