ifs转基因大豆的鉴定及高异黄酮植株的筛选
12页1、IFS 转基因大豆的鉴定及高异黄酮植株的筛选 祁延萍 刘雅婧 许乐义 王凌妍 朴哲主 崔光赫 闫帆 王庆钰 吉林大学植物科学学院 摘 要: 大豆异黄酮是一种广泛应用的保健性活性物质, 近年来已成为衡量大豆品质的重要指标之一。异黄酮合酶是大豆异黄酮合成途径中的关键酶基因之一, 其在植物中的表达效率直接影响异黄酮含量。为进一步验证该基因的功能并获得高异黄酮稳定遗传转基因植株, 本试验基于已有的 IFS 转基因材料开展研究。将其扩繁至 T2 代, 考种分析植株农艺性状, 发现转基因植株的性状指标未发生明显变化, PCR 鉴定 IFS 转基因后代的结果显示:在 125 株转基因植株中, 60 株为阳性, 占比 48%, 说明 IFS 在后代中可稳定遗传。选取 IFS 转基因吉林35、Willimas 82 品种 T2 代的 41 株, 利用改良后的三波长法测定籽粒中大豆异黄酮的含量, 结果显示:IFS 转基因植株的平均异黄酮含量为 1.2 mgg-1;其中 15 株的异黄酮含量高于非转基因植株, 占比达到 36.6%, 说明从转入 IFS 基因转基因大豆能够筛选出高异黄酮植株。本研究获得了稳定
2、遗传的高异黄酮植株, 为大豆遗传育种提供优异的种质资源;改良后的三波长法较原有方法更为精准、快速。关键词: 大豆; IFS; 异黄酮含量; 三波长法; 作者简介:祁延萍 (1995-) , 女, 学士, 主要从事大豆分子育种研究。E-mail:。作者简介:王庆钰 (1963-) , 女, 博士, 教授, 主要从事基因工程在育种上的应用与植物杂种优势的理论及其应用研究。E-mail:。收稿日期:2017-04-27基金:吉林大学大学生创新创业训练计划 (2015821253) Identification of IFS Transgenic Soybean and Selection of Plant with High IsoflavonesQI Yan-ping LIU Ya-jing XU Le-yi WANG Ling-yan PIAO Zhe-zhu CUI Guang-he YAN-Fan WANG Qing-yu College of Plant Science, Jilin University; Abstract: As a healthy active substan
3、ces, soybean isoflavones have obvious effects in the prevention of cancer, osteoporosis, cardiovascular disease and womens climacteric syndrome.IFS is one of the key enzymes in the pathway of isoflavone biosynthesis and it had a positive effect on the content of isoflavones in soybean seeds, but we still havent get stable and efficient transforms.Therefore, it is very important to improve the content of soybean isoflavones by studying isoflavone synthase pathway.In this study, after propagating
4、IFS transgenic plants to T2 generation, physiological indexes in transgenic plants had no obviously changes by agronomic traits analyzing.After identifying IFS transgenic soybeans by RT-PCR analysis, there were 60 IFS transgenic soybeans in 125 plants, accounting for 48%.This result indicated that IFS was stablily inherited in offspring.We used the modified three wavelength method to measure the isoflavone content and results showed that the average isoflavone content was 1.2 mgg-1 in IFS transg
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