温敏梳状嵌段共聚物对ps微球阻抗蛋白吸附作用的研究.pdf

方法和大分子单体技术， 制备了温敏性聚 !$异丙基丙烯酰胺（?@A?） 为 ］ 方法制备， 纯度 1D2； 溶菌酶 （美国 ’7EF@ 产品） ； 蒸馏水 （自制） !其它试剂均为分析纯!!“#$%$ 大分子单体的制备与表征E） 混合， 抽排 $9 F7K充氮后封管， G9L水浴中电磁搅拌 G 8， 停止 反应， 向产物中加入乙醚产生沉淀， 再用四氢呋喃溶解沉淀物， 反复沉淀溶解 H 次以上， 收集最终沉淀物， 用蒸馏水溶解后冷冻干燥， 得到中间产物（@） “DJ: E （收率 :;2） ! 将中间产物 （:J$# E） 与C,M （#9 FI） 、 A,’ （“JDD E） 、 )@4N （9J“G E） 混合， 置 于 H9L水浴中反应 $# 8， 后处理过程同中间产物!最终产物 3， $ 个 ’8/6V] BM>:9#I） ，O@XV.0 G99 泵送系统， #“9 型折光检测器， 溶剂为 四氢呋喃 （ZNM， 含 $2三乙胺） ， 单分散聚苯乙烯为标样， 温度 H9L， 流速 “ FI(F7K!!“’单分散聚苯乙烯微球的制备与表征 将分散介质水 （“;9 E） 在 D9L恒温水浴中加热， 通氮除氧 H9 F7K!加入单体苯乙烯 （HJ99 E） 和引发剂 B E） ， 于 D9L聚合 $# 8， 升温至1:L再反应 $ 8， 出料!聚合转化率 11J:2 ! 颗粒粒径和电泳迁移率 （3,） 由 ^VX@ 电位(粒度仪 （=*A _VX@ 9 （“9‘ :F$(8690首先， 在 “# 悬浮液中加入水溶性聚合物溶液， 室温预吸附 (. ? 后加入溶菌酶溶液， 将悬浮液置于 +869， 采用 B*)(444 型 （上海尤尼柯仪器有限公 司） 紫外8可见光分光光度计测定室温下不同浓度的蛋白溶液在 (C4 D6 的透光率， 获取蛋白浓度 !与透光率 “ 关系式 （如式 （!） 所示， 线性相关系数为 45EE869的 “# 微球悬浮液， 用高速冷冻离心机于 !4@离心 ! ? （!5E I !4.J86KD） ， 取上层清液， 测定 (C4 D6 的透光率 （“4） ， 计算该清液的吸光度 （!44L G“4） 0 按前述 （吸附8絮凝实验） 悬浮液配方， 将 “#微球、 预吸附了聚合物的微球分别与溶菌酶混合后于 (/@吸附 (. ?， 各取 / 69 试样， 在相同条件下离心 ! ?， 取上层清液， 测定试样的透光率 “K，以 “KH （!44L G “4） 作为蛋白溶液的实际透光率“， 由式 （!） 计算清液中的溶菌酶浓度进而推算蛋 白吸附量0$结果与讨论$“!%)$’N 图谱 （图 !）上出现端基苯环的谱峰 （!F 0 !!;)$’N Q:RSTJU6 7V “*“ 61SJ767D76RJ文献 ［! ’)*’+,-’?@ 8;%A-AB;8C 8;D;BE%96:012 ’)*’+, （H）聚合物的分子量及其分布由 I’H 测定， 图 J是代表性 I’H 曲线BN和 3!M“ %;BN的 )*’+,O’?@ 大分子单体的无规共聚物， I’H 测定的 ’K* 分别为 3M“F 和 JM#J） ， 而且 I’H 淋洗曲线均呈现单峰峰形， 表明在嵌段共聚阶段， 各分子链增加的分子量基本上相同%;D;BE%96 =$> 8;%A-AB;8C 8;D;BE%96: D69D=69> AE /+0Q 598P$1R79’;BE%96H;%D;:151;$ （%;BN）,;B987B=6 S912P5（!$）)*’+,(’?@’)*’+, AB;8CH;%A A6=$8PH;D;BE%96’K*’)*’+,!##J3###!M3# ’)*’+,-’(’L!MTUMFJ3###33##J“U##= ’)*’+,-’?@-!LFMTVMFJFL##3#U#JUJ##!MFU ’)*’+,-’?@-3UUMT!!MFJTU##3#U#“UU##!M“V ’)*’+,-’?@-F!3MVUTMJJTU##3#U#L#U##!MVJ=H=B87B=59> =88;6>1$2 5; 5P9 !$; 5P9 8;%D;:151;$ ;’)*’+,-’?@-!（A）浊变为澄清， 底部出现沉淀物=；?）20@2AB 8/-C+/-*+-? 234，>=；D）3*78；#）20@2ABC2E2 8/-C+/-*+-? 234） ，;=；“）3*78，;；G）20@2ABC2HIC> 8/-C+/-*+-? 234） 经 20@2AB 均聚物预处理的 23 悬浮液在 ; 预处理的 23 悬浮液即使在 ; （HI U 99S; 7’;O ,7 和 9V% ,7，20@2ABC2HIC> 由于 2HI 的稳定作用 （处于胶体 的外表面） 可以形成更小的胶体$如前所述浓度为RS9 7#47L 的 20@2AB 均聚物和 20@2ABC2E2 共 聚物溶液的粒径测定也给出类似的结果$图 V 是20@2ABC2HIC; （HI U P; 水溶液， @AB *87） 在 ’C7 D9 的透光率均大于 EEF， 表明各聚合物在 ’C7 D9 几乎无吸收， 可排除溶液中聚合物对蛋白浓度测定的干扰%离心后各吸附试样清液的透光率及对应的溶菌酶浓度列于表 ’， 从表中可看出预吸附了聚合物的 !>QR=SQ94） ；1）!-.!/0;>QR=SQ94） ；3）!-.!/02!$!;>QR=SQ94） ；4）!-.!/02!“#26;>QR=SQ94 ） ； 5 ） !-.!/02!“#2’;>QR=SQ94）附的 !/“*?? 和 2892:;? 或 2=2 支链形成亲水表层， 使得此类共聚物在温度高于 2892:; 相转温度 （IS3!） 时也具有阻抗蛋白吸附性能， 共聚物中亲水支链增加抗蛋白吸附效果提高；（@） 借助 23 微球的变温絮凝实验可定性判断预吸附聚合物对微球表面蛋白吸附的阻抗性能R’()(’(*+(,E!#$ T 3， U.((*“,’*54 P >， =+6)0*)V S I， S#54Q*55 W P， I’ T !RU’+ S， Z+[*“(% S T， !*$45*“ 3 T URU’+#(*“’#5% Z*%*#“)0， EHHL， O@： EDG X EBEM2#1*6 W P， ?55’,, S TRU’+ W， \.$(*“ ] I， U.“( \ ;RU’+， Z’$J ! :， Z#/+/+“( 8， S#54Q*55 W PRT U’+， Z’$J ! :， S#54Q*55 W PR;#)“+# ^’#+’V%# U， 35+ ;R2+56， ;+0Q#54 \R:41 d.$)( ;#(*“， @FFG， EG （M） ： MGB X MDDEGe.’$$ T d， Z’77#“4+ >， P#1’% ! 2RS0*， W’“’V’0’“# 9， ;’6#.)0’ 8RP’* :$J*Q#$4(* ;#V“++“’+V# W， \#[#.* 3， ?V#， 3#Q#R;#)“+#)“+， :0“3:()-)09，+“,6,(0;）*56789:7“56?@0!A6+A’B’C6D0EF （8?6“56?@0!A6+A’B’C6 D0EF@6?，,0@K!KE0G: G0D0EF@6?，I0EFABF?6+6 @’G?0AD56?6，7<;高分子学报=<