基因工程疫苗.ppt

第五章第五章  基因工程疫苗基因工程疫苗                          第一节第一节 疫苗概述疫苗概述一、疫苗的起源与发展一、疫苗的起源与发展Ø疫苗的起源可以追溯到我国古代疫苗的起源可以追溯到我国古代Ø早在早在4 4世纪初，东晋葛洪所著世纪初，东晋葛洪所著《《肘后方肘后方》》中，已有关于中，已有关于防治狂犬病的记载：防治狂犬病的记载：““杀所咬犬，取脑敷之，后不复发杀所咬犬，取脑敷之，后不复发””Ø在宋真宗时代（公元在宋真宗时代（公元10001000年左右）宰相王达之子患了天年左右）宰相王达之子患了天花，四处请医无效，最后请来了峨眉山的道人，取其患处花，四处请医无效，最后请来了峨眉山的道人，取其患处的结痂，处理后进行自体接种而治愈，这当是最早的的结痂，处理后进行自体接种而治愈，这当是最早的自身自身免疫治疗（免疫治疗（self-Vaccine）） î逐渐发展成了预防天花的逐渐发展成了预防天花的人痘接种法人痘接种法，，即从感染天花后的恢复期病人或症状比较即从感染天花后的恢复期病人或症状比较轻的病人身上，挑取水泡、脓疱和痘痂内轻的病人身上，挑取水泡、脓疱和痘痂内容物并保存容物并保存1 1个月左右待其干燥，然后将其个月左右待其干燥，然后将其研磨成粉末，给健康人的鼻腔吸入，以预研磨成粉末，给健康人的鼻腔吸入，以预防天花，取得了很好的保护效果。

防天花，取得了很好的保护效果这是人这是人类史上最早使用疫苗来预防疾病的记录类史上最早使用疫苗来预防疾病的记录，，较英国医生琴纳（较英国医生琴纳（JennerJenner）发明牛痘苗早）发明牛痘苗早了几百年了几百年 î15世纪中期我国的人痘苗接种法传至中东，后经改革进行世纪中期我国的人痘苗接种法传至中东，后经改革进行皮下接种皮下接种î1721年英驻土耳其的大使夫人，将此法又传至英与欧洲各年英驻土耳其的大使夫人，将此法又传至英与欧洲各国î人痘的发明是中国人民对世界医学的一大贡献人痘的发明是中国人民对世界医学的一大贡献2000年，年，美国疾病控制与预防中心（美国疾病控制与预防中心（Centers for Disease Control and Prevention，，CDC）出版了）出版了《《疫苗可预防疾病的流行病学与疫苗可预防疾病的流行病学与疫苗可预防疾病的流行病学与疫苗可预防疾病的流行病学与预防学预防学预防学预防学》》》》第第6版，在这本被誉为疫苗学权威手册首页的版，在这本被誉为疫苗学权威手册首页的“疫疫苗接种的里程碑苗接种的里程碑”中，第一项即是中，第一项即是“12世纪中国开始用人世纪中国开始用人痘接种预防天花痘接种预防天花”（见表（见表6-1）。

这是）这是对中国首先开始使用对中国首先开始使用人痘接种预防天花是最早的免疫接种形式的肯定人痘接种预防天花是最早的免疫接种形式的肯定 î表表5-1 疫苗发展史上的里程碑事件疫苗发展史上的里程碑事件 时间时间事件事件12世纪世纪中国开始用人逗接种预防天花中国开始用人逗接种预防天花1721年年人逗接种传入英国人逗接种传入英国1796年年E. Jenner为为James Phipps接种牛痘，疫苗接种正式开始接种牛痘，疫苗接种正式开始1870L. Pasteur发明了第一个细菌减毒活疫苗发明了第一个细菌减毒活疫苗——鸡霍乱疫苗鸡霍乱疫苗1884年年L. Pasteur发明了第一个病毒减毒活疫苗发明了第一个病毒减毒活疫苗——狂犬病疫苗狂犬病疫苗1885年年L. Pasteu第一次把狂犬病疫苗接种于人体第一次把狂犬病疫苗接种于人体1901年年Von Behring发现了白喉抗毒素，获得第一个医学诺贝尔奖发现了白喉抗毒素，获得第一个医学诺贝尔奖1909年年Smith发明了灭活白喉毒素的方法发明了灭活白喉毒素的方法1909年年Calmette和和Guerin发明了第一个用于人的细菌减毒活疫苗发明了第一个用于人的细菌减毒活疫苗BCG1933年年Good Pasture发明了鸡胚病毒培养法发明了鸡胚病毒培养法1949年年Enders及其同事从人细胞系中分离出脊髓灰质炎及其同事从人细胞系中分离出脊髓灰质炎Ⅱ型型Lancing株株1954年年Enders分离出麻疹病毒分离出麻疹病毒1955年年脊髓灰质炎灭活疫苗获准生产脊髓灰质炎灭活疫苗获准生产时间时间时间时间事件事件事件事件19611961年年年年人二倍体细胞株建立人二倍体细胞株建立人二倍体细胞株建立人二倍体细胞株建立19631963年年年年麻疹疫苗获准生产麻疹疫苗获准生产麻疹疫苗获准生产麻疹疫苗获准生产三价脊髓灰质炎疫苗获准生产三价脊髓灰质炎疫苗获准生产三价脊髓灰质炎疫苗获准生产三价脊髓灰质炎疫苗获准生产19661966年年年年世界卫生联盟呼吁全球消灭天花世界卫生联盟呼吁全球消灭天花世界卫生联盟呼吁全球消灭天花世界卫生联盟呼吁全球消灭天花19771977年年年年索马里发现最后一例本土天花索马里发现最后一例本土天花索马里发现最后一例本土天花索马里发现最后一例本土天花19791979年年年年美国报道最后一例野毒传播型脊髓灰质炎美国报道最后一例野毒传播型脊髓灰质炎美国报道最后一例野毒传播型脊髓灰质炎美国报道最后一例野毒传播型脊髓灰质炎19861986年年年年第一个重组疫苗第一个重组疫苗第一个重组疫苗第一个重组疫苗————重组乙型肝炎疫苗获准生产重组乙型肝炎疫苗获准生产重组乙型肝炎疫苗获准生产重组乙型肝炎疫苗获准生产19891989年年年年推荐使用二剂型麻疹疫苗推荐使用二剂型麻疹疫苗推荐使用二剂型麻疹疫苗推荐使用二剂型麻疹疫苗19901990年年年年第一个多糖结合疫苗第一个多糖结合疫苗第一个多糖结合疫苗第一个多糖结合疫苗——B——B型流感嗜血杆菌疫苗获准生产型流感嗜血杆菌疫苗获准生产型流感嗜血杆菌疫苗获准生产型流感嗜血杆菌疫苗获准生产19911991年年年年西半球报道最后一例野毒株脊髓灰质炎病例西半球报道最后一例野毒株脊髓灰质炎病例西半球报道最后一例野毒株脊髓灰质炎病例西半球报道最后一例野毒株脊髓灰质炎病例乙型肝炎免疫纳入全球计划免疫乙型肝炎免疫纳入全球计划免疫乙型肝炎免疫纳入全球计划免疫乙型肝炎免疫纳入全球计划免疫19941994年年年年美国消灭脊髓灰质炎得到证实美国消灭脊髓灰质炎得到证实美国消灭脊髓灰质炎得到证实美国消灭脊髓灰质炎得到证实19951995年年年年水痘疫苗获准生产水痘疫苗获准生产水痘疫苗获准生产水痘疫苗获准生产19961996年年年年用于婴儿的无细胞型百日咳疫苗获准生产用于婴儿的无细胞型百日咳疫苗获准生产用于婴儿的无细胞型百日咳疫苗获准生产用于婴儿的无细胞型百日咳疫苗获准生产19971997年年年年推荐进行扫荡式脊髓灰质炎免疫推荐进行扫荡式脊髓灰质炎免疫推荐进行扫荡式脊髓灰质炎免疫推荐进行扫荡式脊髓灰质炎免疫19991999年年年年推荐单一使用脊髓灰质炎灭活疫苗推荐单一使用脊髓灰质炎灭活疫苗推荐单一使用脊髓灰质炎灭活疫苗推荐单一使用脊髓灰质炎灭活疫苗20002000年年年年用于婴儿的结合肺炎球菌疫苗获准生产用于婴儿的结合肺炎球菌疫苗获准生产用于婴儿的结合肺炎球菌疫苗获准生产用于婴儿的结合肺炎球菌疫苗获准生产î引自：引自：CDC：：Epidemiology and Prevention of Vaccine-preventable Disease. 6 Edition，，2000Ø17965.14英英国国乡乡村村医医生生爱爱德德华华·琴琴纳纳（（Edward Jenner））进进行行了了人人类类历历史史上上的的第第一一次次疫疫苗苗接接种种试试验验。

Jenner从从一一位位感感染染了了牛牛痘痘的的年年轻轻挤挤奶奶农农妇妇的的手手上上挑挑取取了了痘痘苗苗接接种种到到一一名名8岁岁男男孩孩的的手手臂臂上上经经过过几几个个月月的的严严密密观观察察，，发发现现小小男男孩孩获得了免疫保护，一直没有感染天花获得了免疫保护，一直没有感染天花Ø1798年年9月月，，Jenner发发表表了了接接种种“牛牛痘痘”预预防防天天花花的的论论文文，，虽虽然然当当时时全全然然不不知知天天花花是是由由天天花花病病毒毒感感染染所所致致，，但但这这一划时代的发明，一划时代的发明，开创了人工自动免疫的先河开创了人工自动免疫的先河Ø随后，种痘技术传遍了欧洲，后又传到北美和亚洲随后，种痘技术传遍了欧洲，后又传到北美和亚洲Ø为为纪纪念念Jenner的的这这一一伟伟大大贡贡献献，，巴巴斯斯德德（（Pasteur））将将疫疫苗称为苗称为Vaccine（拉丁文（拉丁文vacc是是“牛牛”的意思）的意思）Ø由由于于长长期期和和广广泛泛地地使使用用牛牛痘痘苗苗，，全全世世界界从从1977年年以以后后再再也没有发现过天花病人也没有发现过天花病人Ø世世界界卫卫生生组组织织（（World Health Organization，，WHO））于于1979年年10月月26日日庄庄严严宣宣布布，，天天花花已已在在全全球球绝绝迹迹。

这这是是人人类类历史上第一个使用疫苗消灭的传染病历史上第一个使用疫苗消灭的传染病Ø19世世纪纪70年年代代，，法法国国科科学学家家路路易易斯斯·巴巴斯斯德德（（Louis Pasteur））有有关关减减毒毒鸡鸡霍霍乱乱菌菌的的研研究究，，是是继继琴琴纳纳之之后后的的重重大大进进步步他他认认为为使使用用减减毒毒的的病病原原体体来来预预防防其其导导致致的的疾疾病病，，比比使使用用相相关关的的动动物物病病原原体体来来预预防防人人类类疾疾病病理理当当更加有效更加有效Ø巴巴斯斯德德建建立立了了现现代代意意义义上上的的预预防防接接种种，，即即通通过过实实验验室内研制的疫苗来预防传染病室内研制的疫苗来预防传染病Ø随随后后的的羊羊炭炭疽疽减减毒毒活活疫疫苗苗的的试试验验成成功功，，尤尤其其是是1885年年首首次次在在人人体体使使用用减减毒毒狂狂犬犬病病疫疫苗苗的的成成功功，，标标志志人人类类进进入入了了一一个个预预防防接接种种的的科科学学新新纪纪元元基基于于安安全全原原因因，，正正式式生生产产的的均均为为狂狂犬犬病病灭灭活活疫疫苗苗，，质质量量上上也也在在不不断断的的改改进进Pasteur在在疫疫苗苗研研制制领领域域的的先先锋锋作作用用和和卓卓越越贡贡献献引起了第一次疫苗革命。

引起了第一次疫苗革命F到到19世纪末，世纪末，人类在疫苗学领域里已经取得了辉煌人类在疫苗学领域里已经取得了辉煌的成就，的成就，包括包括2个人用病毒减毒活疫苗（琴纳的牛痘，个人用病毒减毒活疫苗（琴纳的牛痘，巴斯德的狂犬病），巴斯德的狂犬病），3个人用细菌灭活疫苗（个人用细菌灭活疫苗（美国美国Salmon和和Smith、法国、法国Chamberlai和和Roux的伤寒、霍的伤寒、霍乱和鼠疫乱和鼠疫），以及疫苗学的一些基础概念，如），以及疫苗学的一些基础概念，如Metchnikoff的的的的细胞免疫（细胞免疫（1884年），年），Ehrlich的受的受体理论（体理论（1897年）及年）及毒素毒素毒素毒素- -抗毒素作用抗毒素作用抗毒素作用抗毒素作用F进入进入20世纪前世纪前30年，疫苗学在三个方面取得年，疫苗学在三个方面取得了重大进展：了重大进展：î首先，法国科学家首先，法国科学家Calmette和和Guerin在在1906年从牛年从牛体分离到体分离到1株结核菌，经过株结核菌，经过13年在牛胆汁中传递年在牛胆汁中传递230代，代，获得获得1株减毒株，制成疫苗，于株减毒株，制成疫苗，于1927年上市，即所谓年上市，即所谓卡介苗（卡介苗（BCG）。

î其次，在其次，在20年代，巴斯德研究所的年代，巴斯德研究所的Ramon应用化学应用化学灭活方法获得灭活方法获得白喉和破伤风类毒素并研制成疫苗白喉和破伤风类毒素并研制成疫苗î第三，第三，Wilson Smith和和Thomas Francis分别在禽胚分别在禽胚中研制成功中研制成功2种灭活种灭活甲型流行性感冒（流感）疫苗甲型流行性感冒（流感）疫苗Ø二次大战后，疫苗研究进入了突飞猛进的发展阶段二次大战后，疫苗研究进入了突飞猛进的发展阶段î波波士士顿顿的的Enders及及其其同同事事发发展展了了病病毒毒的的体体外外细细胞胞培培养养技术，促进了多种减毒和灭活病毒疫苗的研制技术，促进了多种减毒和灭活病毒疫苗的研制î50年年代代，，先先有有Salk的的3价价灭灭活活脊脊髓髓灰灰质质炎炎（（脊脊灰灰））疫疫苗苗（（IPV）），，后后有有Sabin的的3价价减减毒毒脊脊灰灰疫疫苗苗（（OPV）），，为为人人类类渴渴望望在在地地球球上上消消灭灭脊脊灰灰提提供供了了有有力力武武器器同同一一时时期期还还研制了在鸡胚细胞中培养减毒的麻疹疫苗研制了在鸡胚细胞中培养减毒的麻疹疫苗î60年代研制了在鸡胚中减毒的流行性腮腺炎疫苗。

年代研制了在鸡胚中减毒的流行性腮腺炎疫苗î70年代研制了在细胞中培养的风疹疫苗年代研制了在细胞中培养的风疹疫苗î细细菌菌疫疫苗苗方方面面，，70年年代代细细菌菌夹夹膜膜多多糖糖的的纯纯化化技技术术促促进进了了多个侵袭性细菌疫苗的研制成功多个侵袭性细菌疫苗的研制成功î同同一一时时期期的的病病毒毒蛋蛋白白纯纯化化技技术术也也促促进进了了血血源源性性乙乙型型病病毒毒性肝炎（乙肝）疫苗的研制成功性肝炎（乙肝）疫苗的研制成功Ø20世世纪纪80年年代代，，现现代代分分子子技技术术的的应应用用推推动动了了又又一一代代疫疫苗苗的的研研制制，，引引发发了了疫疫苗苗发发展展史史上上的的第第二二次次革革命命，，其其首首要要成成果果是是基基因因重重组组乙乙肝肝疫疫苗苗，，为为人人类类在在地地球球上上消消除除乙乙肝肝提提供供了了希希望望与与此此同同时时，，化化学学、、生生物物化化学学、、遗遗传传学学和和免免疫疫学学的的发发展展在在很很大大程程度度上上为为新新疫疫苗苗的的研研制制和和旧旧疫疫苗苗的的改改进进提提供供了了新新技技术术和和新方法（表新方法（表5-2） Ø表表 5-2 新技术对疫苗研制和开发的作用及影响新技术对疫苗研制和开发的作用及影响 学科领域学科领域生物技术生物技术作用和影响作用和影响遗传学遗传学基因工程和基因工程和DNA重组（包括基因重组（包括基因克隆和表达，克隆和表达，DNA测序，测序，DNA合成，核酸内切酶和工具酶，合成，核酸内切酶和工具酶，PCR，全基因图谱），全基因图谱）抗原鉴定和抗原分离抗原鉴定和抗原分离测定抗原的可变性测定抗原的可变性蛋白质抗原的基因工程蛋白质抗原的基因工程基因突变和减毒基因突变和减毒重组微生物作为载体重组微生物作为载体化学化学多肽合成多肽合成鉴定抗原表位鉴定抗原表位研制多肽疫苗研制多肽疫苗蛋白质结构蛋白质结构计数及估测计数及估测T和和B细胞表位细胞表位糖结构糖结构多糖疫苗多糖疫苗基础研究基础研究佐剂，多糖和蛋白质偶联疫苗佐剂，多糖和蛋白质偶联疫苗免疫学免疫学单克隆抗体单克隆抗体抗原鉴定和抗原分离抗原鉴定和抗原分离鉴定抗原表位鉴定抗原表位抗同种异型抗同种异型模拟非蛋白质表位模拟非蛋白质表位免疫调控免疫调控新型佐剂新型佐剂基础研究基础研究细胞和分子免疫机理细胞和分子免疫机理粘膜免疫粘膜免疫Ø至至今今已已有有30余余种种疫疫苗苗成成功功的的用用于于人人类类疾疾病病的的预预防防（（表表5-3））。

其其中中一一半半以以上上是是病病毒毒疫疫苗苗如如天天花花（（poxvirus））、、小小儿儿麻麻痹痹（（poliovirus））、、麻麻疹疹（（Measles））等等曾曾严严重重危危害害人人类类生生命命与与健健康康的的疾疾病病的的流流行行得得到到了了有有效效的的控控制制其其中中天天花花已已被被根根除除，，创创造造了了使使用用疫疫苗苗在在自自然然界界中中彻彻底底消消灭灭一一种种病病原原微微生生物物的的医医学学奇奇迹迹人人类类消消灭灭脊脊髓髓灰质炎的目标也即将实现灰质炎的目标也即将实现Ø表表 6-3 人用疫苗发展年表人用疫苗发展年表应用年份应用年份疾病名称疾病名称疫苗类型疫苗类型1721天花天花“人痘人痘”活天花病毒活天花病毒1796天花天花“天然减毒天然减毒”痘苗病毒痘苗病毒1885狂犬病狂犬病“不同程度不同程度”减毒的灭活病毒减毒的灭活病毒1936黄热病黄热病活减毒病毒活减毒病毒1936流感流感灭活全病毒灭活全病毒1943流感流感灭活完整（灭活完整（whole）病毒）病毒1955小儿麻痹小儿麻痹灭活病毒灭活病毒1957狂犬病狂犬病灭活病毒、鸭胚培养灭活病毒、鸭胚培养1961小儿麻痹小儿麻痹活减毒病毒活减毒病毒1963麻疹麻疹灭活病毒和减毒活病毒灭活病毒和减毒活病毒1967腮腺炎腮腺炎活减毒病毒活减毒病毒1969风疹风疹活减毒病毒活减毒病毒Ø表表 6-3 人用疫苗发展年表人用疫苗发展年表应用年份应用年份疾病名称疾病名称疫苗类型疫苗类型1972流脑流脑纯化多糖纯化多糖A和和C型型1974日本脑炎（乙脑）日本脑炎（乙脑）灭活病毒灭活病毒1976狂犬病狂犬病灭活病毒、人二倍体细胞培养灭活病毒、人二倍体细胞培养1981乙型肝炎乙型肝炎灭活、血源苗灭活、血源苗1982脑膜炎球菌脑膜炎脑膜炎球菌脑膜炎纯化纯化A、、C、、Y、、W135型多糖型多糖1983日本脑炎（乙脑）日本脑炎（乙脑）活减毒病毒活减毒病毒1983水痘水痘活减毒病毒活减毒病毒1986乙型肝炎乙型肝炎基因重组蛋白质疫苗基因重组蛋白质疫苗1991甲型肝炎甲型肝炎活减毒病毒和灭活病毒活减毒病毒和灭活病毒1998轮状病毒腹泻轮状病毒腹泻活减毒病毒活减毒病毒1998回归热回归热纯化蛋白质疫苗纯化蛋白质疫苗Ø我我国国自自1919年年开开始始建建立立专专门门的的机机构构（（中中央央防防疫疫处处，，北北京京生生物物制制品品研研究究所所前前身身））从从事事生生物物制制品品的的研研究究、、生生产产，，这这是是我我国第一所生物制品研究所。

国第一所生物制品研究所Ø建建国国后后，，我我国国政政府府重重新新组组建建和和新新建建了了北北京京、、上上海海、、武武汉汉、、长春、兰州、成都等六个生物制品研究所长春、兰州、成都等六个生物制品研究所Ø中中国国现现有有疫疫苗苗产产品品生生产产企企业业约约30家家，，是是世世界界上上疫疫苗苗产产品品生生产企业最多的国家（表产企业最多的国家（表5-4）Ø中中国国的的疫疫苗苗产产品品年年产产量量已已经经超超过过10亿亿个个剂剂量量单单位位，，疫疫苗苗的的种种类类和和数数量量也也达达到到世世界界之之最最，，其其中中用用于于预预防防乙乙肝肝、、脊脊髓髓灰灰质质炎炎、、麻麻疹疹、、百百日日咳咳、、白白喉喉、、破破伤伤风风的的儿儿科科常常见见病病的的疫疫苗苗生产量达到生产量达到5亿人份，已经全部实现计划免疫接种亿人份，已经全部实现计划免疫接种Ø中国生产的疫苗产品已经能够满足防病、灭病的需要中国生产的疫苗产品已经能够满足防病、灭病的需要Ø表表 6-4 中国主要疫苗种类和生产厂家中国主要疫苗种类和生产厂家 种种类类制品名称制品名称用途用途生产厂家生产厂家病病毒毒类类重组酵母基因工程乙肝重组酵母基因工程乙肝疫苗疫苗用于预防所有已知亚用于预防所有已知亚型的乙肝病毒的感染。

型的乙肝病毒的感染北京天坛生物、深圳北京天坛生物、深圳康泰康泰重组（重组（CHO）乙型肝）乙型肝炎疫苗炎疫苗预防乙型肝炎病毒感预防乙型肝炎病毒感染染长春所、兰州所、华长春所、兰州所、华北制药北制药甲型肝炎纯化灭活疫苗甲型肝炎纯化灭活疫苗（（VAQTA））VAQTA适用于接触适用于接触前的主动免疫，以预前的主动免疫，以预防甲型肝炎病毒引起防甲型肝炎病毒引起的肝炎，但不能预防的肝炎，但不能预防由非甲型肝炎病毒引由非甲型肝炎病毒引起的肝炎首次免疫起的肝炎首次免疫应在预计接触前至少应在预计接触前至少2周进行巴斯德巴斯德-梅里厄梅里厄-康纳康纳公司、北京科兴公司、北京科兴甲型肝炎减毒疫苗甲型肝炎减毒疫苗用于预防甲型肝炎用于预防甲型肝炎史克必成公司、长春史克必成公司、长春所、长春高新所、长春高新种类种类制品名称制品名称用途用途生产厂家生产厂家风疹减毒活疫苗风疹减毒活疫苗年龄为年龄为8个月以上的风疹易个月以上的风疹易感者感者巴斯德巴斯德-梅里厄梅里厄-康康纳公司、兰州所、纳公司、兰州所、天坛生物、上海所天坛生物、上海所麻疹减毒活疫苗麻疹减毒活疫苗预防麻疹病预防麻疹病兰州所、长春所、兰州所、长春所、上海所上海所森林脑炎灭活疫苗森林脑炎灭活疫苗用于预防森林脑炎用于预防森林脑炎长春所长春所乙型脑炎灭活疫苗乙型脑炎灭活疫苗本疫苗免疫接种后，刺激机本疫苗免疫接种后，刺激机体产生抗乙型脑炎病毒的免体产生抗乙型脑炎病毒的免疫力，用于预防乙型脑炎。

疫力，用于预防乙型脑炎兰州所、长春所、兰州所、长春所、天坛生物、上海所天坛生物、上海所Ⅰ型肾综合征出血热纯型肾综合征出血热纯化疫苗化疫苗预防流行性出血热预防流行性出血热兰州所、上海所兰州所、上海所Ⅱ型肾综合征出血热纯型肾综合征出血热纯化疫苗化疫苗预防预防Ⅱ型出血热型出血热长春所长春所流行性感冒灭活疫苗流行性感冒灭活疫苗6岁以上所有希望预防流感岁以上所有希望预防流感的健康人群的健康人群巴斯德巴斯德-梅里厄梅里厄-康康纳公司、史克必成纳公司、史克必成公司、兰州所、长公司、兰州所、长春所、长春高新春所、长春高新腮腺炎减毒活疫苗腮腺炎减毒活疫苗8月龄以上的腮腺炎易感者月龄以上的腮腺炎易感者兰州所、上海所兰州所、上海所种类种类制品名称制品名称用途用途生产厂家生产厂家口服脊髓灰质炎减毒口服脊髓灰质炎减毒活疫苗活疫苗预防脊髓灰质炎预防脊髓灰质炎天坛生物天坛生物口服轮状病毒活疫苗口服轮状病毒活疫苗预防小儿秋季腹泻预防小儿秋季腹泻兰州所兰州所水痘减毒活疫苗水痘减毒活疫苗12月龄以上的水痘易感者月龄以上的水痘易感者长春生物制品研究长春生物制品研究所、史克必成公司、所、史克必成公司、长春所、上海所长春所、上海所人用狂犬病纯化疫苗人用狂犬病纯化疫苗用于预防狂犬病用于预防狂犬病巴斯德巴斯德-梅里厄梅里厄-康康纳公司、兰州所、纳公司、兰州所、长春所、成都所长春所、成都所黄热减毒活疫苗黄热减毒活疫苗预防黄热病预防黄热病天坛生物天坛生物联合联合疫苗疫苗吸附白喉、破伤风、吸附白喉、破伤风、百日咳和脊髓灰质炎百日咳和脊髓灰质炎疫苗疫苗该联合疫苗适用于儿童预防该联合疫苗适用于儿童预防白喉、破伤风、百日咳和脊白喉、破伤风、百日咳和脊髓灰质炎的基础免疫及加强髓灰质炎的基础免疫及加强免疫。

免疫巴斯德巴斯德—梅里厄梅里厄—康纳公司康纳公司麻疹、流行性腮腺炎麻疹、流行性腮腺炎和风疹疫苗和风疹疫苗预防麻疹、流行性腮腺炎、预防麻疹、流行性腮腺炎、风疹风疹默沙东公司、史克默沙东公司、史克必成公司必成公司甲乙肝联合疫苗甲乙肝联合疫苗预防甲肝和乙肝预防甲肝和乙肝史克必成公司、北史克必成公司、北京科兴京科兴二、疫苗与基因工程疫苗二、疫苗与基因工程疫苗二、疫苗与基因工程疫苗二、疫苗与基因工程疫苗 Ø传统疫苗传统疫苗传统疫苗传统疫苗（（（（Traditional VaccineTraditional Vaccine））））用人工变用人工变用人工变用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂或者用理化方法将病病原微生物制成的制剂或者用理化方法将病病原微生物制成的制剂或者用理化方法将病病原微生物制成的制剂或者用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自动免疫以保护人或动物产生免疫力，这些制动免疫以保护人或动物产生免疫力，这些制动免疫以保护人或动物产生免疫力，这些制动免疫以保护人或动物产生免疫力，这些制剂被称为疫苗（多用于预防），即疫苗是由剂被称为疫苗（多用于预防），即疫苗是由剂被称为疫苗（多用于预防），即疫苗是由剂被称为疫苗（多用于预防），即疫苗是由病原体制成的。

病原体制成的病原体制成的病原体制成的   国国内内常常将将细细菌菌制制作作的的人人工工主主动动免免疫疫生生物物制制品品称称为为菌菌苗苗将将病病毒毒（（Virus））、、立立克克次次氏氏体体（（Rickettia））、、螺螺旋旋体体（（Spiral coil））等微生物制成的生物制品称为疫苗等微生物制成的生物制品称为疫苗现现在在国国际际上上一一般般将将细细菌菌性性制制剂剂、、病病毒毒性性制剂以及类毒素统称为疫苗制剂以及类毒素统称为疫苗 （（vaccine）基因工程疫苗：上述狭义的疫苗被称做传统疫苗基因工程疫苗：上述狭义的疫苗被称做传统疫苗（（traditional vaccine），），即完整的病原体为主制成即完整的病原体为主制成的疫苗；而的疫苗；而基因工程疫苗则属于新一代疫苗（基因工程疫苗则属于新一代疫苗（New generation Vaccine））或高技术疫苗范畴（或高技术疫苗范畴（High-tech Vaccine））主要包括主要包括基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗、蛋白工程疫苗苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗、蛋白工程疫苗等等等，广义的还包括等，广义的还包括遗传重组疫苗、合成肽疫苗、抗遗传重组疫苗、合成肽疫苗、抗独特型抗体疫苗以及微胶囊可控缓释疫苗独特型抗体疫苗以及微胶囊可控缓释疫苗等。

等现代疫苗（现代疫苗（Modern vaccine ）：）：是是一种利用现代分子生物学技术使用一种利用现代分子生物学技术使用Ag通过诱发机体产生特异性免疫反应以通过诱发机体产生特异性免疫反应以予防和治疗疾病或达到某种特定的医予防和治疗疾病或达到某种特定的医学目的生物制剂学目的生物制剂 三、传统疫苗与新型疫苗的区别：三、传统疫苗与新型疫苗的区别：传统疫苗传统疫苗①①疫苗的研制则主要是通过人体实验从经疫苗的研制则主要是通过人体实验从经验与失败中获得验与失败中获得② ② 2020世纪以来，随着病原学、流行病学、世纪以来，随着病原学、流行病学、免疫学，特别是病毒组织培养技术的发展，免疫学，特别是病毒组织培养技术的发展，大量传统疫苗相继问世大量传统疫苗相继问世 ③③免免疫疫学学的的进进展展，，使使人人们们可可以以通通过过是是否否产产生生中中和和抗抗体体判判定定疫疫苗苗成成功功与与否否几几乎乎所所有有免免疫疫保保护护机机制制明明确确，，可可以以产产生生中中和和抗抗体体，，又又易易于于培培养养的的疫疫苗苗都都已已获获得得成成功功甚甚至至一一些些新新出出现现的的疾疾病病，，主主要要具具备备上上述述特特点点，，也也可可以以使使用用传传统统疫疫苗苗技技术术迅迅速速研研制制成成功（表功（表5-55-5）。

④④对对于于免免疫疫保保护护机机制制不不明明确确，，有有潜潜在在致致癌癌性性或或免免疫疫病病理理作作用用，，以以及及病病原原不不能能或或难难于于培培养养的的疫疫苗苗，，使用传统疫苗技术就很难研制成功使用传统疫苗技术就很难研制成功新型疫苗新型疫苗①①新型疫苗则是在分子生物、分子免疫新型疫苗则是在分子生物、分子免疫学、蛋白化学以及相应的生物高技术基学、蛋白化学以及相应的生物高技术基础上发展起来的（础上发展起来的（Woodrow，，1997）②②重组重组DNA技术包括促进了疫苗生产技技术包括促进了疫苗生产技术的发展术的发展 ③③从从现现代代的的观观点点来来看看，，我我们们可可以以把把疫疫苗苗定定义义为为：：一一种种使使用用抗抗原原通通过过诱诱发发机机体体产产生生特特异异免免疫疫反反应应以以预预防防和治疗疾病或达到特定医学目的的生物制剂和治疗疾病或达到特定医学目的的生物制剂④④目目前前新新型型疫疫苗苗的的研研究究主主要要集集中中在在改改进进传传统统疫疫苗苗和和研研制制传传统统技技术术不不能能解解决决的的新新疫疫苗苗两两个个方方面面，，包包括括肿肿瘤瘤疫疫苗苗、、避避孕孕疫疫苗苗及及其其它它非非感感染染性性疾疾病病疫疫苗苗的的研研究究，，其其中中发发展展治治疗疗性性疫疫苗苗已已成成为为新新型型疫疫苗苗研研究究的的重重要要组组成部分。

成部分  疫疫 苗苗 类类 型型 国内外生产状况国内外生产状况 国国 内内 国国 外外 1 1 小儿麻痹（小儿麻痹（OPVOPV）） 减毒活疫苗（减毒活疫苗（I-IIII-III型联合）型联合） + +- - 小儿麻痹（小儿麻痹（IVPIVP）） 灭活疫苗（灭活疫苗（I-IIII-III型联合）型联合） + +- - 2 2麻疹麻疹减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ + 3 3卡介苗（卡介苗（BCGBCG））减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ + 4 4白喉白喉- -百日咳百日咳- -破伤破伤风（风（DPTDPT）） 亚单位疫苗（联合）亚单位疫苗（联合）+ ++ + 亚单位疫苗（基因工程亚单位疫苗（基因工程P P））- -+ + 5 5 乙型肝炎乙型肝炎 亚单位疫苗（血源）亚单位疫苗（血源）+ ++ +亚单位疫苗（基因工程亚单位疫苗（基因工程CHOCHO））+ +（（S S））+ +（（S2S2））亚单位疫苗（基因工程酵母）亚单位疫苗（基因工程酵母）+ +（（引进）引进）+ + 6 6乙脑乙脑减毒活疫苗减毒活疫苗+ +- -灭活疫苗灭活疫苗+ ++ + 7 7流脑流脑 亚单位疫苗（多糖）亚单位疫苗（多糖） + ++ +8 8甲肝甲肝减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +灭活疫苗灭活疫苗- -+ +9 9流感流感灭活疫苗灭活疫苗+ ++ +减毒活疫苗（遗减毒活疫苗（遗传重配）传重配）- -+ +10 10 狂犬狂犬灭活疫苗灭活疫苗+ ++ +1111风疹风疹减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +1212腮腺炎腮腺炎减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +麻疹麻疹- -风疹风疹- -腮腮腺炎（腺炎（MMRMMR））减毒活疫苗（三减毒活疫苗（三种联合）种联合）- -+ +1313出血热出血热灭活疫苗灭活疫苗+ ++ +1414腺病毒（腺病毒（Ad4Ad4，，Ad7Ad7））减毒活疫苗减毒活疫苗- -+ +1515水痘水痘减毒活疫苗减毒活疫苗- -+ +1616黄热病黄热病减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +1717轮状病毒腹泻轮状病毒腹泻减毒活疫苗（人猴遗传重配）减毒活疫苗（人猴遗传重配）- -+ +减毒活疫苗（人羊遗传重配）减毒活疫苗（人羊遗传重配）+ +- -1818伤寒伤寒灭活疫苗灭活疫苗+ ++ +减毒活疫苗（减毒活疫苗（Ty21aTy21a））- -+ +1919钩端螺旋体钩端螺旋体灭活疫苗灭活疫苗+ +- -2020霍乱霍乱亚单位亚单位+ +灭活（灭活（CTB+WCCTB+WC））- -+ +亚单位亚单位+ +灭活（基因工程灭活（基因工程CTB+WCCTB+WC））+ ++ +减毒活疫苗（基因工程减毒活疫苗（基因工程CBV-CBV-HgRHgR））- -+ +2121鼠疫鼠疫减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +2222斑疹伤寒斑疹伤寒灭活疫苗灭活疫苗+ ++ +2323布氏杆菌布氏杆菌减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +2424炭疽杆菌炭疽杆菌减毒活疫苗减毒活疫苗+ ++ +2525痢疾痢疾减毒活疫苗（基因工程减毒活疫苗（基因工程FSFS））+ +- -2626链球菌肺炎链球菌肺炎亚单位疫苗（多糖）亚单位疫苗（多糖）- -+ +2727噬血杆菌流感噬血杆菌流感亚单位疫苗（多糖）亚单位疫苗（多糖）- -+ +2828痘苗（天花）痘苗（天花）减毒活疫苗减毒活疫苗+* +* +* +* 注：注：“+ +”为已投入生产，为已投入生产，“- -”为未生产，为未生产，“* *”为已停止生产为已停止生产 第二节第二节 病毒疫苗的种类病毒疫苗的种类è一、一、传统病毒疫苗传统病毒疫苗      又又称称常常规规疫疫苗苗或或第第一一代代疫疫苗苗，，是是长长期期以以来来用用于于传传染染病病预预防的主要生物制品防的主要生物制品。

î1、灭活疫苗（、灭活疫苗（dead Vaccine）） Ø灭灭活活疫疫苗苗又又称称死死疫疫苗苗，，是是指指利利用用加加热热或或甲甲醛醛等等理理化化方方法法将将人人工工大大量量培培养养的的完完整整的的病病原原微微生生物物杀杀死死，，使使其其丧丧失失感感染染性性和和毒性而保持其免疫原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗毒性而保持其免疫原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗Ø疫疫苗苗液液中中除除含含有有灭灭活活的的病病毒毒颗颗粒粒外外，，还还含含有有细细胞胞成成分分和和培培养养病病毒毒时时加加入入的的牛牛血血清清等等蛋蛋白白类类物物质质，，多多次次接接种种疫疫苗苗容容易易发发生过敏反应生过敏反应Ü优点优点Ø制造工艺简单制造工艺简单Ø免疫原性的稳定性高免疫原性的稳定性高Ø易于制备多价疫苗易于制备多价疫苗Ü缺点：缺点：F1））需需要要严严格格的的灭灭活活操操作作，，保保证证疫疫苗苗中中不不含含有有灭灭活活不不完完全的颗粒全的颗粒F2））灭灭活活疫疫苗苗所所提提供供的的免免疫疫力力较较短短暂暂，，为为完完成成免免疫疫程程序序，，需需要要进进行行多多次次接接种种，，由由于于机机体体反反复复接接受受疫疫苗苗中中的的异异性性蛋蛋白白质的刺激，而可能出现不良的过敏反应。

质的刺激，而可能出现不良的过敏反应F3））有有些些灭灭活活疫疫苗苗，，如如早早年年制制备备的的麻麻疹疹灭灭活活疫疫苗苗，，可可使使有有些些受受接接种种者者在在以以后后自自然然接接触触麻麻疹疹病病毒毒时时，，引引起起严严重重的的麻麻疹感染过敏性反应疹感染过敏性反应F4））灭灭活活疫疫苗苗虽虽可可刺刺激激机机体体产产生生IgM和和IgG抗抗体体，，但但有有时时却得不到满意的保护效果却得不到满意的保护效果 î2、减毒活疫苗（、减毒活疫苗（attenuated vaccine））Ø减减毒毒活活疫疫苗苗又又称称弱弱毒毒疫疫苗苗，，是是指指将将微微生生物物的的自自然然强强毒毒株株通通过过物物理理、、化化学学和和生生物物学学的的方方法法，，连连续续传传代代，，使使其其对对原原宿宿主主丧丧失失致致病病力力，，或或只只引引起起亚亚临临床床感感染染，，但但仍仍保保持持良良好好的的免免疫疫原原性性、、遗遗传传特特性性，，用这种毒株制备的疫苗就叫用这种毒株制备的疫苗就叫减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗Ø当前使用的病毒疫苗多数是减毒活疫苗当前使用的病毒疫苗多数是减毒活疫苗Ø活活疫疫苗苗具具有有可可诱诱发发全全面面的的免免疫疫应应答答反反应应（（体体液液免疫和细胞免疫）、免疫力持久等优点。

免疫和细胞免疫）、免疫力持久等优点î常用的减毒方法有以下几种：常用的减毒方法有以下几种：è1）体外减毒）体外减毒      即体外连续传代减毒在异源宿主中连续传代；在单即体外连续传代减毒在异源宿主中连续传代；在单一宿主中反复连续传代一宿主中反复连续传代è2）冷适应筛选）冷适应筛选ü温度可以改变病毒的特性，得到冷适应株温度可以改变病毒的特性，得到冷适应株ü病毒冷适应株常伴有毒力减弱和各种特征性标志病毒冷适应株常伴有毒力减弱和各种特征性标志ü冷适应筛选稳定的减毒突变株是在传统疫苗设计中较早冷适应筛选稳定的减毒突变株是在传统疫苗设计中较早采用的方法，而且也是最为行之有效的思路采用的方法，而且也是最为行之有效的思路  ۩减减毒毒活活疫疫苗苗与与灭灭活活疫疫苗苗各各有有优优缺缺点点前前者者优优于后者۩减减毒毒活活疫疫苗苗可可使使机机体体产产生生亚亚临临床床感感染染，，特特别别当当以以自自然然途途径径，，如如口口服服或或喷喷鼻鼻免免疫疫时时，，可可产产生生广广谱谱的的免免疫疫应应答答，，即即除除循循环环性性抗抗体体IgM和和IgG外外，，在在病病毒毒侵侵入入的的门门户户如如呼呼吸吸道道和和消消化化道也道也可诱生局部抗体可诱生局部抗体IgA。

î3、亚单位疫苗（、亚单位疫苗（subunit vaccine））Ø亚亚单单位位疫疫苗苗是是指指提提取取或或合合成成细细菌菌、、病病毒毒外外壳壳的的特特殊殊蛋蛋白白结结构构，，即即抗抗原原决决定定簇簇制制成成的的疫疫苗苗，，这这类类疫疫苗苗不不是是完完整整的的病病毒毒，，是是病病毒毒的的一一部部分分物物质质，，故故称称亚亚单单位疫苗Ø亚亚单单位位疫疫苗苗仅仅有有几几种种主主要要表表面面蛋蛋白白，，因因而而能能消消除除病病毒毒（（或或细细菌菌））的的许许多多无无关关抗抗原原决决定定簇簇和和粗粗制制或或半半提纯的病毒（或细菌）制剂诱发的不良反应提纯的病毒（或细菌）制剂诱发的不良反应表表 5-6 5-6 灭活疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗三类疫苗的比较灭活疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗三类疫苗的比较 灭活疫苗灭活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗亚单位疫苗制备方法制备方法通过化学或物理方法使病原通过化学或物理方法使病原体失活体失活通过非正常培养选通过非正常培养选择减毒株或无毒株择减毒株或无毒株以化学方法获得病以化学方法获得病原体的某些具有免原体的某些具有免疫原性的成分疫原性的成分免疫机理免疫机理病原体失去毒力但保持免疫病原体失去毒力但保持免疫原性，接种后产生特异抗体原性，接种后产生特异抗体或致敏淋巴细胞或致敏淋巴细胞接种后病原体在体接种后病原体在体内有一定生长繁殖内有一定生长繁殖能力，类似隐性感能力，类似隐性感染，产生细胞、体染，产生细胞、体液和局部免疫液和局部免疫接种后能刺激机体接种后能刺激机体产生特异性免疫产生特异性免疫疫苗稳定性疫苗稳定性相对稳定相对稳定相对不稳定相对不稳定稳定稳定毒力回升毒力回升不可能不可能有可能有可能不可能不可能免疫接种免疫接种多次免疫接种多次免疫接种一般为一次性一般为一次性多次免疫接种多次免疫接种安全性安全性较安全较安全对免疫缺陷者有危对免疫缺陷者有危险险安全性好安全性好常用疫苗常用疫苗乙脑、脊髓灰质炎灭活疫苗乙脑、脊髓灰质炎灭活疫苗麻疹、脊髓灰质炎麻疹、脊髓灰质炎减毒活疫苗减毒活疫苗白喉、破伤风类毒白喉、破伤风类毒素，素，A群脑膜炎球群脑膜炎球菌多糖疫苗菌多糖疫苗è二、新一代病毒疫苗二、新一代病毒疫苗Ø新新一一代代病病毒毒疫疫苗苗（（新新型型疫疫苗苗））主主要要指指利利用用基基因因工程技术研制的疫苗。

工程技术研制的疫苗Ø基基因因工工程程亚亚单单位位疫疫苗苗、、基基因因工工程程载载体体疫疫苗苗、、核核酸酸疫疫苗苗、、基基缺缺失失活活疫疫苗苗，，通通常常也也习习惯惯地地将将遗遗传传重重组组疫疫苗苗、、合合成成肽肽疫疫苗苗和和抗抗独独特特型型抗抗体体疫疫苗苗包包括括在在新型疫苗范畴新型疫苗范畴  1.New Generation vaccine or High-tech Vaccine（（高技术疫苗）高技术疫苗）        ①①基因工程亚单位疫苗（基因工程亚单位疫苗（ gene engineering subunit vaccine)        ②②基因工程载体疫苗基因工程载体疫苗(gene engineering vector vaccine)        ③③核酸疫苗核酸疫苗(nucleic acid vaccine)        ④④基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗(gene deleted live vaccine)        ⑤⑤蛋白工程疫苗蛋白工程疫苗(protein engineering vaccine)  2.遗传重组疫苗遗传重组疫苗(genetic recombinant vaccine)  3.合成肽疫苗合成肽疫苗(synthtic peptide vaccine)  4.抗独特型抗独特型Ab疫苗疫苗(anti-idiotype Ab vaccine)  5.微胶囊可控缓释疫苗微胶囊可控缓释疫苗(controllable  released micro-capsule vaccine)î（一）基因工程疫苗（一）基因工程疫苗 gene engineering vaccineØ基基因因工工程程疫疫苗苗，，也也称称遗遗传传工工程程疫疫苗苗（（genetic engineering vaccine）），，指指使使用用重重组组DNA技技术术克克隆隆并并表表达达保保护护性性抗抗原原基基因因，，利利用用表表达达的的抗抗原原产产物物，，或重组体本身制成的疫苗。

或重组体本身制成的疫苗Ø主主要要包包括括基基因因工工程程亚亚单单位位疫疫苗苗，，基基因因工工程程载载体体疫疫苗苗，，核核酸酸疫疫苗苗，，基基因因缺缺失失活活疫疫苗苗，，及及蛋蛋白白工工程程疫苗疫苗等五种 1 1、、基基因因工工程程亚亚单单位位疫疫苗苗( (gene engineering subunit vaccine) )Ø基基因因工工程程亚亚单单位位疫疫苗苗，，主主要要是是指指将将基基因因工工程程表表达达的蛋白抗原纯化后制成的疫苗的蛋白抗原纯化后制成的疫苗Ø优点：优点：p①①产量高产量高；；p②②纯度高；纯度高；p③③安全性高安全性高 ；；p④④用用于于病病原原体体难难于于培培养养或或有有潜潜在在致致癌癌性性，，或或有有免免疫病理作用的疫苗研究疫病理作用的疫苗研究Ø缺点：缺点：p与传统亚单位疫苗相比与传统亚单位疫苗相比 ，，免疫效果较差免疫效果较差p增强其免疫原性的方法增强其免疫原性的方法：：ü①①调整基因组合使之表达成颗粒性结构调整基因组合使之表达成颗粒性结构 ü②②是在体外加以聚团化，包入脂质体或胶囊微球是在体外加以聚团化，包入脂质体或胶囊微球ü ③③加入有免疫增强作用的化合物作为佐剂（加入有免疫增强作用的化合物作为佐剂（adjuvant）。

2 2、、 基基 因因 工工 程程 载载 体体 疫疫 苗苗 （（ gene  engineering vector vaccine））Ø基基因因工工程程载载体体疫疫苗苗是是指指利利用用微微生生物物做做载载体体，，将将保保护护性性抗抗原原基基因因重重组组到到微微生生物物体体中中，，使使用用能能表表达达保保护护性性抗抗原基因的重组微生物制成的疫苗原基因的重组微生物制成的疫苗Ø优优点点：：疫疫苗苗多多为为活活疫疫苗苗，，重重组组体体用用量量少少，，抗抗原原不不需需纯化，载体本身可发挥佐剂效应增强免疫效果纯化，载体本身可发挥佐剂效应增强免疫效果Ø缺缺点点：：曾曾感感染染过过腺腺病病毒毒或或者者接接种种过过痘痘苗苗的的人人，，对对载载体体微微生生物物已已具具有有免免疫疫力力，，使使之之接接种种后后不不易易繁繁殖殖，，因因而而影响免疫效果影响免疫效果 3、核酸疫苗（、核酸疫苗（nucleic acid vaccine））Ø核酸疫苗或称基因疫苗（核酸疫苗或称基因疫苗（gene vaccine），指使用能够表达抗原的基），指使用能够表达抗原的基因本身，即核酸制成的疫苗因本身，即核酸制成的疫苗。

优点优点：：ü①①易于制备；易于制备； ü②②便于保存；便于保存；ü③③可多次免疫并且容易制成多联多价疫苗可多次免疫并且容易制成多联多价疫苗缺点缺点：：ü①①外源核酸是否会整合到染色体中引起癌变；外源核酸是否会整合到染色体中引起癌变；ü②②能能否否引引起起免免疫疫病病理理作作用用，，如如自自身身抗抗核核酸酸抗抗体体的的产生，免疫耐受等产生，免疫耐受等4、基因缺失活疫苗（、基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine））Ø基因缺失活疫苗使用分子生物学技术去除与毒力有关基因缺失活疫苗使用分子生物学技术去除与毒力有关的基因获得的缺失突变毒株制成的疫苗的基因获得的缺失突变毒株制成的疫苗Ø优点：优点：①①有突变性状明确、稳定；有突变性状明确、稳定；          ②②不易返祖、毒力恢复；不易返祖、毒力恢复；          ③③是研究安全有效的新型疫苗的重要途径是研究安全有效的新型疫苗的重要途径5 5、、蛋蛋白白工工程程疫疫苗苗（（protein  engineering vaccine ））Ø蛋蛋白白工工程程疫疫苗苗是是指指将将抗抗原原基基因因加加以以改改造造，，使使之之发发生生点点突突变变、、插插入入、、缺缺失失、、构构型型改改变变，，甚甚至至进进行行不不同同基基因因或或部部分分结结构构域域的的人人工工组组合合，，以以期期达达到到增增强强其其产产物物的的免免疫疫原原性性，，扩扩大大反反应应谱谱，，去去除除有有害害作作用用或或副副反反应应的的一一类类疫苗。

疫苗（二）遗传重组疫苗（二）遗传重组疫苗 （（genetic recombinant vaccine））Ø遗传重组疫苗是指使用经遗传重组方法（遗传重组疫苗是指使用经遗传重组方法（genetic recombination））获得的重组微生物制成的疫苗获得的重组微生物制成的疫苗Ø通常是将对人体无致病性的弱毒株与强毒株（野通常是将对人体无致病性的弱毒株与强毒株（野毒株）混合感染，弱毒株与野毒株间发生基因组片毒株）混合感染，弱毒株与野毒株间发生基因组片段交换造成重组，然后使用特异方法筛选出对人体段交换造成重组，然后使用特异方法筛选出对人体不致病的但又含有野毒株强免疫原性基因片段的重不致病的但又含有野毒株强免疫原性基因片段的重组毒株 （（三三））合合成成肽肽疫疫苗苗（（Synthetic peptide vaccine））Ø合合成成肽肽疫疫苗苗是是指指使使用用化化学学方方法法合合成成能能够够诱诱发发机机体产生免疫保护的多肽制成的疫苗体产生免疫保护的多肽制成的疫苗Ø优优点点：：①①纯纯度度和和安安全全性性高高；；②②副副作作用用小小；；③③可可长期在常温下保存；长期在常温下保存；Ø缺点：缺点：①①其抗原性单一；其抗原性单一；②②免疫原性弱。

免疫原性弱        因此须用几种合成肽抗原联合使用，还须用因此须用几种合成肽抗原联合使用，还须用多种方法提高合成肽的免疫原性多种方法提高合成肽的免疫原性（四）抗独特型抗体疫苗（四）抗独特型抗体疫苗 （（anti-idiotype vaccine））Ø抗独特型抗体疫苗是指使用与特定抗抗独特型抗体疫苗是指使用与特定抗原的免疫原性相近的抗体（原的免疫原性相近的抗体（ab2））做抗原做抗原制成的疫苗制成的疫苗Ø目前此疫苗尚处于理论性研究阶段目前此疫苗尚处于理论性研究阶段 （五）微胶囊可控缓释疫苗（五）微胶囊可控缓释疫苗(controllable  released micro-capsule vaccine)Ø微胶囊可控缓释疫苗微胶囊可控缓释疫苗，，指使用微胶囊指使用微胶囊技术将特定抗原包裹后制成的疫苗技术将特定抗原包裹后制成的疫苗Ø特点特点①①小于小于10μm的微胶囊在注射部位可被巨噬细胞的微胶囊在注射部位可被巨噬细胞吞噬并携带至淋巴结附近和免疫系统其他部位，吞噬并携带至淋巴结附近和免疫系统其他部位，具有更强的免疫效果具有更强的免疫效果②②大大于于30μm的的微微胶胶囊囊，，更更适适于于做做可可控控缓缓释释。

由由于于微微胶胶囊囊的的保保护护作作用用，，母母体体抗抗体体不不能能使使抗抗原原失失活，可用于婴幼儿免疫接种活，可用于婴幼儿免疫接种③③微微胶胶囊囊在在肠肠道道内内不不受受酸酸或或酶酶的的影影响响，，可可用用于于口服 第三节第三节  基因工程病毒疫苗的开发现状基因工程病毒疫苗的开发现状一、急需研制的基因工程病毒疫苗一、急需研制的基因工程病毒疫苗急需研制的基因工程病毒疫苗主要有十几种急需研制的基因工程病毒疫苗主要有十几种疾病疾病- -预防性疫苗预防性疫苗治疗性疫苗治疗性疫苗艾滋病艾滋病+ +（需要）（需要）+ +乙型肝炎乙型肝炎+ ++ +丙型肝炎丙型肝炎+ ++ +戊型肝炎戊型肝炎+ +- -（不需要）（不需要）EBVEBV肝炎肝炎+ ++ +表表 4-2 4-2 需要研制的基因工程病毒疫苗需要研制的基因工程病毒疫苗人乳头瘤病毒感染人乳头瘤病毒感染（宫颈癌）（宫颈癌）+ ++ +单纯疱疹病毒感染单纯疱疹病毒感染（（ⅠⅠ、、ⅡⅡ型）型）+ ++ +巨细胞病毒感染巨细胞病毒感染+ ++ +呼吸道和细胞病毒呼吸道和细胞病毒感染感染+ +- -轮状病毒感染轮状病毒感染+ +- -登革热病毒感染登革热病毒感染+ +- -埃博拉病毒感染埃博拉病毒感染+ +- -注：注：“+ +”表示需要，表示需要，“- -”表示不表示不需要需要 二、值得使用基因工程技术进行改造的二、值得使用基因工程技术进行改造的传统病毒疫苗传统病毒疫苗Ø对那些免疫保护效果差，或副反应较大，对那些免疫保护效果差，或副反应较大，或成本较高，或使用不方便的传统疫苗，使或成本较高，或使用不方便的传统疫苗，使用基因工程技术对其改造，或用基因工程疫用基因工程技术对其改造，或用基因工程疫苗取而代之，将具有极大的市场前景。

苗取而代之，将具有极大的市场前景传统疫苗传统疫苗可能使用的基因工程疫苗类型可能使用的基因工程疫苗类型流感流感基因缺失活疫苗，遗传重组活疫苗基因缺失活疫苗，遗传重组活疫苗甲型肝炎甲型肝炎重组活疫苗，亚单位疫苗（病毒样颗粒）重组活疫苗，亚单位疫苗（病毒样颗粒）乙型脑炎乙型脑炎基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗水痘水痘重组活疫苗，基因缺失活疫苗重组活疫苗，基因缺失活疫苗麻疹麻疹重组活疫苗，基因工程亚单位疫苗重组活疫苗，基因工程亚单位疫苗黄热黄热重组活疫苗重组活疫苗狂犬（人和兽）狂犬（人和兽）重组活疫苗，亚单位疫苗（病毒样颗粒）重组活疫苗，亚单位疫苗（病毒样颗粒）出血热出血热基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗腺病毒腺病毒遗传重配活疫苗，重组活疫苗遗传重配活疫苗，重组活疫苗轮状病毒轮状病毒亚单位疫苗（病毒样颗粒）亚单位疫苗（病毒样颗粒）联合疫苗联合疫苗重组多价活疫苗，亚单位联合疫苗重组多价活疫苗，亚单位联合疫苗表表5-3 5-3 值得使用基因工程技术进行改造的传统病毒疫苗值得使用基因工程技术进行改造的传统病毒疫苗 三、重要病毒性疾病基因工程疫苗研究进展三、重要病毒性疾病基因工程疫苗研究进展Ø目前，病毒基因工程疫苗主要集中在研制常规技术目前，病毒基因工程疫苗主要集中在研制常规技术不能或很难解决的新疫苗和改造免疫保护效果差，不能或很难解决的新疫苗和改造免疫保护效果差，负反应较大，或成本较高，或使用不方便的传统疫负反应较大，或成本较高，或使用不方便的传统疫苗上，有的疫苗兼有预防和治疗两种功能苗上，有的疫苗兼有预防和治疗两种功能Ø现将我国重要的病毒病基因工程疫苗研究状况概述现将我国重要的病毒病基因工程疫苗研究状况概述如下（参见表如下（参见表5-45-4）。

疫苗及靶抗原疫苗及靶抗原疫苗类型疫苗类型研究开发现状研究开发现状国内国内国外国外1艾滋病毒苗艾滋病毒苗—env.gag.pol.nef. v3亚单位多肽（细胞）亚单位多肽（细胞）亚单位多肽（酵母）亚单位多肽（酵母）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（痘苗）亚单位多肽（痘苗）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（细胞）亚单位多肽（细胞）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗载体活疫苗（（ALVAC））研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究——Ⅱ期期Ⅱ期期Ⅱ期期Ⅰ期期研究研究研究研究Ⅰ期期Ⅰ期期表表5-45-4我国重要病毒病基因工程疫苗研究开发状况我国重要病毒病基因工程疫苗研究开发状况完整病毒颗粒完整病毒颗粒减毒活疫苗（减毒活疫苗（SIV））灭活疫苗（灭活疫苗（SIV））减毒活疫苗（减毒活疫苗（HIV））减毒活疫苗（减毒活疫苗（HLIV））DNA疫苗疫苗————研究研究——研究研究Ⅰ期期Ⅰ期（动物）期（动物）研究研究研究研究Ⅰ期期联合免疫联合免疫多肽多肽+痘病毒痘病毒DNA+痘病毒痘病毒研究研究研究研究Ⅰ期期研究研究2乙肝疫苗乙肝疫苗—S亚单位颗粒（酵母）亚单位颗粒（酵母）亚单位颗粒（亚单位颗粒（CHO））亚单位颗粒（痘苗）亚单位颗粒（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（载体活疫苗（Ad ））亚单位颗粒（植物）亚单位颗粒（植物）DNA疫苗疫苗引进引进生产生产生产生产Ⅰ期期研究研究研究研究研究研究生产生产研究研究研究研究研究研究Ⅰ期期Ⅰ期期研究研究—S2+S 亚单位颗粒（亚单位颗粒（CHO））载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究生产生产研究研究研究研究—S1+S2+S 亚单位颗粒（亚单位颗粒（CHO））亚单位颗粒（酵母）亚单位颗粒（酵母）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究I期期Ⅲ期期研究研究研究研究—Epitop(S1,S2,S) 载体活疫苗（沙门菌）载体活疫苗（沙门菌）  研究研究 I期期—C 亚单位颗粒（大肠）亚单位颗粒（大肠）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究3丙肝疫苗丙肝疫苗——C+E1+E2 亚单位多肽（亚单位多肽（CHO））DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究4戊肝疫苗戊肝疫苗——ORF2,3 亚单位多肽（大肠）亚单位多肽（大肠）亚单位多肽（酵母）亚单位多肽（酵母）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（昆虫）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究5呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒疫苗疫苗—F+G 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫羁（载体活疫羁（Ad4））研究研究研究研究研究研究研究研究—F 亚单位多肽（大肠）亚单位多肽（大肠） 研究研究 Ⅱ期期6巨细胞病毒疫苗巨细胞病毒疫苗——完整病毒颗完整病毒颗粒粒 减毒活疫苗减毒活疫苗（（Towne））基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗————II期期研究研究7单纯疱疹病毒疫苗单纯疱疹病毒疫苗——完整病毒颗粒完整病毒颗粒 基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗 ——I期期 ——gD,gB 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究8登革热病毒疫苗登革热病毒疫苗 ——Dengnel,2,3,4E,Prem-E,NS1,NS2 减毒活疫苗减毒活疫苗 分子减毒活疫苗分子减毒活疫苗亚单位多肽（痘苗）亚单位多肽（痘苗）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（原核）亚单位多肽（原核）亚单位颗粒（痘苗）亚单位颗粒（痘苗）亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（昆虫）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究 研究研究 研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究Ⅱ期期研究研究研究研究 研究研究 研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究9乳头瘤病毒乳头瘤病毒疫苗疫苗——L1、、L2、、E6、、E7 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）亚单位颗粒（酵母）亚单位颗粒（酵母）亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（原核）亚单位颗粒（原核）DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究II期期研究研究研究研究——E6、、E7 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗） 研究研究 I期期10EB病毒疫苗病毒疫苗——gp350,LMP1,LM2,C —Epitop载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）业单位多肽（合成）业单位多肽（合成）亚单位多肽（亚单位多肽（CHO））亚单位多肽（昆虫）亚单位多肽（昆虫）免疫细胞苗（树突）免疫细胞苗（树突）DNA疫苗疫苗I期期研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究11甲肝疫苗甲肝疫苗——ORF 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（昆虫）I期期研究研究研究研究研究研究——VP1，，VP3 亚单位多肽（大肠）亚单位多肽（大肠）载体活疫苗（载体活疫苗（polio））研究研究研究研究研究研究研究研究12麻疹疫苗麻疹疫苗    —HA+F 载体活疫苗载体活疫苗（（ALVAC））载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）DNA疫苗疫苗——I期期研究研究I期期研究研究研究研究—完整病毒完整病毒 基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗 研究研究研究研究 13出血热疫苗出血热疫苗  —G1，，G2，， NP载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（载体活疫苗（Ad））亚单位颗粒（痘苗）亚单位颗粒（痘苗）亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（昆虫）研究研究研究研究研究研究研究研究I期期——研究研究研究研究14小儿轮状病毒疫苗小儿轮状病毒疫苗—人人/猴病毒重组猴病毒重组减毒活疫苗（重配）减毒活疫苗（重配） ——IV期期—人人/牛病毒重组牛病毒重组减毒活疫苗（重配）减毒活疫苗（重配）——III期期—人人/羊病毒重组羊病毒重组减毒活疫苗（重配）减毒活疫苗（重配）IV期期———VP4，，VP7，，VP6 亚单位颗粒（昆虫）亚单位颗粒（昆虫）载体活疫苗（原核）载体活疫苗（原核）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（载体活疫苗（Ad））研究研究——研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究研究15狂犬病疫苗狂犬病疫苗—外膜糖蛋白外膜糖蛋白载体活疫苗（痘病毒）载体活疫苗（痘病毒）研究研究IV期（动物）期（动物）载体活疫苗（载体活疫苗（Ad））研究研究研究研究多价疫苗多价疫苗—DTP+HBV，，DTP+IVP，，DTP+IVP+HBVDTP+HBV+HAV联合疫苗（传统技术联合疫苗（传统技术+基因工程）基因工程）研究研究II期期16—甲肝、乙肝甲肝、乙肝、麻疹、、麻疹、RSV 载体活疫苗（痘苗）载体活疫苗（痘苗）多价多价DNA疫苗疫苗研究研究研究研究研究研究研究研究艾滋病（艾滋病（AIDS）疫苗）疫苗HIVHIV共有共有9 9个基因：个基因：3 3个结构基因：个结构基因：gaggag、、polpol、、envenv；；6 6个调节基因：个调节基因：tattat、、revrev、、nefnef、、vifvif、、vpu/vpxvpu/vpx、、vprvpr1 1、艾滋病（、艾滋病（AIDSAIDS））疫苗疫苗（（1 1）研究的三阶段：）研究的三阶段：Ø①①最早使用其膜抗原最早使用其膜抗原gp120（（Glucose protein 120））Ø②②膜抗原加其他能诱发细胞免疫抗原的多抗原疫苗膜抗原加其他能诱发细胞免疫抗原的多抗原疫苗的复杂设计；的复杂设计；Ø③③在泰国使用在泰国使用gp120gp120亚单位疫苗数千人免疫接苗无效亚单位疫苗数千人免疫接苗无效后，改为先用重组痘病毒后，改为先用重组痘病毒ALVAALVA（（疫苗注射后），再使疫苗注射后），再使用用gp120gp120亚单位疫苗加强，亚单位疫苗加强，80%80%以上的人产生了特异的以上的人产生了特异的体液和细胞免疫反应。

体液和细胞免疫反应（（2 2））HIVHIV感染特点：感染特点： ① ①HIVHIV直接感染破坏免疫细胞；直接感染破坏免疫细胞； ② ②HIVHIV变异极快变异极快（（（（3 3 3 3））））AIDSAIDSAIDSAIDS疫苗研究方向：疫苗研究方向：疫苗研究方向：疫苗研究方向： ① ① ① ①能诱发有效的中和抗体，阻止或大部能诱发有效的中和抗体，阻止或大部能诱发有效的中和抗体，阻止或大部能诱发有效的中和抗体，阻止或大部阻止阻止阻止阻止HIVHIVHIVHIV感染免疫细胞；感染免疫细胞；感染免疫细胞；感染免疫细胞； ② ② ② ②能诱发强细胞免疫；能诱发强细胞免疫；能诱发强细胞免疫；能诱发强细胞免疫； ③ ③ ③ ③中和抗体屏障被部分突破时能有效清中和抗体屏障被部分突破时能有效清中和抗体屏障被部分突破时能有效清中和抗体屏障被部分突破时能有效清除被感染细胞，是研究中应统筹考虑的除被感染细胞，是研究中应统筹考虑的除被感染细胞，是研究中应统筹考虑的除被感染细胞，是研究中应统筹考虑的。

2 2、乙型肝炎病毒（、乙型肝炎病毒（HBVHBV））疫苗疫苗乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒（（HEPATITIS B VIRUS）） 形态结构：乙肝患者血清中发现形态结构：乙肝患者血清中发现3种相关颗粒种相关颗粒¤小球形颗粒：小球形颗粒：HBsAg                  不不含核酸含核酸¤管形颗粒：小球形颗粒串连成管形颗粒：小球形颗粒串连成  ¤大球形颗粒：为完整的病毒颗粒，具传染性大球形颗粒：为完整的病毒颗粒，具传染性（（DANE颗粒）颗粒）:DNA、、逆转录酶逆转录酶HBV HBVHBV形态结构形态结构大球形颗粒大球形颗粒（（Dane颗粒）颗粒）小球形颗粒小球形颗粒管形颗粒管形颗粒HBV的小球形颗粒HBV的管形颗粒Dane 颗粒HBV的抗原组成l表面抗原表面抗原HBsAgHBsAgl核心抗原核心抗原HBcAgHBcAg le e抗原抗原HBeAgHBeAg表面抗原HBsAgl存在于三型颗粒中存在于三型颗粒中l是是HBV感染的主要标志感染的主要标志l分亚型（分亚型（a, d/y, w/r, adr））l产生抗产生抗-HBs具有免疫保护作用具有免疫保护作用疫苗接种成功疫苗接种成功HBcAg乙乙  肝肝●HBcAg主要存在于主要存在于HBV感染的肝细胞内或感染的肝细胞内或DANE颗粒颗粒    核心中，到血液中即被降解为核心中，到血液中即被降解为HBeAg。

一般血清学方法检测不到一般血清学方法检测不到HBcAg，，而只能检测到抗而只能检测到抗-HBc（（6）抗）抗-HBc抗抗HBc-IgM：是：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志近期感染或慢性感染者病毒活动的标志,病毒在复制病毒在复制抗抗HBc-IgG：：凡凡“有过有过” HBV感染者均可阳性感染者均可阳性HBcAg的免疫原性最强的免疫原性最强持续时间：持续时间：6～～18个月个月可终身阳性可终身阳性e抗原抗原HBeAgl仅存在于仅存在于DaneDane颗粒中颗粒中l游离存在于血液中游离存在于血液中l为病毒复制及为病毒复制及强传染性强传染性的指标的指标l产生抗－产生抗－HBeHBe，，是预后良好的征象是预后良好的征象乙肝血源性疫苗，乙肝血源性疫苗，基因工程疫苗（酵母系统、哺乳动物细胞系统）基因工程疫苗（酵母系统、哺乳动物细胞系统）（（1）目前存在的问题：）目前存在的问题：人群中约人群中约10%左右对左右对现有乙肝疫苗（仅含现有乙肝疫苗（仅含S抗原的疫苗）无反应；抗原的疫苗）无反应； （（2）研制方向：）研制方向：使用含前使用含前S（（主要是前主要是前SI））的的新一代乙肝基因工程疫苗，可使对现有新一代乙肝基因工程疫苗，可使对现有S乙肝乙肝疫苗无反应的人群产生良好的免疫反应。

目前，疫苗无反应的人群产生良好的免疫反应目前，含前含前S的疫苗，新佐剂乙肝疫苗，乙肝抗原抗的疫苗，新佐剂乙肝疫苗，乙肝抗原抗体复合物疫苗，治疗性乙肝研究的热点体复合物疫苗，治疗性乙肝研究的热点（（3 3）丙型肝炎病毒（）丙型肝炎病毒（HCVHCV））疫苗疫苗Ø 丙型肝炎感染约占人群丙型肝炎感染约占人群2%2%左右，也就是有左右，也就是有20002000多万感染者，大部分都会转为慢性，并导致肝硬多万感染者，大部分都会转为慢性，并导致肝硬化和肝癌，危害远大于乙肝化和肝癌，危害远大于乙肝Ø研究方向研究方向；；①①多数实验集中于使用病毒外膜蛋多数实验集中于使用病毒外膜蛋白白E1+E2E1+E2研制病毒样颗粒的亚单位疫苗和研制病毒样颗粒的亚单位疫苗和②②使用载使用载体进行重组活疫苗研究体进行重组活疫苗研究③③由于丙肝病毒变异快，由于丙肝病毒变异快，极易冲破已有中和抗体的屏障，极易冲破已有中和抗体的屏障，④④选择变异不大选择变异不大且能诱发细胞免疫的抗原是目前研究的重要的方且能诱发细胞免疫的抗原是目前研究的重要的方向之一4、戊型肝炎病毒（、戊型肝炎病毒（HEV））疫苗疫苗Ø戊型肝炎病毒属杯状病毒科，单股正链戊型肝炎病毒属杯状病毒科，单股正链RNA病毒，基因组全长约病毒，基因组全长约7.4kb。

经消化道传播，经消化道传播，暴发流行和散发两种，戊型肝炎的临床表现比暴发流行和散发两种，戊型肝炎的临床表现比甲型肝炎重甲型肝炎重Ø 选择基因工程的手段研制戊型肝炎疫苗唯一选择基因工程的手段研制戊型肝炎疫苗唯一的方法基因工程疫苗主要采用原核细胞、酵的方法基因工程疫苗主要采用原核细胞、酵母细胞和昆虫细胞三种表达体系母细胞和昆虫细胞三种表达体系  Ø 我我国国目目前前以以原原核核细细胞胞和和酵酵母母细细胞胞对对戊戊型型肝肝炎炎病病毒毒结结构构蛋蛋白白均均表表达达成成功功（（张张明明程程，，1999））抗抗原原性性在在世世界界范范围围内内稳稳定定，，表表明明戊戊型型肝肝炎炎病病毒毒基基因因工工程程疫疫苗苗将将对对该该病病的的预预防防具具有有良良好的效果好的效果 包括正粘病毒科包括正粘病毒科    流行性感冒病毒流行性感冒病毒        副粘病毒科副粘病毒科    呼吸道合胞病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒麻疹病毒        其他呼吸道病毒其他呼吸道病毒   腺病毒腺病毒主要以主要以呼吸道呼吸道为侵入门户为侵入门户5、呼吸道感染病毒对粘对粘蛋白具有特殊亲和力的蛋白具有特殊亲和力的一类一类RNARNA病毒病毒l1918-1919第一次世界大战期间，发生一次大流第一次世界大战期间，发生一次大流行，当时全世界行，当时全世界20亿人口，亿人口，10亿被感染亿被感染l死亡人数死亡人数2000万，超过一战中死亡人数的总和万，超过一战中死亡人数的总和最严重的一次流行l20世纪5次大流行：l1900、19181918、、1957、1968、1977 核心核心：负单股RNA、7~8个节段（易变异原因）内层：核衣壳 核蛋白（NP） RNA多聚酶 中层：内膜蛋白（M蛋白）外层：包膜，双层脂质 其上有刺突：血凝素其上有刺突：血凝素HA                                    神经氨酸酶神经氨酸酶NA流感病毒的结构组成流感病毒的结构组成生物学性状生物学性状（二）抗原性与分型l1、内部抗原（核蛋白和内膜蛋白核蛋白和内膜蛋白）l抗原性稳定，分甲A、乙B、丙C三型 l2、表面抗原： HA、NA 分亚型(subtype)依据 易变异生物学性状生物学性状流感病毒的表示方法流感病毒的表示方法A / Bangkok / 1 /79 (H3N2)最先分离最先分离的地区的地区最先分离的最先分离的日期日期抗原抗原（三）变异性与流感流行抗原性易变异是流感V最突出的特性最突出的特性 1、抗原漂移antigen drift ：抗原变异幅度小，属于量变，中小型流行，每年有发生。

l变异机理：编码血凝素基因发生一系列点突变，（某一核苷酸的碱基发生改变）导致氨基酸序列改变生物学性状生物学性状2 2、抗原性转变、抗原性转变antigen shift antigen shift ：：变异幅度大，质变，大流变异幅度大，质变，大流行每10-4010-40年出现一次年出现一次 变异机理：基因重组变异机理：基因重组( (交换核酸片断）交换核酸片断） 生物学性状生物学性状 5.5.呼吸道合胞病毒（呼吸道合胞病毒（RSV, RSV, Respiratory Respiratory syncytialsyncytial virus virus））疫疫苗苗 Ø呼吸道合胞病毒属单股副链呼吸道合胞病毒属单股副链RNARNA病毒，是病毒，是引起婴幼儿肺炎的主要病因引起婴幼儿肺炎的主要病因 RSVRSV保护性保护性抗原主要是其糖蛋白抗原主要是其糖蛋白F F和和G G，，高度糖化蛋白，高度糖化蛋白，抗原结构复杂，属结构依赖性抗原，产生抗原结构复杂，属结构依赖性抗原，产生中和抗体的能力都很差，给研制中和抗体的能力都很差，给研制RSVRSV蛋白蛋白亚单位疫苗带来了一定困难。

亚单位疫苗带来了一定困难 Ø研制方向：研制方向： 目前研制的目前研制的高度减毒的非复制型载体高度减毒的非复制型载体是研制是研制该疫苗的重要途径；该疫苗的重要途径； 制备减毒活疫苗是制备减毒活疫苗是RSVRSV疫苗研制的另一个重疫苗研制的另一个重要途径要途径; ; 负链负链RNARNA病毒病毒cDNAcDNA转染技术的成功给使用现转染技术的成功给使用现代分子生物学技术制备代分子生物学技术制备RSVRSV的分子减毒活疫苗带的分子减毒活疫苗带来了希望来了希望，也是目前，也是目前RSVRSV疫苗研制重要途径疫苗研制重要途径6、人巨细胞病毒（、人巨细胞病毒（HMV））疫苗疫苗 （（1）危害：）危害：    HMV 属疱疹病毒科属疱疹病毒科 ，通常为隐性感染，无，通常为隐性感染，无明显临床症状然而明显临床症状然而 HMV的潜伏感染将对人体的潜伏感染将对人体健康造成极大威胁健康造成极大威胁2）问题）问题：：    该疫苗株虽能诱发体液和细胞免疫，但保护该疫苗株虽能诱发体液和细胞免疫，但保护作用不强，且其潜在的致癌性，以及尚未能最作用不强，且其潜在的致癌性，以及尚未能最终排除的潜伏感染性，使该类活疫苗尚未能广终排除的潜伏感染性，使该类活疫苗尚未能广泛使用。

泛使用（（3 3）研制方向：）研制方向： 目目前前使使用用分分子子生生物物学学技技术术，，有有目目的的地地去去除除与与与与毒毒力力、、潜潜伏伏及及肿肿瘤瘤相相关关基基因因的的分分子子减减毒毒疫疫苗苗株株正正在在研研制制中中基基因因工工程程技技术术表表达达的的gBgB做做亚亚单单位位疫疫苗苗或或重重组组活活疫疫苗苗的的研研究究已已成成为为目目前前HMVHMV疫苗研究的一个重要方向疫苗研究的一个重要方向7、单纯疱疹病毒（、单纯疱疹病毒（HSV））疫苗疫苗（（1）危害：）危害：单纯疱疹病毒有两种类型（单纯疱疹病毒有两种类型（HSVI和和HSVII），），在人群中感染相当广泛在人群中感染相当广泛ØHSV I人群感染率高到人群感染率高到50%-90%，多为隐性潜，多为隐性潜伏性感染母婴传播中疱疹性角膜炎视力障碍新伏性感染母婴传播中疱疹性角膜炎视力障碍新生儿死亡率高达生儿死亡率高达60%在病毒性脑炎中，在病毒性脑炎中，HSV I型型感染引起的占感染引起的占10%ØHSV II主要经过性传播，病毒检出率可达主要经过性传播，病毒检出率可达5%-12%HSV II感染是宫颈癌的重要诱因之一。

感染是宫颈癌的重要诱因之一（（2）方向：）方向： 病病毒毒糖糖蛋蛋白白gD和和gB是是主主要要的的保保护护性性抗抗原原，，与与gC、、gE、、gI联联合合使使用用可可诱诱生生体体液液和和细细胞胞免免疫疫，，在在动动物物实实验验中中，，HSV II  gD 的的核核酸酸疫疫苗苗可可以以保保护护动动物物免免受受感感染染及及随随后后的的潜潜伏伏感感染染，，这这些些研研究究为单纯疱疹病毒疫苗的研究提供了有力的证据为单纯疱疹病毒疫苗的研究提供了有力的证据 8、登革热病毒疫苗（、登革热病毒疫苗（Dengue fever  virus vaccine））（（1）危害：）危害：登革热病毒属黄病毒科，为登革热病毒属黄病毒科，为单股正链单股正链RNA病毒，有病毒，有4个血清型，蚊个血清型，蚊子叮咬传播给人，在我国南方热带亚热子叮咬传播给人，在我国南方热带亚热带地区发生过多次登革热流行带地区发生过多次登革热流行（（2）方向：）方向： ①①通通过过表表达达prM-E形形成成病病毒毒样样颗颗粒粒的的亚亚单单位位疫疫苗苗显显示示了了较较好好安安全全性性和和免免疫疫保保护护性性，，是该疫苗研究的重要方向。

是该疫苗研究的重要方向  ②②使使用用该该病病毒毒感感染染性性cDNA进进行行的的分分子子减减毒毒活活疫疫及及多多种种亚亚型型嵌嵌合合的的减减毒毒活活疫疫苗苗研研究究也也取得了较好效果，是另一个重要途径取得了较好效果，是另一个重要途径 9、人乳头瘤病毒（、人乳头瘤病毒（Human papilloma virus，，HPV））疫苗疫苗Ø人乳头瘤病毒是环型双链人乳头瘤病毒是环型双链dsDNA病毒，其中与宫颈癌密切相关病毒，其中与宫颈癌密切相关的有的有HPV16、、18、、33、、58等亚型外壳蛋白等亚型外壳蛋白L1和和L2能诱发机体能诱发机体产生体液和细胞免疫，预防乳头瘤病毒感染；产生体液和细胞免疫，预防乳头瘤病毒感染；E6和和E7是与细胞是与细胞转化有关的蛋白，表达转化有关的蛋白，表达E6和和E7的重组痘病毒疫苗能有效阻止的重组痘病毒疫苗能有效阻止HPV阳性的宫颈癌细胞生长和转移表达阳性的宫颈癌细胞生长和转移表达HPV16和和HPV18两型两型E6和和E7的重组痘苗病毒已进行了小量人体观察，证明产生了部的重组痘苗病毒已进行了小量人体观察，证明产生了部分抑制肿瘤生长的结果（分抑制肿瘤生长的结果（1996）。

L1和和L2可在细菌、酵母及痘可在细菌、酵母及痘苗病毒载体中很好表达，并形成病毒样颗粒，有很好的安全性苗病毒载体中很好表达，并形成病毒样颗粒，有很好的安全性和免疫效果治疗性疫苗以和免疫效果治疗性疫苗以E6和和E7为主，加上为主，加上L1和和L2可增强治可增强治疗性疫苗免疫效果疗性疫苗免疫效果10、、Epstein-Barr病毒（病毒（EB）疫苗）疫苗   （（1）危害：）危害：EB病毒为疱疹病毒科，嗜淋病毒为疱疹病毒科，嗜淋巴细胞病巴细胞病 毒属，感染广泛，毒属，感染广泛，90%以上成以上成人都感染过此病毒人都感染过此病毒     （（2）方向：）方向： ①①阻断其原发感染；阻断其原发感染；                           ②②清除鼻咽癌细胞清除鼻咽癌细胞 （（3）方法：）方法：Ø前前者者主主要要以以EBV的的MA（（如如gp350））为为免免疫疫原原，，gp350亚亚单单位位疫疫苗苗和和表表达达gp350的的重重组组痘痘苗病毒活疫苗显示了一定抗瘤作用；苗病毒活疫苗显示了一定抗瘤作用；Ø后后者者主主要要以以EBV的的潜潜伏伏膜膜蛋蛋白白LMP1和和LMP2为为免免疫疫原原，，进进行行了了多多肽肽、、重重组组活活疫疫苗苗、、DNA疫苗免疫细胞疫苗等多种尝试。

疫苗免疫细胞疫苗等多种尝试11、埃博拉病毒（、埃博拉病毒（EBV）疫苗）疫苗vaccine）） 埃博拉病毒是单股负链埃博拉病毒是单股负链RNA病毒，属丝病毒，属丝状病毒，致死率极高致病机制尚不清楚，状病毒，致死率极高致病机制尚不清楚，曾试用过灭活疫苗，效果不好，减毒疫苗存曾试用过灭活疫苗，效果不好，减毒疫苗存在危险性，至今尚未成功在危险性，至今尚未成功  第四节第四节  我国基因工程病毒疫苗的开发战略研究我国基因工程病毒疫苗的开发战略研究（（Development strategy  of gene engineering vaccine in china)一、首先要明确基因工程病毒疫苗在整个病毒疫苗研究开一、首先要明确基因工程病毒疫苗在整个病毒疫苗研究开发中的地位和任务发中的地位和任务(Status and task)     1  主要常规技术不能或很难解决的新疫苗主要常规技术不能或很难解决的新疫苗         (New generation vaccine)         ①①不能或难于培养的病原体；不能或难于培养的病原体；        ②② 有潜在致癌性或免疫病理作用的病原体。

有潜在致癌性或免疫病理作用的病原体2 2、、传传统统疫疫苗苗的的改改造造（（(Reconstruction  of traditional vaccine）） 主主要要针针对对免免疫疫效效果果差差，，负负反反应应大大，，成成本本较较高高和和使使用用不方便的传统疫苗进行改造（如流感、乙脑等）不方便的传统疫苗进行改造（如流感、乙脑等）3 3、加强治疗性疫苗研究、加强治疗性疫苗研究 （（Intensification of cure vaccine research) 近近年年来来，，使使用用疫疫苗苗进进行行疾疾病病治治疗疗的的研研究究发发展展迅迅速速，，对对引引起起慢慢性性或或持持续续性性感感染染或或与与诱诱发发肿肿瘤瘤十十分分相相关的病毒病，治疗性疫苗的研究将具有重要性关的病毒病，治疗性疫苗的研究将具有重要性 4 4、发展多价疫苗、发展多价疫苗 多价疫苗成本低，免疫程序简单，是疫多价疫苗成本低，免疫程序简单，是疫苗研究的发展方向苗研究的发展方向其发展方向为：其发展方向为： ①①使使用用基基因因工工程程技技术术对对传传统统疫疫苗苗进进行行改改造造，，获得联合疫苗；获得联合疫苗； ②②发发展展具具有有高高导导入入、、高高表表达达、、强强免免疫疫、、可可加加强的新型载体。

强的新型载体二、目标的选择要以社会和市二、目标的选择要以社会和市场需求为导向场需求为导向 Ø1 1、研制预防我国严重病毒病的疫苗、研制预防我国严重病毒病的疫苗放在重点位置放在重点位置Ø2 2、大力发展有市场前景新型疫苗、大力发展有市场前景新型疫苗  三、加强新型疫苗的基础研究三、加强新型疫苗的基础研究 1 1、加强疾病免疫保护机制的研究、加强疾病免疫保护机制的研究（（Intensify the research of immunity protection mechanism））(1)(1)选取病原体的某些抗原或某些抗原表位，或删除选取病原体的某些抗原或某些抗原表位，或删除某些无用甚至有害的组分而构成的，因而必须了解某些无用甚至有害的组分而构成的，因而必须了解这些抗原、表位或组分在病原体致病和免疫中的作这些抗原、表位或组分在病原体致病和免疫中的作用和机体对它们的应答用和机体对它们的应答(2)(2)一一些些发发病病和和免免疫疫机机制制比比较较简简单单的的疾疾病病已已用用常常规规疫疫苗苗解解决决了了，，留留下下的的是是一一些些比比较较复复杂杂和和较较难难解解决决的的疾疾病病或或问问题题，，例例如如呼呼吸吸道道、、肠肠道道和和生生殖殖系系统统黏黏膜膜感感染染，，其其病病原原体体常常多多型型善善变变；；易易于于产产生生持持续续感感染染基基因因整整合合的的病病毒毒；；免免疫疫病病理理机机制制不不清清的的病病毒毒；；病病原原体体结结构构复复杂杂，，发发育育阶阶段段多多，，免免疫疫保保护护作作用用不不强强；；常常规规疫疫苗苗由由于于反反应应大大，，效效果果差差或或引引起起个个别别严严重重并并发发症症，，需用新型疫苗来代替。

需用新型疫苗来代替 2 2、加强新型疫苗的免疫保护机制的研究、加强新型疫苗的免疫保护机制的研究（（Intensify the research of immunity protection mechanism of novel vaccine））Ø新型疫苗抗原的免疫保护效果是新型疫苗研究的首新型疫苗抗原的免疫保护效果是新型疫苗研究的首要问题Ø活疫苗（包括基因工程活疫苗）最近似地模拟了感活疫苗（包括基因工程活疫苗）最近似地模拟了感染后免疫，因而基因工程多肽疫苗和合成寡肽往往是染后免疫，因而基因工程多肽疫苗和合成寡肽往往是用单一或少数几种保护性抗原，甚至单一个主要抗原用单一或少数几种保护性抗原，甚至单一个主要抗原表位代替完整的菌体或病毒颗粒表位代替完整的菌体或病毒颗粒 产生的两个问题：产生的两个问题： 第第一一，，分分子子越越小小，，其其免免疫疫原原性性越越弱弱因因此此多多肽肽疫疫苗苗常常需需要要用用强强有有力力的的佐佐剂剂，，以以增增强强其其免免疫疫原原性性，，合合成成寡寡肽肽则则除除了了强强佐佐剂剂以以外外，，还还要要求偶联于一种载体蛋白上求偶联于一种载体蛋白上。

第第二二，，产产生生的的免免疫疫仅仅针针对对一一种种抗抗原原，，甚甚至至一一个个抗抗原原表表位位，，在在免免疫疫的的综综合合性性方方面面就就与与感感染染后后免免疫疫相相差差甚甚远远，，其其有有效效保保护护程程度度和和时时间间还还需需通过实践加以检验通过实践加以检验 Ø 基因工程疫苗类型和表达系统的选择对获得基因工程疫苗类型和表达系统的选择对获得有效的免疫保护常用关键性意义有效的免疫保护常用关键性意义Ø新型疫苗的作用方式对机体的免疫系统产生新型疫苗的作用方式对机体的免疫系统产生重要影响任何疫苗的作用机体的方式都不会重要影响任何疫苗的作用机体的方式都不会与病原自然作用方式完全相同，因此必然产生与病原自然作用方式完全相同，因此必然产生新的免疫特点在载体疫苗，特别是核酸疫苗新的免疫特点在载体疫苗，特别是核酸疫苗中，这个问题尤为明显在甲型流感的自然感中，这个问题尤为明显在甲型流感的自然感染中，不同亚型间的共同抗原核蛋白无中和活染中，不同亚型间的共同抗原核蛋白无中和活性，也不能产生亚型间交叉保护性，也不能产生亚型间交叉保护3、、提提高高新新型型疫疫苗苗免免疫疫效效果果(Enhance the immune effect of new vaccine)Ø基基因因工工程程多多肽肽或或寡寡肽肽疫疫苗苗成成败败的的关关键键是是如如何何克克服服免免疫疫原原性性弱弱、、免免疫疫综综合合性性差差的的问问题。

题（（1）多抗原表达（）多抗原表达（Multi-antigen expression)Ø新型疫苗的一个趋向是应用二个以上新型疫苗的一个趋向是应用二个以上抗原p第一类都是表面抗原（第一类都是表面抗原（2种以上）；种以上）；p第二类是同时用表面与内部抗原诱生第二类是同时用表面与内部抗原诱生中和抗体；第三类是用表面抗原与非结中和抗体；第三类是用表面抗原与非结构蛋白（（2）颗粒性抗原）颗粒性抗原(Granular antigen)①①在在体体外外将将多多肽肽聚聚团团化化可可形形成成100nm左左右右颗颗粒粒，，如如加加入入皂皂角角糖糖苷苷（（Quil A））可可形形成成“免免疫疫 刺刺 激激 复复 合合 物物 ”（（ Immunostimulating complex，，ISCOM）；）；②②将抗原包入脂质体内可形成免疫脂质体将抗原包入脂质体内可形成免疫脂质体  ③③应用基因工程或化学交联方法将应用基因工程或化学交联方法将B细胞表位结细胞表位结合到合到HbsAg,核心核心Ag或轮状病毒核心表面，以增强或轮状病毒核心表面，以增强免疫原性，特别是免疫原性，特别是HbcAg具有具有T细胞依赖性和非细胞依赖性和非依赖性免疫作用，是较为理想的颗粒型载体。

依赖性免疫作用，是较为理想的颗粒型载体④④有些病原结构基因的表达可产生不含核酸的病有些病原结构基因的表达可产生不含核酸的病毒样颗粒，人类细小病毒毒样颗粒，人类细小病毒B19株的壳蛋白可形成株的壳蛋白可形成空心外壳；在痘苗中同时表达空心外壳；在痘苗中同时表达HIV的的gag和和env基基因可形成类似病毒的颗粒因可形成类似病毒的颗粒（（3）蛋白质工程抗原）蛋白质工程抗原   ①①多个寡肽串联成多个寡肽串联成“鸡尾酒式疫苗鸡尾酒式疫苗”是首先针对是首先针对恶性疟原虫而提出的，是将多个不同的恶性疟原虫而提出的，是将多个不同的B细胞表位细胞表位和多个和多个TH细胞表位串联起来，同时删除可能存在细胞表位串联起来，同时删除可能存在的抑制性的抑制性T细胞（细胞（suppressor T cell，，Ts））表位②②另一个也属于蛋白质工程范畴，是将本来在细另一个也属于蛋白质工程范畴，是将本来在细胞内表达的抗原加以改造，使之表达于细胞膜表胞内表达的抗原加以改造，使之表达于细胞膜表面，以增强其免疫原性此外，将面，以增强其免疫原性此外，将RSV的两个表的两个表面抗原面抗原G和和F组合成一个蛋白质的研究也相当深入，组合成一个蛋白质的研究也相当深入，组合似不影响到它们各自的抗原特异性。

组合似不影响到它们各自的抗原特异性（（4）载体疫苗系统）载体疫苗系统(Vector vaccine system) ①①基于病毒的载体活疫苗；基于病毒的载体活疫苗； ②②基于质粒基于质粒DNA的非病毒载体疫苗的非病毒载体疫苗        前者方向是前者方向是“非复制型非复制型”载体，需克服不安载体，需克服不安全性和不易加强使用的缺点；后者方向是改进导全性和不易加强使用的缺点；后者方向是改进导入效率、提高抗原表达、增强免疫反应强度、克入效率、提高抗原表达、增强免疫反应强度、克服潜在的致癌及免疫病理作用服潜在的致癌及免疫病理作用其优点是其优点是：： 廉价、高效、易于组合成多价疫苗，是新型廉价、高效、易于组合成多价疫苗，是新型疫苗的重要组成部分疫苗的重要组成部分其缺点是：其缺点是：①①尽管用于载体研究的这些微生物都是疫苗株，尽管用于载体研究的这些微生物都是疫苗株，但做为活疫苗载体，可能产生接种副反应但做为活疫苗载体，可能产生接种副反应②②机体内针对载体的抗体，不论是免疫前存在的，机体内针对载体的抗体，不论是免疫前存在的，或是免疫后产生的，都会对相应载体疫苗的再次或是免疫后产生的，都会对相应载体疫苗的再次使用产生一定影响，从而影响其免疫效果。

使用产生一定影响，从而影响其免疫效果（（5）免疫佐剂与联合免疫）免疫佐剂与联合免疫 ①①强有力的合成佐剂大都是胞壁二肽的衍化物，强有力的合成佐剂大都是胞壁二肽的衍化物，如如Syntex佐剂对多肽和寡肽都有很强的佐剂作用，佐剂对多肽和寡肽都有很强的佐剂作用，能诱生抗体和细胞介导免疫，甚至超过了福氏完能诱生抗体和细胞介导免疫，甚至超过了福氏完全佐剂，且无热源性，不引起肉芽肿、关节炎或全佐剂，且无热源性，不引起肉芽肿、关节炎或其他组织损害其他组织损害 在用在用HCG- 的的37肽作为避孕疫苗肽作为避孕疫苗进行人体实验时使用了这类佐剂进行人体实验时使用了这类佐剂②②淋巴因子如胸腺肽、白细胞介素淋巴因子如胸腺肽、白细胞介素-2、、γ-干扰素干扰素等均曾用于免疫增强目的等均曾用于免疫增强目的IL-2似乎只对某些抗似乎只对某些抗原有佐剂作用，且须每天注射原有佐剂作用，且须每天注射  ③③缓慢释放抗原的微胶囊（缓慢释放抗原的微胶囊（microsphere），），虽不虽不是佐剂，却能增强免疫效果例如丙交酯与乙交是佐剂，却能增强免疫效果例如丙交酯与乙交酯共聚物，颗粒可达至酯共聚物，颗粒可达至3mm，，小至小至1μm。

④④Al（（OH））3依然独占鳌头佐剂不但是亚单位依然独占鳌头佐剂不但是亚单位疫苗成功的关键，而且还可通过选择不同的佐剂疫苗成功的关键，而且还可通过选择不同的佐剂改变疫苗免疫反应类型，增加疫苗用途，提高新改变疫苗免疫反应类型，增加疫苗用途，提高新的免疫接种途径的免疫接种途径    不同类型疫苗联合应用，以达互补效果，是近不同类型疫苗联合应用，以达互补效果，是近年一些难度较大疫苗研制的新途径年一些难度较大疫苗研制的新途径。