2018高考生物一轮复习 生物技术实践 专题二 微生物的培养和利用课件（选修1）.ppt

专题二 微生物的培养和利用,[考纲要求] 1．微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用1．微生物的实验室培养 (1)培养基 ①种类→____培养基，____培养基(按物理性质分) ②成分→_____、_____、___、_______、生长因子 (2)制备固体培养基 一般步骤：____→称量→溶化→_____→倒平板考点1 微生物的分离与培养,液体,固体,碳源,氮源,水,无机盐,计算,灭菌,(3)无菌技术 ①消毒→较为温和的物理或化学方法，不能杀死_____和________ ②灭菌→强烈的理化因素，杀死物体内外所有的________，包括______和________ (4)无菌技术的类型、方法及对象(连线),芽孢,孢子,微生物,芽孢,孢子,,,,,,,,,(5)纯化大肠杆菌 _____________；稀释涂布___________ (6)菌种保存 临时保存，4℃(冰箱)；长期保存，________法 2．无菌技术 (1)目的：获得_________________ (2)关键：防止______________的入侵平板划线法,平板法,甘油管藏,纯净的培养物,外来杂菌,1．正误判断 (1)培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏)( ) (2)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013·江苏)( ) (3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(2013·重庆)( ) (4)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质( ),×,×,√,√,(5)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌( ) (6)下图中甲为平板划线法中最重要的环节，乙为操作的结果：,×,①每一次划线后要将接种环灼烧( ) ②除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端( ) (7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落( ),√,×,√,2．如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考。

1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？ (2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？ 提示 (1)获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法 (2)最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灭菌1．消毒和灭菌的不同点,较为温和,不能,强烈,能,2.两种纯化细菌方法优缺点的比较 (1)倒平板的方法及注意事项,a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：______________________ b．甲、乙、丙中的灭菌方法是______________ c．丁中的操作需要等待_____________才能进行丙→乙→甲→丁,灼烧灭菌,平板冷却凝固,(2)常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面_______________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面(如图)连续划线,几种划线方法示意图,b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的____________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

系列稀释操作(如下图所示)：,梯度稀释,涂布平板操作(如下图所示)：,(3)平板划线法与稀释涂布平板法的比较,可以观察菌落特征， 对混合菌进行分离,可以计数，可以 观察菌落特征,3.纯化大肠杆菌的方法 (1)纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种 (2)纯化大肠杆菌的关键步骤：________接种,1．微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：,(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为________________，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑________________、________________和渗透压等条件 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染对于固体培养基应采用的检测方法是____________________________________________________________________________________________ 3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→________________(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作________________、________________(用字母表示)。

解析 (1)上图甲所示的实验操作步骤之一为倒平板，若用该培养基培养大肠杆菌，还要考虑温度、氧气、pH和无菌操作等一系列相关条件2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，因此要设置对照实验，对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，若有则说明培养基已被污染，应重新配制培养基进行实验3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→G→F→E→C→D→H；图乙中两处错误的操作是C：未在酒精灯火焰旁进行操作，D：将第五区域内的划线与第一区相连答案 (1)倒平板 温度(氧气) pH(无菌) (2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)G→F→E→C→D→H C D,2．(原创题)中国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大看似干净的洗衣机，其内部隐藏着一个健康的隐形杀手某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验室实验 (1)培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有________________________________。

(2)鉴定洗衣机污垢中是否有菌落时要制备固体培养基，在制备完毕后要进行倒平板操作，将平板倒置这样做的目的是_____________________________ 3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手其中需要消毒的是________________，需要灭菌的是________________ (4)检验污垢中是否含微生物时，要将污垢制成水样稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为______________下图所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是____________用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？________________为什么？_________________ ______________________________________ (5)判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的______________________实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是____________________。

解析 (1)培养微生物的培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐2)倒置平板的目的是防止皿盖上凝有的水珠落入培养皿造成污染，同时还可使培养基表面的水分更好地挥发3)实验者的双手需要进行消毒处理，培养皿、培养基及其他实验器材等需要进行灭菌处理4)本题中将污垢水样接种在培养基上的方法为稀释涂布平板法D属于利用平板划线法得到的菌落分布利用稀释涂布平板法统计菌落数时需要设置对照组，将一个未接种污垢水样的培养基放在相同条件下培养，以此判断培养基是否被杂菌污染5)污垢中的微生物种类可以根据菌落的形状、大小等进行初步分类实验结束后，为防止污染环境，应对用过的培养基进行灭菌处理后再倒掉 答案 (1)水、碳源、氮源和无机盐 (2)防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发 (3)③ ①② (4)稀释涂布平板法 D 需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格) (5)鉴定(或分类) 防止造成环境污染,3．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题1)图甲是利用________________法进行微生物接种，图乙是利用____________法进行微生物接种。

这两种方法所用的接种工具分别是____________和____________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________________和酒精消毒 (2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？______________________________________________________________________ 3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？________________________________ _______________________________________________________________________________________________________________ (4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________________(填“图甲”或“图乙”)解析 图甲和图乙分别是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布器由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。

答案 (1)平板划线 稀释涂布平板 接种环 涂布器 灼烧灭菌 (2)火焰附近存在着无菌区域 (3)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长 (4)图乙,1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成_______，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_________作用 (2)统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用________________法 (3)实验流程：土壤取样→____________→微生物的培养与观察→细菌的________考点2 微生物的筛选和计数,脲酶,催化,稀释涂布平板,样品的稀释,计数,2．分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶 ①组成：一种______________，它至少包括三种组分，即____________________________复合酶,C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,纤维二糖,(2)筛选原理,红色消失，出现________透明圈,(3)筛选方法 ①方法：刚果红染色法，即通过是否产生_______来筛选纤维素分解菌 ②培养基：以________为唯一碳源的选择培养基 (4)实验流程 土壤取样→选择培养→___________→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生_________的菌落,透明圈,纤维素,梯度稀释,透明圈,1．正误判断 (1)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法( ) (2)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源( ) (3)分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低( ) (4)纤维素是构成植物细胞壁的主要成分，在纤维素酶的作用下，纤维素可以水解成葡萄糖( ),×,√,×,√,(5)刚果红可以与纤维素形成透明复合。