阪崎肠杆菌显色培养基说明
3页1、中文名称:阪崎肠杆菌显色培养基英文名称:Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar用 途:供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。(GB4789.40-2010和 SN/T 1632-2005,ISO 标准)图鉴:原 理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物 5-溴-4-氯-3-吲哚-D 葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的 -葡萄糖苷酶发生反应,水解底物,释放出 5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团,在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。配方(每升):胰蛋白胨 15g大豆蛋白胨 5g氯化钠 5g柠檬酸铁铵 1g脱氧胆酸钠 1g硫代硫酸钠 1g5-溴-4-氯-3-吲哚-D 葡萄糖苷 0.1g琼脂 15g最终 pH 7.30.2包装:使用方法:1. 取瓶内干粉 43.1克,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121高压灭菌 15min;冷却至 50,摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光
2、,4)。2. 取样品 333克按 MPN三管法分别取 100克、10 克和 1克分装在各三个2000ml、250ml 和 100ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经 45预热的9/10(样品为 1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水,摇匀,在 36培养 18-22小时(SN 和 FDA方法)。3. 各取 10ml上述悬浮液加到装有 90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的 150mL的三角瓶中,在 36/44增菌培养 18-22小时。4. 用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上,35-37培养 18-24小时。5. 可使用 MicrogenTMGN-ID或 API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后 361培养 18-24小时生长情况如下表:质量控制质控菌株接种量(cfu/平板)生长情况菌落色泽阪崎肠杆菌 ATCC51329 30 300良好 绿-蓝绿色普通变型杆菌 HK713230 300 良好 灰黑色粘质沙雷伯氏菌 HK7121 5000不长-粪肠球菌 ATCC29212 5000不长-贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规 格:可配置 1L的培养基干粉。
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