实验动物基本操作20081111教程课件.ppt

动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术实验动物中心实验动物中心为为了了确确保保实实验验研研究究结结果果的的可可靠靠性性、准准确确性性和和可可重重复复性性，必必须须掌掌握握规规范范的的动动物物实实验操作技术验操作技术娴娴熟熟的的动动物物实实验验操操作作技技术术和和技技巧巧，是是实实验验研研究的保证究的保证动动物物具具有有自自卫卫能能力力，不不会会讲讲话话，不不领领人人情情，更不会自动服从更不会自动服从减减少少动动物物的的应应激激反反应应或或伤伤害害，避避免免实实验验人人员员出现意外和受伤出现意外和受伤实验前准备实验前准备v理论准备：理论准备：v了解动物实验基础知识了解动物实验基础知识v查阅关于实验方法的参考文献查阅关于实验方法的参考文献v制定研究计划和方案制定研究计划和方案v条件准备：条件准备：v动物、仪器、器械、药品动物、仪器、器械、药品v实验场所和饲养场所实验场所和饲养场所实验动物的抓取与固定性别鉴定年龄的大致判断妊娠检查分组与编号本章主要内容本章主要内容本章主要内容本章主要内容常规采血方法给药途径与方法麻醉方法处死方法第一节第一节实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定原则：原则：安静环境安静环境动作轻柔和熟练动作轻柔和熟练善待动物：善待动物：多一份爱就多一份收获多一份爱就多一份收获小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠家兔家兔狗狗猫猫猴猴第二节第二节性别鉴定性别鉴定实验设计时有雌雄各半、雌雄不限等。

实验设计时有雌雄各半、雌雄不限等性成熟后，雌雄动物易区分：性成熟后，雌雄动物易区分：外生殖器外生殖器第二性征第二性征新生动物？冬季天冷时的兔子？新生动物？冬季天冷时的兔子？大鼠和小鼠兔、豚鼠第三节第三节年龄的大致判断年龄的大致判断提提供供实实验验动动物物时时要要有有动动物物出出生生和和生生长长记记录录根据卡片记录来准确判断年龄根据卡片记录来准确判断年龄如如无无记记录录则则要要根根据据该该动动物物的的生生长长曲曲线线、牙牙齿、爪子或者毛色特征来大致判断齿、爪子或者毛色特征来大致判断常用实验动物成年体重常用实验动物成年体重动物动物小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠家兔家兔猫猫狗狗体重体重18-28g180-280g350-650g2-3kg1.5-2.5kg9-15kg小鼠小鼠ICR生长曲线CBA/J生长曲线初生小鼠即可发声，初生小鼠即可发声，嗅觉和味觉敏感嗅觉和味觉敏感3日脐带脱落，开始日脐带脱落，开始长毛并出现胡须长毛并出现胡须46日双耳耸立日双耳耸立78日开始爬行，下门齿长出，被毛浓密日开始爬行，下门齿长出，被毛浓密911日有听觉，被毛长齐日有听觉，被毛长齐911日听觉发育完全，被毛长齐日听觉发育完全，被毛长齐1214日开眼，上门齿出，开始采食、饮水日开眼，上门齿出，开始采食、饮水能跳跃，能抓取东西能跳跃，能抓取东西3周周后后可可断断奶奶独独立立生生活活雄鼠：6.90g雌鼠：6.40gSD生长曲线大鼠大鼠初生仔鼠无毛、闭眼、耳孔闭合、6-7克耳朵张开开始长毛被毛明显8-10天下门齿长出14-17天开眼19天第一对臼齿长出21天第二对臼齿长出、可以断乳雄鼠：52g，雌鼠：50g豚鼠豚鼠一般年幼豚鼠牙齿短而白，爪软而短，眼睛圆亮，行一般年幼豚鼠牙齿短而白，爪软而短，眼睛圆亮，行动活泼，被毛有光泽，且紧贴身体动活泼，被毛有光泽，且紧贴身体。

而老年豚鼠则相而老年豚鼠则相反，牙齿和爪均较长，眼睛朦胧，行动迟缓反，牙齿和爪均较长，眼睛朦胧，行动迟缓可根据体重粗略地判断年龄同日龄豚鼠，雌性体重可根据体重粗略地判断年龄同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性实验对年龄要求比较严格时，必须由卡略高于雄性实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄片记录提供准确年龄日龄/d初生720306090120180体重/g50-115100-120150-200170-220240-300330-400400-470520-600兔兔年龄判断的重要标志：门齿和爪年龄判断的重要标志：门齿和爪门齿：门齿：青年兔：洁白、短小、整齐青年兔：洁白、短小、整齐老年兔：暗黄、厚长、不整齐、破损老年兔：暗黄、厚长、不整齐、破损趾爪：趾爪：1岁，红多于白，岁，红多于白，=1岁，红色与白色相当，岁，红色与白色相当，1岁，白多于红色岁，白多于红色另另外外，家家兔兔皮皮薄薄而而紧紧，眼眼神神明明亮亮，行行动动活活泼泼的的为为青青年年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔狗狗主要依据牙齿的生长情况、磨损程度、外形、主要依据牙齿的生长情况、磨损程度、外形、颜颜色等来综合鉴定色等来综合鉴定:2030天开始长牙，第天开始长牙，第10个月牙个月牙齿已全部长出。

齿已全部长出随着年龄的增长，乳齿脱落而长出恒齿随着年龄的增长，乳齿脱落而长出恒齿2-4个月，更换个月，更换门齿，门齿，56个月更换犬齿个月更换犬齿幼年狗的牙齿洁白而无磨损，幼年狗的牙齿洁白而无磨损，12岁时，下岁时，下颌的前门颌的前门齿逐渐被磨损，齿逐渐被磨损，23岁时，前门齿的尖锐端被磨损而消岁时，前门齿的尖锐端被磨损而消失而上颌失而上颌前门齿在前门齿在23岁时才开始磨损在岁时才开始磨损在45岁岁时，其尖锐端也被磨损消失，且时，其尖锐端也被磨损消失，且牙齿发黄到牙齿发黄到1012岁时，牙根全部磨损岁时，牙根全部磨损年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮门齿有尖突牙长齐，洁白光亮门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白第四节第四节妊娠检查妊娠检查临床检查和实验室检查：临床检查和实验室检查：外部检查法外部检查法:外表观察；试情法外表观察；试情法摸胎法：兔、犬、猫摸胎法：兔、犬、猫阴道检查法：大小鼠、豚鼠、地鼠阴道检查法：大小鼠、豚鼠、地鼠直肠检查法：大动物直肠检查法：大动物超声波检查法超声波检查法孕酮含量测定法孕酮含量测定法青蛙试验：猴青蛙试验：猴大小鼠阴道涂片检查阴栓检查第五节第五节分组与编号分组与编号动动物物实实验验之之前前，必必须须对对动动物物进进行行随随机机分分组，再编号标记。

组，再编号标记随机化分组：避免人为影响随机化分组：避免人为影响一、分组一、分组例例1：将：将14只小鼠随机分成两组只小鼠随机分成两组先将小鼠编为先将小鼠编为114号，号，在在随随机机数数字字表表上上任任点点一一数数，按按任任意意方方向向连连续续抄抄14个个随随机机数数字字或或者者用用计计算算器器产生随机数字产生随机数字编排如下：编排如下：动物编号动物编号1234567891011121314随机数日随机数日1622779439495443548217379323归归组组BBABAABABBAAAA奇数代表奇数代表A织，偶数代表织，偶数代表B组组A组：组：356811121314B组：组：1247910调调整整分分组组：接接刚刚才才随随机机数数字字23继继续续抄抄表表得得随随机机数数字字78，用用78除除以以8（因因为为需需要要把把A组组的的8个个数数字字调调整整掉掉一一个个），得得余余数数6，所所以以把把A组的第组的第6个动物，即个动物，即12号动物调整到号动物调整到B组最终分组最终分组A组：组：3568111314B组：组：124791012注意：注意：如果如果A组多组多3个，则再取个，则再取1个随机数字，除以个随机数字，除以7。

如果除尽，则写下除数当做余数如果除尽，则写下除数当做余数例例2：12只大鼠随机分为只大鼠随机分为3组组大鼠编号大鼠编号112在在随随机机数数字字表表上上任任点点一一数数，按按任任意意方方向向连连续续抄抄12个个随机数字随机数字每个数分别用每个数分别用3除，记录余数（整除记下除，记录余数（整除记下3）根据余数分组根据余数分组大鼠编号：大鼠编号：1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12随机数字：随机数字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79，69，10余数：余数：2，3，1，2，3，2，3，3，1，1，3，1组别：组别：B，C，A，B，C，B，C，C，A，A，C，AA：3，9，10，12B；1，4，6C：2，5，7，8，11调调整整分分组组：接接刚刚才才随随机机数数字字10继继续续抄抄表表得得随随机机数数字字61，用用61除除以以5（因因为为需需要要把把C组组的的5个个数数字字调调整整掉掉一一个个），得得余余数数1，所所以以把把C组组的的第第1个个动动物物，即即2号动物调整到号动物调整到B组最终分组最终分组A：3，9，10，12B；1，2，4，6C：5，7，8，11例例2：6只大鼠随机将每只分为只大鼠随机将每只分为1组组大鼠编号大鼠编号16在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄6个随机数字。

个随机数字每个数分别用每个数分别用6、5、4、3、2、1除，记录余数（整除记下除数）除，记录余数（整除记下除数）根根据据余余数数分分组组:余余数数3则则把把C记记下下；余余数数1，则则把把剩剩下下的的第第1个个字字母母A记记下；第下；第3个余数个余数1，把剩下的第，把剩下的第1个字母个字母B记下记下大鼠编号：大鼠编号：1，2，3，4，5，6随机数字：随机数字：33，46，10，52，68，07除数：除数：6，5，4，3，2，1余数：余数：3，1，2，1，2，1，A组别：组别：BCDEF二、编号和标记二、编号和标记1、染色法：浅色动物、染色法：浅色动物3.5-5苦味酸溶液（黄色）苦味酸溶液（黄色）0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）中性红或碱性品红溶液（红色）2硝硝酸酸银银溶溶液液（咖咖啡啡色色，涂涂后后光光照照10分钟）分钟）煤焦油酒精溶液（黑色）煤焦油酒精溶液（黑色）龙胆紫溶液（紫色）龙胆紫溶液（紫色）2、打耳孔法：小型动物、打耳孔法：小型动物3、剪剪趾趾法法：小小型型动动物物139号？4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分5、针刺法、针刺法(纹身纹身)：刺号钳，中、大型动物：刺号钳，中、大型动物6、号号牌牌法法：耳耳标标签签、项项圈圈、腿腿圈圈，中中、大大型动物型动物7、剪毛法：大动物、剪毛法：大动物8、笼子标号笼子标号三、去毛三、去毛1、剪毛：弯头剪毛剪、剪毛：弯头剪毛剪2、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射3、剃剃毛毛：将将剃剃毛毛部部位位先先用用剪剪刀刀粗粗剪剪一一遍遍，蘸蘸温温肥肥皂皂水水润润湿湿，用用剃剃刀刀顺顺着着被被毛毛方方向向剃剃毛毛；如用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛。

如用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛4、化学脱毛：、化学脱毛：常用脱毛剂常用脱毛剂8%硫化钠水溶液硫化钠水溶液硫硫化化钠钠3份份，洗洗衣衣粉粉1份份、淀淀粉粉7份份，加加水水调成糊状调成糊状硫硫化化钡钡50克克，氧氧化化锌锌25克克，淀淀粉粉25克克，加水加水100毫升调成糊状毫升调成糊状硫硫化化钠钠10克克，生生石石灰灰15克克，加加水水到到100毫毫升，适合犬和其他大动物升，适合犬和其他大动物第六节第六节常规采血方法常规采血方法正式实验前后，常需采血测定生化指标正式实验前后，常需采血测定生化指标1、大小鼠：、大小鼠：v眶静脉丛（窦。