巧克力培养基配制标准操作规程
2页巧克力培养基配制标准操作规程1目的规范巧克力培养基配制标准操作规程,保证培养基质量。2原理流感嗜血杆菌生长依耐血液中的X及V因子,当培养基加热至8090时,可使血液中的红细胞破裂释放出X及V因子,以利用嗜血杆菌的生长培养。3用途主要用于嗜血杆菌的分离培养,亦可用于奈瑟菌的增值培养。 4配方牛肉浸出液1000ml、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂5g、无菌脱纤维羊血100ml,pH7.27.4。5.操作步骤将前4项成分混合,加热溶化,校正pH,121高压灭菌15分钟,冷却至8085,以无菌技术加入羊血,摇匀后置8085水浴中,维持15分钟,使之成巧克力色取出,倾注平板,待凝固后冷藏备用。6.储存条件28冰箱。7.有效期实验室自行规定,确保培养基质量。8. 质量控制8.1 质控频度 每次新配制时做质控8.2 质控方法及结果见表5-19.表5-18 配制巧克力琼脂培养基质量控制方法及结果试验方法结果无菌试验生长试验平行试验100块随机取10块,35,CO2培养2448小时流感嗜血杆菌ATCC10211,35,CO2培养1824小时奈瑟氏菌ATCC43069,35,CO2培养1824小时做质控时,取新旧批号的培养基同时做无细菌生长生长生长9.注意事项水浴温度不宜过高,时间不宜过长,否则X和V因子消耗殆尽;水浴温度也不宜过低,时间也不宜过短,否则X和V因子不能充分释放出来,应控制在8085。
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