常用培养基及抗生素的配制.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑常用培养基及抗生素的配制 常用培养基及抗生素配置 1310466559 来源：生物秀知道 欣赏次数：1592 网友评论 0 条 LB培养基 将以下组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 10g 5g 10g 假设需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L SOB培养基 将以下组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 1 mol/L 氯化钾 20g 5g 0.5g 2.5ml 用水补足体积到1L分成100ml的小份，高压灭菌培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁 SOC培养基 成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌） TB培养基 将以下组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 甘油 12g 24g 4ml 各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌） 2&timeYT培养基 将以下组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 16g 10g 4ml 假设需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L YPD培养基 将以下组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 葡萄糖 20g 10g 20g 用水补足体积为1L后，高压灭菌建议在高压灭菌之前，对色氨酸养分缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，由于YPD培养基是色氨酸限制型培养基为了配制平板，需要在高压灭菌前参与20g琼脂粉 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，结果定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，结果定容至10ml分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基 1 M DTT的配置 组份浓度：1 M DTT 配制量：20 ml 配制方法： 1. 称取3.09 g DTT，参与到50 ml塑料离心管内 2. 加20 ml的0.01 M NaOAc（pH5.2)，溶解后使用0.22 mm滤器过滤除菌 3. 适量分成小份后，-20℃保存 PMSF 100或者200mM储液直接用异丙醇配制 工作浓度0.1~1Mm — 3 —。