2017-2018学年同步备课套餐之生物人教版选修1课件:专题2 微生物的培养与应用 第5课时
48页1、第5课时 微生物的实验室培养(二),专题2 微生物的培养与应用,学习导航 1.通过阅读教材P1617“(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基”,掌握配 制培养基的步骤和倒平板操作的过程。 2.结合教材P1819“(二)纯化大肠杆菌”,理解并掌握利用平板划线法 和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。 重难点击 1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。 2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。,一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,当堂检测,二、微生物的分离与纯化技术,内容索引,一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,基础梳理,牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基,大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。 1.牛肉膏蛋白胨培养基的成分及各成分提供的营养,2.制备步骤 (1)培养基的配制 计算:根据牛肉膏蛋白胨培养基 的比例,计算配制100 mL培养基时 各成分的用量 称量 ,琼脂,配方,称量纸,蛋白胨,迅速称取,溶化 :1 moL的NaOH、pH试纸,将pH调为7.4 7.6 ,调节pH,琼脂,100,:趁热分装到洁净锥形瓶中 加棉塞:用棉花不用脱脂棉,脱脂棉吸水 包扎:外包 纸,且挂标签,牛皮
2、,分装,(2)灭菌 (3)倒平板 将 的培养皿放在 的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。 右手拿锥形瓶,使瓶口 。 用左手将培养皿打开一条 的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。 等待平板冷却凝固后,将平板 。,倒过来放置,高压蒸汽,干热,灭过菌,火焰旁,迅速通过火焰,稍大于瓶口,1.填表比较溶化时两次使用玻棒搅拌的目的,问题探究,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂,促使蛋白胨和氯化钠溶解,答案 琼脂是一种多糖,在98 以上熔化,在44 以下凝固,倒平板时高于50 则会烫手,低于50 时若不及时操作,琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。,2.倒平板时的注意事项 (1)培养基灭菌后,需要冷却至50 左右时,才能倒平板的原因是什么?你用什么办法来估计培养基的温度?,答案,答案 通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。,(2)分析右图,回答、问题: 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?,答案 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更
3、好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。,从防止杂菌污染的角度思考,平板冷凝后将平板倒置的原因是什么?,答案,答案 未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后,如果无菌落生长,说明培养基制备成功、合格,未受到污染。,(3)怎样判断制备的培养基是否合格、成功,是否受到污染?,答案,拓展应用,1.某学校开展大肠杆菌培养活动,首先对实验室进行清扫和消毒处理,然后准备各种原料和用具。请回答下列问题: (1)对买回来的菌种进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料: 。 (2)微生物在生长过程中对各种成分需求量不同,配制培养基时各成分要有合适的 。在烧杯中加入琼脂后要不停 ,防止 。 (3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干支试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭菌。灭菌完毕后拔掉电源,待压力表的压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应 。,牛肉膏、蛋白胨、蒸馏水、NaCl、琼脂,比例,搅拌,琼脂糊底引起烧杯破裂,高压蒸汽灭菌锅,废弃,答案,2.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基,关于倒平板的具体描述正确的是 待培养基冷却至40
4、 左右时,在酒精灯火焰附近倒平板 将灭过菌的培养皿放在桌面上,左手拔出棉塞 右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰 用左手的拇指和食指完全打开皿盖 右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖 等待平板冷却510 s,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上 A. B. C. D.,答案,解析,问题导析,问题导析 (1)培养基灭菌后,需冷却至 左右时才能倒平板,原因是琼脂在44 以下凝固。 (2)倒平板的过程要在 附近进行。,答案,返回上页,酒精灯火焰,50 ,返回上页,解析 琼脂是一种多糖,在98 以上可溶解于水,在44 以下凝固,倒平板时高于50 则会烫手,低于50 时若不能及时操作,琼脂会凝固。无菌操作应贯穿于操作的全过程,皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。等待平板冷却凝固(大约需510 min)后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。,答案 要对培养基进行高压蒸汽灭菌,对培养皿进行干热灭菌,酒精灯火焰旁属于灼烧灭菌。,一题多变 倒平板的过程需要进行无菌操作,在培养基的制备过程中,还有哪些环节需要进行无菌操作?,答案,二、微生物的分离与纯化技术,基础梳理,1.纯化大
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