纯度鉴定、小区种植鉴定彭.ppt

农作物种子检验技术培训 讲 义,纯度鉴定、小区种植鉴定,一、品种纯度的含义及意义,品种纯度检验应包括两方面内容，即品种真实性和品种纯度 品种真实性是指一批种子所属品种、种或属与文件描述（description）是否相符如果品种真实性有问题，品种纯度检验就毫无意义了 品种纯度是指品种个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数（或株、穗数）占供检验本作物样品数的百分率表示品种真实性和品种纯度是构成种子质量的两个重要指标，是种子质量评价的重要依据这两个指标都与品种的遗传基础有关，因此都属于品种的遗传品质二、品种纯度检验的方法分类 原理分类：形态、物理化学、生理生化、分子生物学、细胞学（鉴定法） 检验对象分类：种子、幼苗、植株（纯度鉴定） 检验场所分类：田间、室内（纯度检验）；田间小区种植鉴定,方法选择的4个要素： 测定结果在不同实验室或同一实验室能重演； 方法应简单易行； 省时快速； 成本低廉形态鉴定” 1、籽粒形态测定 适合于籽粒形态性状丰富、籽粒较大的作物 劣势：主观因素的影响 2、种苗形态测定（如生长箱测定） 适合于幼苗形态性状丰富的作物（双子叶植物） 劣势：测定结果不太准确（苗期所依据的性状有限） 3、植株形态测定（如田间纯度检验、小区种植鉴定） 优势：测定结果较准确（可依据的性状较多） 劣势：需要时间较长难以满足快速测定的需要,“物理化学法鉴定” 1、物理方法（如荧光鉴定法） 劣势：区别品种的种类较少 2、化学方法（如苯酚、愈创木酚染色法） 愈创木酚专门用于大豆 优势：速度快 劣势：区别品种的种类较少、准确性差,“生理生化方法” 1、生理生化反应为基础 (如：愈创木酚染色法，光周期反应鉴定法，除草剂敏感性鉴定法） 劣势：鉴别能力较低结果不太准确 2、生理生化技术为基础 （如：电泳法鉴定、 色谱法鉴定、免疫技术鉴定） 电泳法 （如：蛋白质或同工酶电泳）√ 技术简单、较准确 色谱法、免疫技术难以在生产实际广泛应用。

细胞学方法” 依据染色体 数量 结构差异 劣势：应用价值不大,“分子生物学方法” 在DNA和RNA等分子水平上鉴定 主要技术： RAPD SSR AFLP RFLP 用途广泛,三、室内纯度测定的基本程序 1、送验样品重量核查 2、送验样品中随机数取一定数量的样品 3、测定异品种种子或杂株数 4、计算样品纯度,,,,,田间小区种植鉴定,一、小区种植鉴定的目的,1、鉴定样品的真实性与品种描述是否相符 标准样品（最可靠标准）育种家提供 2、鉴定样品纯度是否符合国家规定标准或种子标签标注值二、小区种植鉴定的作用（P273）,前控 亲本鉴定 时间：田间检验期间或之前进行 目的：淘汰不符合要求的种子田,后控 企业：收获的种子小区种植鉴定（上市前） 质量监督部门：质量监督抽查工作鉴定种子样品的品种纯度 小区种植鉴定是目前鉴定品种真实性和测定品种纯度最可靠的方法,三、小区种植鉴定的方式,当地同季（与大田生产同步种植） 当地异季（在温室或大棚内种植） 异地异季（冬季在海南省，夏季在青海省）,,标准样品,目的 是为栽培品种提供全面的、系统的品种特征特性的现实描述被鉴定品种的各个生长阶段都可与标准样品进行比较） 管理 来源、保持、确认 更新 芽率下降或库存减少时，同时新旧标样比较,,四、小区种植鉴定的程序（7个步骤）,,1、送验样品重量核查 2、试验地选择 3、小区设计 4、小区管理 5、鉴定与记录 6、结果计算与结果判定 7、结果填报,试验地选择 前作无同类作物和杂草 土壤均匀、肥力一致、良好 有栽培管理措施,,原则,小区设计(P274) “六个”方面（P274-275） 种植株数：4N原则（理论上） X%=（N－1）×100%/N X%：品种纯度标准 行株距 大株作物点播和点栽 种植图,例如： 标准规定纯度为98%，即N为50，种植4N= 200株即可达到要求。

(N-1)×100%/N ＝ 98％， N ＝ 50,,小区管理 同于大田生产 特殊之处： 1、要保持品种各个生产阶段的特征特性和品种间差异 2、只要求观察品种的特征特性不需高产 （易倒伏品种控制肥料） 3、使用除草剂或生长调节剂 小心,鉴定和记录 鉴定时间：整个生长季节都可 必须要的： 成熟期（常规种） 花期（杂交种） 食用器官成熟期（蔬菜种）,鉴定株数：4N 鉴别对象：品种特征特性 特征：作物品种在形态性状上区别于其他品种的征象、标识（株高、叶色、叶形、花色） 特性：作物品种区别于其他品种的生物学性状（生育期、抗病性、抗旱性、种子落粒性） 明显不同的“特征特性”：株高、颜色、育性、形状、成熟 度 不明显的“特征特性”：在植株特定部位可以观察到，叶形、 叶茸、花、种子,以质量性状为主，结合使用数量性状 质量性状：由一对或少数几对基因控制，在分离群体中表现为非连续 分布的性状受环境影响小） 籽粒颜色、花色 数量性状：由微效多基因控制，在分离群体中表现为连续分布、可用 数量单位表示的性状受环境影响大） 株高、穗重 变异株的判定：注重遗传变异，非环境产生的变异 计数：非常明显的变异株，忽略小的变异株 沿行进行，背光行走，避免恶劣天气进行 记录,品种性状根据特点分为： 主要性状（固有的不易变化的明显性状） 次要性状（细小不易观察但稳定） 易变性状（容易随外界条件的变化而变化） 特殊性状（品种特有的性状） 鉴定时：抓住品种的主要性状和特殊性状，必要时考虑次要性状和易变性状。

有分蘖的植株（水稻、小麦）： GB/T3543.5规定是以株数为计数单位小麦,苗期： （1）芽鞘色：绿色和紫色（遗传基因控制） （2）幼苗生长习性：匍匐生长；半匍匐生长；直立生长 （3）叶色：深绿；绿色；淡绿 （4）叶片：宽窄长短,,,苗期,,直立型,半匍匐型,,匍匐型,小麦,成熟期： （1）株高：高矮以不高或不低于穗层一个穗长为准 注意：一般正常品种的主茎穗要高一些 （2）株型：紧凑型、松散型 （3）穗型：纺锤型、长方形、圆锥形、棍棒型 、椭圆型、 分枝型 （4）芒：无芒、曲芒、直芒 （5）芒色：白（黄）、黑、红 （6）叶片（旗叶角度）：挺直（20度以下）、中等（２０度至９０度）、下披（９０度以上） （7）粒色：红色、白色、紫黑色、青黑色,穗型,纺锤形,椭圆形,长方形,棍棒形,圆锥形,无芒,顶芒,短芒,长芒,曲芒,芒型,玉米,花期： （1）株高：极矮、矮、中、高、极高 （2）株型：紧凑型、松散型 直立、“之”字型 （3）雄穗： 小穗颖片或基部颜色：绿、浅紫、紫、深紫、黑紫 （新鲜）花药颜色：绿、浅紫、紫、深紫、黑紫 主轴与分枝的角度：极小（小于５度）、小（２５度）、中等（５０度）、大（７５度）、极大（９０度） （4）雌穗： 花丝颜色：绿、浅紫、紫、深紫、黑紫 苞叶长度：极短（果穗漏出）、短（苞叶刚好覆盖果穗或超出一个手指内）、长 穗型：圆筒形、直圆锥形、中间型。

（５）支持根（气生根）,结球白菜,（1）叶：叶色、叶柄色、叶缘、叶形、叶面 （2）叶球：叶球形状、包合类型、紧密度、球心颜色、纵径、横径 （3）种株：株高、植株开展度、枝秆硬度 （4）花：花期、分枝、花期自交亲和指数,苗床中的杂株,苗床中的杂株,大白菜性状介绍,1. 株型,3直立 5 半直立 7平展,10. 花的颜色(Flower: color),1 white 3 yellow 5 light yellow 7 dark yellow 9 orange 白 黄 浅黄 深黄 桔黄,13. 叶形 : (Outer leaf : shape),14. 叶色(Outer leaf : color),1 yellow green 3 light green 5green 7 Grey green 9 dark green 黄绿 浅绿 绿 灰绿 深绿,15. 叶的光泽(Outer leaf: glossiness),3 weak 弱 7 strong 强,16. 茸毛(Outer leaf: hairiness),1 No 无 5 Few 少 9 Many 多,17. 叶缘波状(Undulation of leaf margin),1 No 无 3 Small 小,5 Medium 中 7 Large 大,18. 叶缘锯齿,1全缘 3 钝锯 5 单锯 7 复锯,19. 叶面皱缩(Outer leaf: blistering),1平 Smooth 3稍皱 Weak,5 多皱 Strong 7 泡皱 Bubble,20. 叶脉鲜明度(Outer leaf: distinctness of vein),3 不明显 Indistinct 7 明显 Distinct,21. 中肋(叶柄)色 (Outer leaf: Color of midrib),1 White 3 Green white 5 Light green 7 green 白 绿白 浅绿 绿,27. 叶球形状(Head: Shape),2 Globual 3 Obovate 5 Cylindrical 7 Bomb-like 球形 头球形 筒形 炮弹形,30.球顶部抱合状况(Head: State of wrapper leaf),1 舒心 3 拧抱 5 合抱 7 叠抱,31. 球顶部形状(Head: shape of head top),3 Flat 平 5 Round 圆 7 Sharp 尖,32. 叶球颜色(Head: color of wrapper leaf),1 white 3 light yellow 5 light green 7 dark green 白 浅黄 浅绿 深绿,33.叶球内叶颜色(Head:internal color),1 white 2 light yellow 3 yellow 5 orange 白 浅黄 黄 桔黄,结果计算与结果判定 品种纯度结果表示有2种方法： 变异株数目 百分率,“变异株数目”表示 GB/T3543.5所规定的淘汰值就是以变异株数表示。

对于品种纯度高于99.0%（如育种家种子、原种）采用淘汰值 淘汰值：是在考虑种子生产者利益和有较少失误的基础上，把在一个样本内观察到的变异株数与标准比较，作出符合要求或淘汰的决定P276 表20-1,“淘汰值”的计算： 淘汰值的推算采用“泊松”分布 公式：,R为淘汰值，X为标准所换算成的变异株数 结果：舍去所有小数位数,例： 纯度99.9%，在4000株中的变异株数（即X值）为4000*（100%-99.9%）= 4，R=4+1.65*2 +0.8+1=9.1，去掉所有小数后，淘汰值为9,判定 变异株数大于或等于规定的淘汰值，就应淘汰（不合格） 上述例题，如果鉴定中发现变异株数≥9，则判定为不合格,“百分率”表示 所鉴定的本品种、异品种、异作物和杂草等均以所鉴定植株的百分率表示 公式：,计算结果保留1位小数,“容许差距”T值 公式： p—品种纯度的数值（不带%） 为标准规定值 q—100－p N—种植株数（实操中为鉴定的株数） T值保留一位小数,,例： 纯度90.0%，种植78株，那么p为90，q为10，N为78 T=5.6,判定 │实测品种纯度值—标准规定值│＞T。