高中生物实验总结.doc

高中生物实验总结实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 1.实验原理： 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同： 甲基绿+DNA→绿色吡罗红+RNA→红色2.分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中；线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中 3.实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 4.实验结论：DNA主要分布在细胞核中；RNA主要分布在细胞质中；5.实验流程：（1）取口腔上皮细胞制片：①载玻片上滴一滴质量分数为：0.9%NaCl溶液； ②漱口后，用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下； ③载玻片在酒精灯上烘干，盖上；（2）水解：①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中； ②大烧杯中加入30℃温水； ③将小烧杯放入大烧杯中保温5min；（3）冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s;（4）染色：①吸水纸吸去载玻片的水分； ②滴两滴混合染液，染色5min； ③吸去多余的染液，盖上盖玻片；（5）观察：先低倍后高倍；6、几种液体在实验中的作用：（1）0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形态。

8%的HCl：①改变细胞膜等的通透性； ②使染色质中的DNA与蛋白质分开蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片2）混合染液需要现配现用；（3）该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰实验二、 物质鉴定 一、实验原理：还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀（水浴加热） 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色 （滴液观察或制片显微镜观察）脂 肪 + 苏丹IV～ 红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应 （不加热）1、还原糖的检测（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如：苹果，梨，白萝卜 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） 操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液  3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。

应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~ 900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu OH生成4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者也可用酒精灯对试管直接加热防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶 （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。

干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形切片要尽可能薄些，便于观察在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟染色时间不宜过长 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒装片不宜久放时间一长，油滴会溶解在乙醇中3、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液浸泡、去皮研磨、过滤 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。

A液和B液也要分开配制，储存鉴定时先加A液后加B液 CuSO4溶液不能多加先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色可用蛋清代替豆浆蛋清要先稀释如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净附：淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化碘液不要滴太多以免影响颜色观察4、考点提示： （1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原（2 )还原性糖植物组织取材条件？ 含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等 （3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 是为了使研磨更充分不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显 （4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成酒石酸络铜离子，酒石酸络铜离子和可溶性还原糖在加热条件下反应产生砖红色沉淀。

斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀，而氧化亚铜是砖红色沉淀，这就会给实验带来误解因此斐林试剂一般为现用现配 （5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为： 浅蓝色 棕色 砖红色 （6）花生种子切片为何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察 （7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片不均匀 （8）脂肪鉴定中乙醇作用？ 洗去浮色 （9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比 实验三 观察叶绿体和细胞质流动 1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片 2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色 知识概要： 取材 制片 低倍观察 高倍观察 考点提示： （1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？ 因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成 （2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？ 表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。

（3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？ 进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右 （4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？ 叶脉附近的细胞 （5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？ 仍为顺时针 （6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？ 否，活细胞的细胞质都是流动的 （7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？ 视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈 （8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？叶绿体的受光面积较小有一面面向光源 实验四、 观察有丝分裂 1、材料：洋葱根尖（葱，蒜） 2、步骤：（一）洋葱根尖的培养 （二）装片的制作 3、实验原理：（1）龙胆紫溶液能将染色体染成深色（2）有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期制作流程：解离→漂洗→染色→制片 1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液). 时间: 3~5min .目的: 使组织中的细胞相互分离开来. 2. 漂洗: 用清水漂洗约10min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色. 3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min 目的: 使染色体着色,利于观察. 4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察. 过程方 法时 间目 的 解离上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在温室下解离。

3-5min用药液使组织中的细胞相互分离开来漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗约10min洗去药液，防止解离过度染色把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色3-5min染料能使染色体着色制片用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片然后，用拇指轻轻的按压载玻片使细胞分散开来，有利于观察。