降钙素原检测及临床意义
6页1、降钙素原(PCT)检测及临床意义一、概述PCT是无激素活性的降钙素前肽物质,由116个氨基酸组成,分子量为13 KD 的糖蛋白。PCT的半衰期为25-30小时,在体外稳定性很好。健康人血浆PCT含量极低.PCT选择性地对系统性细菌感染、真菌感染及寄生虫感染有反应,而对无菌性炎症 和病毒感染无反应或仅有轻度反应。许多学者研究发现,全身性细菌、真菌和寄生虫感 染时,PCT水平异常增高,增高的程度与感染的严重程度及预后相关,在全身性细菌感 染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值o PCT水平的 监测,对于严重威胁生命的感染性疾病过程和跟踪治疗方案是很有用的,PCT浓度的升 高标志着炎症反应正在进行中,使用足够的抗生素、炎症灶清除术治疗等,PCT值下降, 证明治疗方案正确,预后良好,反之改变治疗方案。PCT为所有不知病因的炎症性疾病的鉴别诊断提供帮助与支持,如细菌性与毒素性 的急性成人呼吸窘迫综合症(ARDS)的鉴别;胆源性与毒素性胰腺炎的鉴别;细菌性与 病毒性脑膜炎的鉴别;微生物诱导的发热与非细菌性发热的鉴别,特别是发热待查(FOU) 的诊断,病毒感染或自身免疫失调
2、与免疫抑制条件下的急性细菌感染的鉴别,发热的病 因的鉴别,如在肿瘤患者中被肿瘤溶解物或化疗诱导与细菌、真菌或其他感染病因区别, 早期诊断新生儿和婴儿全身性细菌感染与败血症引起的急性发热;术后常规,包括术后 感染预警及用药监测,术后切除感染灶(如腹膜炎、软组织感染)后的治疗指导,监测 腹膜炎、吻合口漏和无典型腹部症状的疾病过程;器官移植后的监测,移植前排除急性 细菌或其他感染,鉴别急性器官排斥、急性病毒、细菌与真菌感染;长期在ICU的患者 及长期机械通气患者的监测,监测疾病过程及指导治疗;监测高危患者,早期获得有关 并发症和内环境衰退的信息。许多临床研究证明,PCT在不同医学领域对诊断和指导治疗有很高的价值,与目前 所应用的诊断指标相比,PCT在鉴别诊断和控制感染及严重炎症方面提供了额外的信息。 随着临床实践性研究的不断深入,临床数据的不断积累,PCT作为一个全身性细菌感染 和脓毒症辅助和鉴别诊断的常规指标将成为共识,并将得到广泛的应用。二、PCT分子生物学结构 PCT来自定位于第11号染色体上(11P15, 4 )单拷贝基 因(与降钙素基因相关肽为同一基因)该基因由2800个碱基对组成
3、,含6个外显子和 5个内含子,基因全长约7.6Kb。转录后经特定剪辑产生PCTmRNA,再翻译成降钙素原前 体(Pre-PCT),在高尔基复合体及分泌囊中,经一系列水解酶作用最终形成PCT氨基酸 多肽(aminoPCT),降钙素(CT)及羧基端21个 氨基多肽(CT: CCP-1 )。三、 血清PCT来源及可能的生物学机制 正常条件下人血清PCT含量极低,约 2.5pg/ml (运用高效液相色谱分析)而成熟CT含量约6.3 pg/ml。髓质甲状腺肿瘤或 其他神经内分泌肿瘤患者血清PCT及其组分均增高,组分相对含量也发生变化。在一些 非甲状腺损伤如慢性肾衰、吸入性烧伤、急性细菌感染、中风、败血症等患者血清PCT 及其组分也均增高,有些甚至成倍的上升,而CT略微升高,说明除甲状腺髓质细胞分泌 贮存PCT外,仍有其他细胞具有这些功能。血清PCT升高的可能的生物学机制:靶细胞(PBMCs等)在LPS各种败血症相关因 子作用下应急分泌PCT,这种应急分泌超过细胞后转录过程(由Pro-CT分解为aminoPCT、 CT、CT: CCP-1)或后转换过程缺少必需的水解酶,从而导致实验所观察到的PCT
4、成倍增 长,而CT水平不变或稍增高。四、检测方法及正常参考值范围目前除了费时不易自动化 的凝胶层析法及高效液相色谱分析法,检测PCT较特异与敏感的分析方法有:双抗夹心 免疫化学发光法(双抗夹心法)和放射免疫分析法(RIA)。双抗夹心法运用双单克隆抗体,其一作为捕获抗体直接结合PCT96-106氨基酸残基 即未成熟CT: CCP-1部分,另一作为示踪抗体直接结合PCT70-76氨基酸残基,即未成熟 CT分子,人工合成的PCT作为标准。该方法比较特异无交叉反应,其检测最低为 10pgml-1l,标准曲线线性范围为10-60pg - ml-1o批内、批间变异系数分别为7%和 8%。该法已有商品试剂,所需时间较短,易自动化,但该法不能检测到正常人血清中 PCTo RIA使用一种对人工合成的aminoPCT特异的多克隆抗体RIB7。RIB7直接作用PCT 的aminoPCT部分,故RIA既能检测游离的PCT,又能检测结合型的PCT,也可检测降钙 素基因相关前体(Pro-CGRP),此法可信的敏感度为4 pg -ml-1o线性范围10-77pgml-1, 50%的结合游离比为140pgml-l,该
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