过柱子的经验总结 2.docx

精品名师归纳总结过柱子的体会总结单一溶剂的极性大小次序为 ：石油醚（小） →环己烷 →四氯化碳 →三氯乙烯 →苯→甲苯→二氯甲烷 → 氯仿→乙醚→乙酸乙酯 →乙酸甲酯 →丙酮→正丙醇 →甲醇→吡啶→乙酸（大） 混合溶剂的极性次序：苯∶氯仿（ 1+1）→ 环己烷 ∶乙酸乙酯（ 8+2）→ 氯仿∶丙酮（ 95+5）→苯∶丙酮（ 9+1） →苯∶乙酸乙酯（ 8+2）→ 氯仿∶乙醚（ 9+1）→苯∶甲醇（ 95+5） →苯∶ 乙醚（ 6+4）→ 环己烷∶ 乙酸乙酯（ 1+1）→ 氯仿∶乙醚（8+2）→氯仿 ∶甲醇（ 99+1）→苯∶甲醇（9+1）→ 氯仿∶丙酮（85+15）→ 苯∶乙醚（ 4+6）→ 苯∶乙酸乙酯（1+1）→氯仿∶甲醇（ 95+5）→ 氯仿∶丙酮（7+3）→ 苯∶乙酸乙酯（ 3+7）→ 苯∶乙醚（1+9）→乙醚∶甲醇（ 99+1）→ 乙酸乙酯 ∶甲醇（ 99+1）→ 苯∶丙酮（ 1+1） →氯仿∶ 甲醇（ 9+1）过柱子体会总结1, 选柱子 : 现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.2, 称量:100-300 目硅胶 , 称 30-70 倍于上样量 ; 假如极难分 , 也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍, 详细的挑选要详细分析 . 假如所 需组分和杂质分的比较开 〔 是指在所需组分 Rf 在 0.2--0.4, 杂质相差 0.1 以上〕 ,就可以少用硅胶 .可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载精品名师归纳总结3, 选洗脱剂 : 一般淋洗剂是采纳 TLC 分析得到的绽开剂的比例再稀释一倍后 的溶剂. 极性小的用乙酸乙酯 : 石油醚系统 ; 极性较大的用甲醇 : 氯仿系统 ; 极 性大的用甲醇 : 水: 正丁醇 : 醋酸系统 . 要使所需点在 Rf 值在 0.2-0.3 左右的比 较好. 常用溶剂的极性次序 : 石油醚 <环己烷 / 己烷<苯乙醚 <氯仿 <乙酸乙酯 < 正丁醇 <丙酮< 乙醇 <甲醇 <水. 一般把两种溶剂混合时 , 采纳高极性 / 低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂 . 拖尾可 以加入少量氨水或冰醋酸 . 乙酸乙酯 / 石油醚 = 4:1 可用 TLC 分开. 乙酸乙酯和石 油醚 〔60-90〕.4, 搅成匀浆 : 先把硅胶泡在烧杯中 , 用干硅胶体积一倍的溶剂泡 , 用超声波超 半个小时, 中间看到气泡时用玻璃棒搅一下 . 假如洗脱剂是石油醚 / 乙酸乙酯 / 丙 酮体系 , 就用石油醚拌 ; 假如洗脱剂是氯仿 / 醇体系 , 就用氯仿拌 .5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次 , 由于溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使 产品分解 . B, 将柱底用棉花塞紧 , 不必用海沙 , 加入约 1/3 体积石油醚 〔 氯仿〕, 装上蓄 液球, 打开柱下活塞 , 将匀浆一次倾入蓄液球内 . 随着沉降 , 会有一些硅胶沾在蓄液球内 , 用石油醚 〔 氯仿〕 将其冲入柱中 . C, 装柱时肯定要保证无气泡 , 同时敲打柱体使柱体更匀称 , 紧凑, 装毕, 用洗 脱液冲三次 .6, 压实: 装柱完后 , 加入更多的石油醚 , 用双联球或气泵加压 , 直至流速恒定 . 柱床约被压缩至 9/10 体积. 无论走常压柱或加压柱 , 都应进行这一步 , 可使分 离度提高许多 , 且可以防止过柱时由于柱床萎缩产生开裂 .可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载精品名师归纳总结7, 上样: 干法湿法都可以 . A, 在硅胶上层加少量无水硫酸钠 〔 以免样品被洗脱剂冲散〕 取适量样溶液 上样. 上样后 , 加入一些洗脱剂 , 再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面. 然后就可 以放心的加入大量洗脱剂 , 而不会冲坏硅胶表面 . B, 用少量的溶剂溶样品加样 , 加完后将下面的活塞打开 , 待溶剂层下降至 石英砂面时 , 再加少量的低极性溶剂 , 然后再打开活塞 , 如此两三次 , 一般石英 砂就基本是白色的了 . 加入淋洗剂, 一开头不要加压 , 等溶样品的溶剂和样品层 有一段距离 〔2 ～ 4cm 就够了 〕 , 再加压, 这样防止了溶剂 〔 如二氯甲烷等 〕 夹带 样品快速下行 .8, 过柱和收集 : 柱层析实际上是在扩散和分别之间的权衡 . 太低的洗脱强度并 不好, 举荐用梯度洗脱 . 收集的例子 :10mg 上样量 ,1g 硅胶 H,0.5ml 收集馏 分;1-2g 上样量 ,50g 硅胶 〔200-300 目〕 ,20-50ml 收集馏分 . 接收瓶肯定要用 可密封的 . 柱子下面的活塞肯定不要涂润滑剂 , 会被淋洗剂带到产品中的 .9, 用少量的溶剂溶样品加样 , 加完后将下面的活塞打开 .10, 检测. 要更多的使用专用喷显剂 , 假如仅用紫外灯 , 会缺失较多产品 , 紫外 的灵敏度一般比喷显剂底 1-2 个数量级 .11, 送谱. 收集的产品旋干 , 在送谱前通常需要重结晶 . 假如样品太少或为液体 , 可过一小凝胶柱 , 作为送谱前的最终纯化手段 . 可除去氢谱 1.5ppm 左右所谓的 " 硅胶" 峰.可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载精品名师归纳总结过柱子的体会常说的过柱子应当叫柱层析分别,也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱柱分的体会成分太多柱子可以分为：加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流淌速度, 削减产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分别,一个柱子几个月也是有的减压柱能够削减硅胶的使用量,感觉能够节约一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝聚）,以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且仍必需同时使用水泵抽气（很大的噪音,而且时间长）以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快 些压力的供应可以是压缩空气,双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）特殊 是在简单分解的样品的分别中适用 压力不行过大, 不然溶剂走的太快就会减低分别成效加压柱在一般的有机化合物的分别中是比较适用的关于柱子的尺寸,应当是粗长的最好可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载精品名师归纳总结柱子长了,相应的塔板数就高柱子粗了,上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄）,这样相对的减小了分别的难度。

试想假如柱子十厘米,而样品就有二厘米, 那么分别的难度可想而知, 唯恐要用很低极性的溶剂渐渐冲了而假如样品层只有 0.5 厘米, 那么各组分就比较简单得到完全分别了 当然采纳粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了, 不过这些成本相对于产品来说或许就不算 什么了现在见到的柱子径高比一般在 1：5～ 10,书中写硅胶量是样品量的 30～40 倍, 详细择要详细分析 假如所需组分和杂质分的比较开 （是指在所需组分 rf 在 0.2 ～0.4 ,杂质相差 0.1 以上）,就可以少用硅胶,用小柱子（例如 200 毫克的样品, 用 2cm×20cm的柱子）假如相差不到 0.1 ,就要加大柱子,我觉得可以增加柱子的直径,比如用 3cm的,也可以减小淋洗剂的极性等等关于无水无氧柱,适用于对氧,水敏锐,易分解的产品可以湿柱,也可以干柱不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次,由于溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能使产品分解, 究竟要分别的是敏锐的东东, 当心不为过也是由于分别的东西比较敏锐,所以接收瓶肯定要用可密封的,遵循 schlenk 操作至于是加压、常压、减压,随需而定由于是 schlenk 操作,所以点板是个问题,假如样品是显色的,恭喜了,不用点板,直接看柱子上的色带就行了。

假如样品无色,只好预备几十个 schlenk 瓶,一瓶一瓶的点,不过几次之后就知道样品在哪,也就可以省些了可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载精品名师归纳总结像我以无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相由于硅胶中有大量的羟基暴露在外,很简单使样品分解,特殊是金属有机化合物和含磷化合物而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的,挑选余的比较大,但是比硅胶要贵些听说有个方法,就是用石英做柱子,然后用 HF254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了, 没有验证过 哪位做过可以提出来大家参详参详关于湿法、干法上样湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等,但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了许多样品在上柱前是粘乎乎的,一般没关系可是有的上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会显现,是由于硅胶对样品的吸附饱和,而样品本身又是比较好的固体才会发生, 这就应当先重结晶, 得到大部分的产品后再柱分, 假如不能重结晶那就不管它了,直接过就是了,样品随着淋洗剂流淌会溶解的有些样品溶解性差,能溶解的溶剂又不能上柱（比如 DMF, DMSO等,会随着溶剂一起显色是一个很长的脱尾）,这时就必需用干法上柱了。

样品和硅胶的量有一种说法是 1：1,我觉得是越少越好,但是要保证在旋干后,不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）可编辑资料 -- -- -- 欢迎下载。