肥达试验.ppt

肥达试验肥达试验n原理：用已知的原理：用已知的伤寒伤寒沙门菌沙门菌菌体（菌体（O））抗原抗原和和鞭毛（鞭毛（H））抗原，以及引起副伤寒的抗原，以及引起副伤寒的甲型甲型副伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、乙型乙型副伤寒沙门菌副伤寒沙门菌H抗原抗原的的诊断菌液与受检血清做试管或微孔板凝集诊断菌液与受检血清做试管或微孔板凝集实验，测定受检血清中有无相应抗体及其实验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验效价的试验肥达试验（试管凝集反应）肥达试验（试管凝集反应）n器材：试管器材：试管6支支/人，试管架人，试管架1个个/2人人 吸管吸管1支支/人，标签人，标签1个个/人人 乳胶头乳胶头1个个/人人n已知：已知： 伤寒杆菌伤寒杆菌H菌液菌液 伤寒杆菌伤寒杆菌O菌液菌液 （（4人人/组）组） 甲型副伤寒甲型副伤寒H菌液菌液 乙型副伤寒乙型副伤寒H菌液菌液n待检：病人血清（待检：病人血清（1:10稀释）稀释）方法：方法：1. 每管加每管加N生理盐水生理盐水0.5ml（（编号、标记）编号、标记） 2. 第一管加诊断血清第一管加诊断血清0.5ml，，混匀混匀 从第一管取从第一管取0.5ml加入第二管，混匀加入第二管，混匀 从第二管取从第二管取0.5ml加入第三管，混匀加入第三管，混匀 从第三管取从第三管取0.5ml加入第四管，混匀加入第四管，混匀 从第四管取从第四管取0.5ml加入第五管，混匀加入第五管，混匀 从第五管取从第五管取0.5ml，，弃在污物盆里弃在污物盆里 3. 每管加菌液每管加菌液0.5ml ，，混匀混匀 4. 第一管贴标签，放一排，第一管贴标签，放一排，45℃℃水箱，孵育水箱，孵育1.5h 1：：20 1：：40 1：：80 1：：160 1：：3201：：40 1：：80 1 ：：160 1 ：：320 1 ：：6400.5ml0.5ml0.5ml0.5ml加完菌液加完菌液血清稀释度血清稀释度弃弃血清血清NS注意！注意！ （（1）每人只有一根吸管，先加）每人只有一根吸管，先加NS，，再用之加血清，再用之加血清， 用完后拔掉吸头，放进用完后拔掉吸头，放进铅桶铅桶里里 （（2）加菌液时，最好从）加菌液时，最好从第第6管管往前加，避免将高浓度血清往前加，避免将高浓度血清 带到低浓度试管里，导致结果不准带到低浓度试管里，导致结果不准 （（3）观察完结果，将有菌的）观察完结果，将有菌的试管放进锅试管放进锅里。

里n以出现＋＋凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体效价以出现＋＋凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体效价nO达到达到1：：80，，H达到达到1：：160 H甲甲或或H乙乙达到达到1：：80或以上有诊断意义或以上有诊断意义结果判断结果判断 记录结果记录结果：：第第6管管 均匀混浊均匀混浊 ＋＋ 少量凝集少量凝集 ＋＋＋＋ 细菌部分沉于管底，液体半澄清，凝集细菌部分沉于管底，液体半澄清，凝集 呈颗粒状呈颗粒状 ＋＋＋＋＋＋ 大部分凝集，液体轻度混浊，凝集块较大大部分凝集，液体轻度混浊，凝集块较大 ＋＋＋＋＋＋＋＋ 全部凝集，液体澄清，大片凝集块全部凝集，液体澄清，大片凝集块 血清稀释度血清稀释度 菌液菌液 1：：40 1：：80 1：：160 1：：320 1：：640伤寒伤寒H伤寒伤寒O甲副甲副H乙副乙副H 。