3样品的前处理方法ppt课件.ppt

第三部分 样品预处理方法1最新课件一、概述：1、样品处理的目的样品处理的目的 气相色谱 高效液相色谱色谱分析技术 高效毛细管电泳 平面色谱 气相色谱质谱 联用技术 液相色谱质谱 液相色谱核磁 气相色谱红外2最新课件 石化过程分析石化过程分析 工业卫生调查和评价工业卫生调查和评价 药物动力学和毒理学研究药物动力学和毒理学研究 食品分析食品分析 法庭取证分析法庭取证分析色谱法应用色谱法应用 医疗诊断医疗诊断 核能和燃料分析核能和燃料分析 制药过程监测制药过程监测 化妆品和香料组成分析化妆品和香料组成分析 商品质量检验商品质量检验3最新课件样品预处理的目的除去微粒除去微粒减少干扰杂质减少干扰杂质浓缩微量的组份浓缩微量的组份提高检测的灵敏度及选择性提高检测的灵敏度及选择性改善分离的效果改善分离的效果有利于色谱柱及仪器的保护有利于色谱柱及仪器的保护4最新课件2、样品处理的必要性和重要性、样品处理的必要性和重要性色谱分析的全过程包括：色谱分析的全过程包括：样品采集样品采集、样样品制备品制备、色谱分析、数据处理与结果表色谱分析、数据处理与结果表述述 样品种类繁多，其组成、浓度、物理形样品种类繁多，其组成、浓度、物理形态等均是色谱分析测定的影响因素。

态等均是色谱分析测定的影响因素 样品处理技术就成为提高分析测定效样品处理技术就成为提高分析测定效率、改善和优化色谱分析的重要环节率、改善和优化色谱分析的重要环节5最新课件占样品分析时间的比例（占样品分析时间的比例（ 60%）样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间占分析的消耗总成本最大占分析的消耗总成本最大消耗大量的溶剂及其他化学品消耗大量的溶剂及其他化学品实验的重复性及准确性实验的重复性及准确性 最差的环节最差的环节影响实验结果好坏影响实验结果好坏 的最重要因素的最重要因素 是决定性的步骤是决定性的步骤6最新课件 3、样品处理的原则（1 1）样品中可能存在的物质组成？浓度水平？）样品中可能存在的物质组成？浓度水平？（2 2）样品中的主要组分？）样品中的主要组分？（3 3）采样方法是非破坏性的还是破坏性的？）采样方法是非破坏性的还是破坏性的？（4 4）收集的样品必须有代表性收集的样品必须有代表性5 5）采用方法必须和分析目的保持一致采用方法必须和分析目的保持一致7最新课件3、样品处理的原则（续）（6 6）样品制备过程中尽可能防止和避免待测定组）样品制备过程中尽可能防止和避免待测定组分发生化学变化或丢失分发生化学变化或丢失（7 7）样品处理中，若进行待测定组分的化学反应，）样品处理中，若进行待测定组分的化学反应，则反应应是已知的和定量完成的。

则反应应是已知的和定量完成的8 8）样品制备过程中，要防止和避免待测定组分）样品制备过程中，要防止和避免待测定组分受到污染，减少无关化合物引入制备过程受到污染，减少无关化合物引入制备过程8最新课件3、样品处理的原则（续）（9 9）处理过程应简单易行，所用样品处理）处理过程应简单易行，所用样品处理装置的尺寸应与处理样品的量相适应装置的尺寸应与处理样品的量相适应1010）采样后应尽可能快的进行分析样品）采样后应尽可能快的进行分析样品的制备和分析，或使用适当的方法消除的制备和分析，或使用适当的方法消除可能产生的干扰，做好样品的保存可能产生的干扰，做好样品的保存9最新课件二、样品的采集 气体（包括蒸汽）气体（包括蒸汽）涉及的样品形式涉及的样品形式 液体（包括乳液）液体（包括乳液） 固体（包括气体悬浮物、固体（包括气体悬浮物、 液体悬浮物）液体悬浮物） 直接采集直接采集主要采集方法主要采集方法 富集采集富集采集 化学反应法采集化学反应法采集10最新课件直接采集：只需将样品直接引进容器中，所用容只需将样品直接引进容器中，所用容器最好是新的或洗净后干燥的，以防止其他样器最好是新的或洗净后干燥的，以防止其他样品的残留影响。

品的残留影响富集采集：是在采集过程中，同时将待测组分富是在采集过程中，同时将待测组分富集，如吸附采样中选择合适的吸附材料，在吸集，如吸附采样中选择合适的吸附材料，在吸附的同时使待测材料在吸附材料上富集附的同时使待测材料在吸附材料上富集11最新课件使用采集方法的注意事项（1 1）采集的样品应具有代表性，要注意采）采集的样品应具有代表性，要注意采样的时间、地点及采样位置的选择样的时间、地点及采样位置的选择2 2）所有样品都要采集双份，一份分析样）所有样品都要采集双份，一份分析样品，一份保存样品，备复查时使用品，一份保存样品，备复查时使用3 3）样品的采集和储存过程要作记录，详）样品的采集和储存过程要作记录，详列采样时间、地点、准确位置等列采样时间、地点、准确位置等12最新课件（4 4）采集储存中待测组分不应有）采集储存中待测组分不应有损失损失或发生或发生化学化学变化变化 损失损失包括挥发、在储存容器上的吸附等物包括挥发、在储存容器上的吸附等物理原因理原因 化学变化化学变化包括被氧化、微生物引起的分包括被氧化、微生物引起的分解、各组分间的化学反应等解、各组分间的化学反应等（5 5）避免样品受到外界污染。

避免样品受到外界污染6 6）采集后要尽快进行分析样品的制备和分析采集后要尽快进行分析样品的制备和分析13最新课件三、样品预处理常用的方法v高速离心高速离心v过滤、超滤过滤、超滤v选择性沉淀选择性沉淀v萃取萃取v索氏抽提索氏抽提v衍生反应衍生反应v加速溶剂萃取（加速溶剂萃取（ASEASE）v浓缩样品浓缩样品 液液- -固萃取固萃取 / / 液液- -液萃取液萃取固相萃取样品小柱固相萃取样品小柱14最新课件样品预处理的过程15最新课件去除微粒v过滤过滤可重复使用过滤装置可重复使用过滤装置/过滤膜过滤膜v有机有机(0.22m)/无机无机(0. 22 m)v膜片可更换膜片可更换一次性使用的膜一次性使用的膜v使用方便简单，交叉污染小使用方便简单，交叉污染小v有更小内径，可用于微量样品的处理有更小内径，可用于微量样品的处理v高速离心高速离心v大于：大于：10,000 rpm16最新课件超超 滤滤v机理机理超滤是一种基于分子量分离的技术超滤是一种基于分子量分离的技术v目的目的根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等分为不同的馏份分为不同的馏份除去小分子样品中的大分子蛋白除去小分子样品中的大分子蛋白脱盐脱盐17最新课件选择性沉淀选择性沉淀v常用于生化样品中除蛋白常用于生化样品中除蛋白有机溶剂：有机溶剂：乙腈、甲醇乙腈、甲醇强酸：强酸：三氯乙酸、过氯酸三氯乙酸、过氯酸盐：盐：50% 硫酸铵硫酸铵 18最新课件样品衍生样品衍生v提高检测的灵敏度提高检测的灵敏度增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度增加荧光基团使样品用高灵敏度荧光检测器增加荧光基团使样品用高灵敏度荧光检测器v改变分离的选择性改变分离的选择性改变组份的基团，如：改变组份的基团，如：变离子型化合物为非变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离离子型，用反相方法分离v典型的例子典型的例子氨基酸分析氨基酸分析19最新课件加速溶剂萃取（加速溶剂萃取（ASE）tASE ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技术的技术tASE ASE 的的原理原理是选择合适的溶剂、通过增加温度是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高萃取过程的效率和压力来提高萃取过程的效率tASE ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、煮沸法和其他萃取方法摇、煮沸法和其他萃取方法20最新课件三种不同型号的三种不同型号的ASEASE100ASE200 ASE300 21最新课件ASE的突出优点的突出优点v快速，快速，1515分钟分钟v溶剂用量少溶剂用量少v萃取效率高萃取效率高v样品基体影响小样品基体影响小v可同时选用四种溶剂萃取可同时选用四种溶剂萃取v安全，全自动安全，全自动vASEASE建立了环境建立了环境, , 药物药物, , 聚合物聚合物, , 食品食品, , 和化妆品工和化妆品工业的大量应用业的大量应用22最新课件ASE工作流程工作流程加溶剂加溶剂 时间时间 (min) 0.51加样品加样品静态萃取静态萃取 5氮气吹扫氮气吹扫12溶剂溶剂泵泵吹扫阀吹扫阀炉体炉体氮气瓶氮气瓶静态阀静态阀收集瓶收集瓶萃取池萃取池循环循环加热加热 5加压加压萃取结束萃取结束 Total (min)准备分析准备分析1218新溶剂冲洗新溶剂冲洗0.523最新课件食品安全评价中ASE的应用水果和蔬菜中的农药水果和蔬菜中的农药动物组织中的二动物组织中的二噁噁英和多氯联苯英和多氯联苯粮食中的农药粮食中的农药粮食中的毒枝菌素粮食中的毒枝菌素熏肉中的多环芳烃熏肉中的多环芳烃葡萄干中的杀真菌剂葡萄干中的杀真菌剂咸肉中的硝酸盐咸肉中的硝酸盐/ /亚硝酸盐亚硝酸盐一些正在发展的方法一些正在发展的方法24最新课件ASE 的应用领域的应用领域环环 境境农业、食品农业、食品聚合物聚合物制制 药药25最新课件浓缩样品v浓缩样品的方法浓缩样品的方法 萃取萃取/吹干吹干 沉淀沉淀/再溶解再溶解 色谱法色谱法 液固抽提液固抽提/固相萃取小柱固相萃取小柱26最新课件固相萃取（固相萃取（SPE）技术）技术v固相萃取技术是基于同液相色谱同样技术开发的产固相萃取技术是基于同液相色谱同样技术开发的产品，分离复杂样品中的不同组份品，分离复杂样品中的不同组份v固相萃取技术（固相萃取技术（SPE）的重要性）的重要性实验室中实验室中6080%的成本及工作量在样品制备上的成本及工作量在样品制备上 加速样品的制备时间加速样品的制备时间 降低样品前处理的成本降低样品前处理的成本 提高分析的准确性及回收率提高分析的准确性及回收率 更容易自动化更容易自动化 减少样品处理步骤减少样品处理步骤 降低对不稳定样品的影响降低对不稳定样品的影响 提高安全性提高安全性27最新课件SPE小柱vSPE 小柱的应用领域小柱的应用领域除去杂质及干扰组份除去杂质及干扰组份把样品分成不同极性的组进行分析把样品分成不同极性的组进行分析富集微量的组份富集微量的组份vSPE 小柱的主要种类小柱的主要种类反相反相正相正相离子交换离子交换28最新课件SPE小柱的种类小柱的种类反相反相正相正相离子交换离子交换固定相固定相非极性非极性极性极性带电荷带电荷溶剂溶剂从极性到非极性从极性到非极性从非极性到极性从非极性到极性PH或离子强度（低到高）或离子强度（低到高）根据根据SPESPE小柱的种类及样品的性质，选洗脱小柱的种类及样品的性质，选洗脱强度不同的溶剂把样品分开强度不同的溶剂把样品分开让样品的各组份在固定相上吸附、解吸附，让样品的各组份在固定相上吸附、解吸附，或不与固定相作用或不与固定相作用 第一步：第一步：让所感兴趣的样品留在小柱，杂质通过小柱让所感兴趣的样品留在小柱，杂质通过小柱 第二步：第二步：用不同极性的溶剂，使所感兴趣的样品通过小柱用不同极性的溶剂，使所感兴趣的样品通过小柱29最新课件SPE小柱使用方法小柱使用方法 准备准备进样进样萃取萃取萃取萃取 30最新课件各种SPE小柱（一）v正相正相使用方法使用方法v可先用可先用6 6到到1010倍柱体积的非极性溶剂平衡倍柱体积的非极性溶剂平衡v加入样品加入样品v用非极性溶剂洗脱不想要的组份用非极性溶剂洗脱不想要的组份v用极性溶剂洗脱第一组感兴趣的组份用极性溶剂洗脱第一组感兴趣的组份v用极性更强的溶剂洗脱剩下的感兴趣的组份用极性更强的溶剂洗脱剩下的感兴趣的组份在不同条件下，有些填料可以用于反相或离子交在不同条件下，有些填料可以用于反相或离子交换，如换，如NHNH2 2 / CN / CN确认确认回收率回收率31最新课件各种SPE小柱（二）v反相反相使用方法使用方法v可先用可先用6 6到到1010倍柱体积的甲醇或乙腈活化，再倍柱体积的甲醇或乙腈活化，再用用6 6到到1。