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精编制作油镜使用及革兰氏染色PPT课件

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卖家[上传人]：ahu****ng2

文档编号：127226328

上传时间：2020-03-31

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19 金贝

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常见问题

1、显微镜的使用教学目标掌握油浸镜的使用原理二染色原理和油镜的工作原理 1 油镜工作原理油镜的放大倍数最大 100 故镜头焦距短直径小但所需光照强度却最大从标本片透过的光线是从玻片进入空气再进入镜头由于玻璃和空气的介质密度不同有些光会因折射或反射而不能进入镜头物象就显现不清为了不使通过的光线有所损失须在油镜与玻片之间加入折射率和玻璃 n 1 52 相仿的香柏油 n 1 515 故而称之为油镜转换器其上装置各种不同放大倍数的物镜用以转换物镜至使用位置上聚光镜位于载物台的下方可以上下移动以使光线集中于检查的标本上光圈位于聚光镜之下可以放大和缩小用以调节进入聚光镜的光量四显微镜的使用1 取显微镜右手握镜臂左手托住镜座 2 打开电源调节反光镜使射入镜头光线最强 3 上提集光器 4 打开光圈 5 将标本片放在载物台上用片夹固定 6 调节转换器先使低倍镜对准中央寻找适宜的视野 7 于标本片的欲检部位滴加香柏油 8 然后转换油镜镜头使其对准中央 9 两眼对准目镜向上转动粗调节器直至见到模糊物像为止 10 转动细调节器直至物像完全清晰

2、为止将载物台降至最低取下标本片将光量调至最小关上电源擦试镜头先用干擦镜纸擦掉香柏油再用滴加少量乙醚的擦镜纸擦试最后再用干擦镜纸擦拭 4 低倍镜对准中央 5 将显微镜放入镜箱还原显微镜的维护 3 3 革兰氏染色法革兰氏染色法将细菌分为G 和G 这由两类细菌细胞壁的结构和组成的不同而决定用结晶紫初染后所有的细菌都染上蓝紫色碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫碘的复合物增强了染料与菌体的结合力用乙醇脱色处理时两类细菌的脱色效果是不同的 G 细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成且壁厚类脂含量低用乙醇脱色时使细胞壁脱水网状结构孔径缩小通透性降低使得结晶紫碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内虽经洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝紫色 G 细菌则不同由于其细胞壁肽聚糖层较薄脂含量高所以在脱色处理时类脂被乙醇溶解细胞壁的通透性增大使结晶紫碘的复合物比较容易被洗脱出来用复染剂复染后细胞被染上复染剂的颜色 3 4 实验器材1 显微镜香柏油接种环酒精灯等 2 结晶紫染液 I 碘液 II 95 乙醇 III 稀释的石碳酸复红染液 IV

3、3 菌种大肠杆菌金黄色葡萄球菌方法与步骤涂片干燥固定染色洗涤干燥镜检 3 5 实验步骤 1 涂片取一块载玻片用记号笔划分出两区域并做上记号在两区域中央各滴半滴生理盐水用接种环以无菌操作法分别取两种菌种在左右两滴盐水中和匀后涂成薄膜 2 干燥室温自然干燥或吹干 3 固定涂面朝上通过火焰2 3次 4 染色在涂片薄膜上滴加结晶紫染液使之覆盖2分钟 5 水洗傾倒去染液斜置载玻片用洗瓶小水流沿玻片边缘冲洗直至水呈无色为止 3 6 6 媒染加媒染剂碘液使之覆盖1分钟水洗 7 脱色滴加95 乙醇数滴立即水洗 8 复染复红液复染30s 1分钟水洗吸干注意事项 1 涂片不宜过厚否则难以干燥 2 涂片时滴加无菌水不宜多否则难以干燥 3 固定时通过火焰速度宜适度过快达不到固定目的过慢易使菌体变形绝不能在火焰上烤招致原形毁坏 4 标本必须干燥才能置于油镜下观察 3 7 实验结果观察两种细菌的形态和颜色绘出油镜下细菌形态图说明革兰氏染色的结果思考题 1 通过实验你认为革兰氏染色成功关键是那一步为了避免假阳性或假阴性出现在对未知菌种做革兰氏染色鉴定时你认为应该怎样做 2 使用油浸镜时为什么要用香柏油请写出实验报告复习题使用油浸镜时为什么要用香柏油请写出实验报告

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