食品中有毒有害物质的分析-气相色谱与质谱联用技术和液相色谱的应用（ppt 52页）

1、2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,1,食品中有毒有害物质的分析 气相色谱/质谱联用技术和液相色谱的应用,1，饲料中-兴奋剂（盐酸克仑特罗）的分析 2. NDMA （N-亚硝胺）的测定 3. 海产品中的药物残留的分析 4. 酱油中的氯丙醇的分析,更多资料在资料搜索网( ) 海量资料下载,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,2,GC/MSD 或 HPLC-UV法,饲料中盐酸克仑特罗(Clenbuterol)的测定,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,3,盐酸克仑特罗(Clenbuterol),盐酸克仑特罗是一种肾上腺素兴奋剂，主要用于防治人，畜支气管哮喘和支气管痙挛，治疗剂量较低。 在饲料中添加盐酸克仑特罗具有营养再分配作用，提高饲料报酬，提高瘦肉率的效果。 盐酸克仑特罗在肌肉特别是在内脏中会有高浓度的残留，对人与动物的肝，肾及神经系统产生

2、危害。 欧盟最早颁布法规禁止其作为饲料添加剂使用，美国和加拿大也禁用，我国农业部亦发文作出同样规定。,更多资料在资料搜索网( ) 海量资料下载,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,4,盐酸克仑特罗,CH,OH,CH2NHC(CH3)3 HCl,NH2,Cl,Cl,白色结晶粉末，可从SIGMA 公司购买，可溶于水。,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,5,GC/MSD 方法,样品中的盐酸克仑特罗经提取，净化，衍生化，采用AGILENT 5973N GC/MSD SCAN 方式进行测定，外标法定量。方法回收 率为92%-99%， 检出限为低于0.2 ppm。,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,6,样品处理,提取：,饲料样品10克,加50ml 0.01mol/L HCl溶液,超声清洗器,萃取30min,离心10 min,上清液,如有必要，重复

3、一次,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,7,样品处理,净化,上清液,加2.0 ml 5 mol/L NaOH溶液， 加入10 ml 氯仿,振荡萃取。,60水浴中真空蒸发 氮气吹干,重复二次,衍生化,加 1.0 ml氯仿溶解，再加入 0.1ml 乙酸酐衍生试剂。,氮气吹干，加 0.5 ml 氯仿溶解,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,8,色谱与质谱条件,色谱条件：HP5MS 30m X 0.25mm X 0.25um 进样口：250，不分流，进样量2ul， 柱温：120（3min）20/min 220 （10 min),质谱条件：EI源，接口温度280 ，质量扫描范围50500AMU 溶剂延迟：3min。,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,9,Clenbuterol 的标准质谱图,2019年5月9日,Choose View, Head

4、er and Footer to enter text here,10,HPLC 法,采用反相高效液相色谱法 用水相和有机相二次提取饲料中的盐酸克仑特罗，可减少饲料中 杂质的干扰。 UV检测器，C18柱 回收率在8595， 检出限0.2ppm,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,11,色谱条件,C18柱，250mm X 4mm；流动相：甲醇：水65：35 检测波长，UV243nm， 流速：0.85ml/min 进样量：20ul 或者：流动相：甲醇：水55：45，流速 0.80ml/min.,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,12,样品处理,饲料样品20g,加盐酸70ml浸泡过夜，超声振荡20min， 定容，静置,取上清液离心10min,上清液10ml于分液漏斗,滴NaOH碱化，振摇5min，用正己烷提取二次， 每次20ml，合并正己烷层，定容至50ml。 取5ml，水浴蒸干，加甲醇溶解。,样品溶液,2019年5月9日,

5、Choose View, Header and Footer to enter text here,13,动物毛发 尿液及组织中的盐酸克仑特罗 及舒喘宁（沙丁胺醇）的测定,本方法适用于检验动物毛发、尿液及组织中克喘素及舒喘宁的 测定。组织和尿液样品用盐酸葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶在 Ph=5.2的缓冲溶液中消化。萃取的组织样液通过离心和过滤分离。 尿液和毛发样品作用有机溶剂萃取。所有萃取液均用固相萃取净化， 分离的药物残留经过双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后 用带有质量选择检测器的气相色谱仪测定。,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,14,试剂,- 乙酸胺缓冲液（20mM,pH=5.2）、溶解1.45g乙酸胺于500700 mL水中，用乙酸调整pH值为5.2并稀释到1升。 - 盐酸葡萄糖甙酶/芳基硫酸酯酶溶液30U/mL或相当者 - 十二烷基磺酸钠（SDS）：1% - 30mM盐酸：稀释30mL 1M盐酸到1升蒸馏水中。 - 甲醇：分析纯。 - 氨化甲醇（amonium methanol）：4

6、%。用甲醇稀释4mL氨溶液 （比重0.88）至100mL。 - BSTFA。 - 甲苯：分析纯。 - 乙酸乙脂-异丙醇（6：4）：分析纯。 - C18小柱：supelclean LC-18 Sep Pak小柱500mg，3ml。 - SCX小柱：supelclean，LC-SCX Sep Pak小柱500mg，3ml。,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,15,标准溶液,标准溶液 储备液：1000ppm（1mg/mL） 克喘素（4氨基-t-丁基氨基-甲基-3，5二氯苯基乙醇盐酸盐。 精确称取约100mg舒喘宁，溶解于100mL甲醇中。 舒喘宁（t-丁基氨基-甲基-4-羟基-m-苯乙烯-，-二醇） 精确称取约100mg舒喘宁，溶解于100mL甲醇中。 中间溶液：30ppm（30ug/mL） 分别移取3mL上述储备液（1mg/mL）定容至100mL甲醇中。 工作溶液：0.3ppm(30ug/mL) 移取1mL上述储备液（30ug/mL）用甲醇定容至100mL。,2019年5月9日,Choose View,

7、Header and Footer to enter text here,16,离心瓶，50 mL。 Sep-Pak真空接头。 具聚四氟乙烯拧盖的试管。 食品绞碎机。 机械真空泵 触摸式震荡器。 恒温箱：37+3 oC 恒温箱：80+3 oC 恒温箱：100+3 oC 气相色谱仪，配质谱检测器。,仪器设备,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,17,动物组织（肉、肾脏、肝脏、肺、心脏等）。 绞碎组织样品1min。 准确称取10+1.0g已绞碎的样品于50 mL具拧盖的离心管中。 加入20mL20mM的乙酸缓冲溶液，均质5min。 加入50L-盐酸葡萄糖醛甙酶溶液。 拧紧盖子，震荡、超声15min。 于37 oC培养18hr。 于3000 rmp离心5min，过滤上清液。 收集滤液以备净化。,动物组织的提取过程,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,18,用移液管移取5mL尿样于50mL具拧盖的离心管中。 用乙酸调整pH值至5

8、.2。 加入1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液。 加入50L盐酸葡萄糖醛甙酶溶液。 拧紧盖子，震荡、超声15min。 于37 oC培养18hr。 加入10mL乙酸乙酯-异丙醇混合液，震荡15min。 用滴管收集有机相。 用10mL上述混合液重复提取一次。 合并两次提取的溶液于一玻璃试管中。 用氮气吹干。 用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液溶解。,尿样的提取,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,19,取约1g毛发至500mL烧杯中，用100mL1%SDS溶液冲洗。 搅拌上述溶液30min，使之分散。 再用100mL1%SDS溶液冲洗一次。 用蒸馏水清洗毛发样品，去除SDS溶液。 于40 oC的烘箱中烘干样品。 切碎毛发。 准确称取500mg毛发样品于具拧盖的试管中。 加入10mL甲醇，超声30min。 拧紧盖子在60 oC的烘箱中加热2hr，并不时震荡。 离心甲醇提取液。 再用10mL甲醇提取一次，在60 oC的烘箱中加热1hr。 合并两次甲醇提取液。 用氮气吹干。 用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液解。,毛发样

9、品的提取,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,20,样品的净化,装好真空泵和接管，将C18和SCX固相萃取柱按从上到下的顺序安装。 依次用5mL甲醇、5mL水和5mL30mM盐酸活化。 取5mL滤液（4.1.1.8）至C18柱中。 对于尿和毛发样品，移取1mL所得到溶液（4.2.1.2或4.3.1.4） 至C18柱中。用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液冲洗试管并一起转移至C18柱中。 依次用5mL甲醇、5mL水淋洗柱子。 在溶液渡过固相萃取柱后，保持抽气5min使柱中的液体逐渐枯竭。 取下C18柱。 用5mL4%氨化甲醇（2.6）淋洗SCX柱并收集流出液于具塞玻璃试管中。 衍生化、检测 用氮气吹干上述流出液。 用100L甲苯溶解残渣。 加入100L BSTFA，加盖并于触摸式震荡器上震荡。 在80OC的烘箱中加热1hr。 蒸干多余的溶剂。 用0.5mL甲苯溶解。,更多资料在资料搜索网( ) 海量资料下载,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,21,（HP6890配5973或相当者）。 气相色谱仪参数（仅供参考）。 色谱柱：HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，30mX0.25umX250um 进样口：220 OC 进样方式：不分流 进样体积：2L 柱头压（70 OC）：7.6psi 柱温：70 OC（保持0.6min） 以25 OC/min升温至200 OC（保持6min） 以25 OC/min升温至280 OC（保持5min） 流速：0.9mL/min（恒流）,气-质联用仪参数,2019年5月9日,Choose View, Header and Footer to enter text here,22,传输线温度：280 OC 溶剂延迟：8min EM电压：高于调谐电压（-15000）200 分析杆温度：106 OC。 选择离子监测程序（仅供参考） 时间 目标物 监测离子 8：00 克喘素 86，243，262，2

《食品中有毒有害物质的分析-气相色谱与质谱联用技术和液相色谱的应用（ppt 52页）》由会员小**分享，可在线阅读，更多相关《食品中有毒有害物质的分析-气相色谱与质谱联用技术和液相色谱的应用（ppt 52页）》请在金锄头文库上搜索。