2022年DNA的粗提取与鉴定导学案自用2.pdf

课题 1 DNA的粗提取与鉴定导学案学习目标 1. 了解 DNA的物理、化学性质；（重点）2. 理解 DNA粗提取与鉴定的原理；（重点）【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并初步巩固一、基础知识【活动 1】阅读教材P54“基础知识”，讨论并回答下列问题：1（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的的不同进行分离2（记忆） DNA的溶解性特点：DNA在中溶解度不同；DNA不溶于而蛋白质溶于思考 1】据图 51 分析：DNA在不同浓度NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使 DNA溶解，需要使用什么浓度？要使 DNA析出，又需要使用什么浓度？【思考 2】利用 DNA不溶于的原理，可以达到目的3（记忆） DNA的耐受性特点：能分解蛋白质而不能分解DNA ；在时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子4（记忆） DNA的鉴定原理：当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用进行鉴定在条件下，该试剂与DNA反应，呈现二、实验设计：【活动 2】阅读教材P55“实验设计”，讨论并回答下列问题：1（记忆）实验材料的选取：选取材料时应本着、的原则。

思考 3】你认为教材提供的材料中不适合提取DNA 2（记忆）破碎细胞，获取含DNA的滤液：鸡血：向鸡血细胞液中加入一定量并玻棒搅拌，用过滤后，收集洋葱：向研钵中加入一定量和，搅拌研磨，用过滤后，收集思考 4】在以上实验中，蒸馏水的作用是，洗涤剂的作用是，食盐的作用是3（学会）去除滤液中的杂质：方案一： 30mL滤液 加 NaCl 使 DNA溶解 过滤得滤液 加蒸馏水使DNA析出 过滤得过滤物 放到 2mol/LNaCl 溶液中溶解 DNANaCl 溶解液方案二： 30mL滤液加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）静置10 分钟得DNA滤液方案三： 30mL滤液处理过滤得DNA滤液【思考 5】以上三个方案的原理分别是什么？方案一原理：；方案二原理：；方案三原理：思考 6】方案一：“加 NaCl 使 DNA溶解过滤得滤液”的目的是除去 (可溶、不溶 ) 于 NaCl 溶液中的细胞杂质“加蒸馏水使DNA析出过滤得过滤物”的目的是除去 (可溶、不溶 ) 于 NaCl 溶液中的细胞杂质4（记忆） DNA的析出： DNA滤液与混合，静置一段时间后析出的就是 DNA 5（记忆） DNA的鉴定：取 2 支洁净的试管，编号甲、乙，各加入等量的溶液。

甲中放入少量白色丝状物，使之溶解在甲、乙试管中各加4mL ，混合均匀沸水浴5min，观察颜色变化，甲试管呈现色三、操作提示【活动 3】（记忆）阅读教材P56“操作提示”和P57“课题延伸”，关注下列注意事项：1在鸡血中加入防止凝固； 鸡血静置或离心后除去， 以提高细胞悬液浓度2实验中使用和，以免 DNA被吸附3玻棒沿方向搅拌（细胞破裂时快速搅拌），玻棒不要碰到4二苯胺试剂要5为提高DNA纯度，实验中通常使用的洗涤剂有等操作过程及提示：方法步骤加入物质目的1. 制备鸡血细胞液柠檬酸钠2. 提取鸡血细胞核物质20ml 蒸馏水3. 溶解细胞核内的DNA 2mol/L 的 NaCl 溶液4. 析出含 DNA的黏稠物蒸馏水5. 滤取含 DNA的黏稠物6. 将 DNA的黏稠物再溶解2mol/L 的 NaCl 溶液7. 过滤含 DNA的 NaCl 溶液8. 提取含杂质较少的DNA 冷却的 95% 的酒精 50ml 9.DNA的鉴定A:(1)2mol/L的 NaCl 溶液 5ml (2) 加入丝状物（DNA ）(3)4ml 二苯胺B: (1)2mol/L的 NaCl 溶液 5ml (2)4ml 二苯胺总结： 1. 共有“次搅拌、次过滤，次析出”2. 加入“次蒸馏水，次 NaCl 溶液，次酒精”课后巩固：1在 DNA的粗提取和鉴定的实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水，其作用在于（）A前者用来溶解血细胞，后者用来溶解DNAB前者使血细胞吸水破裂，后者用来稀释NaCl 溶液C前者用来分离细胞核与细胞质，后者用来提取DNAD前者使DNA从核中分离出来，后者使DNA析出2为了便于提取鸡血细胞中的DNA ，下列所采取的措施中，最恰当的是：向经抗凝剂处理的鸡血细胞液加入（） A蒸馏水BATP C0.3g/mL的蔗糖溶液D二氧化碳3. 下列不适宜作为DNA提取的实验材料是（） A鸡血细胞 B蛙的红细胞 C猪血 D菜花4 用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理， 可以得到较纯化的DNA 这是因为（）A DNA易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精B DNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精C DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精D DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精5. 在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。

用蛋白水解酶处理血样的目的是（）A.除去血浆中的蛋白质 B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质 D.除去血细胞中的的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯6. 在向溶解DNA的 NaCl 溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（）A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度C.减少 DNA的溶解度，加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出7在沸水浴的条件下，DNA遇（）会被染成蓝色A.斐林试剂 B.苏丹染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺8在 DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（）A.不易破碎 B.减少提取过程中DNA的损失 C.增加 DNA的含量 D.容易洗刷9DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（） ，静置 23min，溶液中会出现白色丝状物A.09% 的 NaCl B.0.14mol/L的 NaCl 溶液C.质量分数15% 的 HCl D.体积分数为95% 的酒精溶液10. 以血液为实验材料时，需要向血液中加入（） ，防止血液凝固A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红11洗涤剂能够瓦解（） ，但对 DNA没有影响A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质12在 DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度和名称分别是（）01 g/ml的柠檬酸钠溶液200mol/L 的 NaCl 溶液014 mol/L的 NaCl 溶液体积分数为95% 的酒精溶液0015 mol/L的 NaCl 溶液0 04 mol/L的 NaCl 溶液AB C D13与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（）A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl 的浓度约为0.14mol/L. 14. 在 DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是( )。

A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl 浓度使 DNA析出C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 15. 下列关于“ DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在 NaCl 溶液中的溶解度B将 DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA 的提取D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获16. 以下是与高中生物实验有关的内容请回答以下问题：观察细胞质流动观察植物细胞有丝分裂探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率生物组织中还原糖的鉴定蛋白质的鉴定脂肪的鉴定叶绿体中色素的提取与分离观察植物细胞的质壁分离与复原DNA的粗提取与鉴定(1) 在上述实验过程中需要水浴加热的是_，需要做临时装片的是_ ，需要用颜色反应确定的是_ ，需要用酒精的实验有_( 以上均填标号) 2) 由于实验材料用品或试剂所限，有时候需要设法替代下列各项处理中正确的是_ A.做实验时 , 可用蒜叶代替洋葱根尖 B.做实验时 ,可用鸡血红细胞代替紫色洋葱表皮细胞 C.做实验时 , 可用干净的细沙代替二氧化硅 D.做实验时 , 可用龙胆紫代替苏丹染液17.回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。

下图为该实验过程中的一些重要操作示意图1) 正确的操作顺序是_2) 上图 C、 E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是_和_3) 上图 A步骤中所用酒精必须是经过_的才能使用，该步骤的目的是_4) 为鉴定 A中所得到的丝状物的主要成分为DNA ，可滴加 _试剂后沸水浴，如果出现 _则证明该丝状物的主要成分为DNA 18. 关于 DNA粗提取的实验材料的选择，经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血作实验材料请据下图回答下列问题1) 鸡血细胞中红细胞_ 家鸡属于鸟类， 新陈代谢旺盛， 因而血液中 _细胞数目较多，可以提供丰富的_2) 实验前由老师提供血细胞液供同学们作实验材料，而不用鸡全血，主要原因是_3) 在牧区采集牛、 羊和马血比较方便，若用该材料按实验要求完成实验步骤后，结果是 _，这是因为这些动物和人类一样，_；但若改用动物肝脏作实验材料，实验能顺利进行，这是因为_4) 若选用动物肝脏作提取DNA的实验材料，在提取之前，最好增加_程序，使组织细胞更易分离。