植物组织培养中的污染及防治措施
3页1、植物组织培养中的污染及防治措施 植物组织培养中的污染及防治措施 摘要:控制污染是植物组培苗工厂化生产中重要的技术环节。该文主要污染的原因、外植体的选取与消毒、组织培养过程中各环节操作等方面,讨论了减少污染的措施和方法。 关键词:植物组织培养 污染 防治 0 引言 植物组织培养又称植物克隆,指通过无菌操作把植物的外植体接种于人工配制的培养基上,在人工控制环境下进行离体培养的一套技术。植物组培苗的工厂化生产在我国发展速度很快,组织培养技术日趋完善,在市场竞争中,如何降低成本是提高经济效益的首要问题,组织培养中污染率的增加势必引起组培苗成本的提高,经济损失很大。因此,组织培养中降低污染率是工厂化生产中不可忽视的技术环节。植物组织培养过程中造成污染的原因是多方面的,应根据具体情况从不同方面预防解决。 1 污染的原因 污染是指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌,导致培养失败的现象。在培养过程中污染是经常发生的。污染的原因,从病原菌方面来分析主要有细菌及真菌两大类。真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接种后3-10d可在培养基中发现各种颜色的菌斑。真菌性污染,一般多由接种室内的空气不洁净、超
2、净工作台的过滤效果不理想、操作不慎等原因引起。细菌性污染的主要症状是材料附近出现黏液状物,或在材料附近的培养基中出现混浊和云雾状痕迹。一般在接种后1-2 d即可发现。细菌性污染除外植体带菌或培养基灭菌不彻底外,主要是操作人员的不慎造成。除要求操作人员严格按照无菌操作程序操作外,外植体带菌引起的污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理方法及消毒方法等密切相关。【1】 2 污染的预防措施 2.1 外植体 外植体的选取和预处理首先应控制外植体采摘的季节、时间和部位。外植体一般在材料休眠末期或萌动前期取材较为有利,因为此时材料积累了较丰富的营养和内源激素,其抵抗病菌的能力较强、同时病菌也还未活跃起来。其次应选取无病毒的外植体,如外植体带有病毒,则应采取预栽管理、促发新枝、黄化处理、热击处理、添加抗生素等措施进行处理,以培养出无病毒的外植体。 外植体的灭菌处理外植体采摘后,通过表面灭菌、深灭菌或其他处理去除所带病菌,这也是接种前的重要工作。外植体消毒常用的药剂有:70-75% 的乙醇溶液,0.1%-0.2%的升汞溶液、漂白粉的饱和溶液。(1)表面灭菌。先将采摘外植体洗去泥土,用洗洁剂浸泡、冲洗
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