北京市高考生物专题复习 专题26 生物技术实践课件 新人教版-新人教版高三全册生物课件.ppt

专题26生物技术实践考点1微生物的培养、分离与数量测定1.(2016江苏单科,25,3分)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是(多选)()A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化D.斜面培养基中含有大量营养物,可在常温下长期保存菌株五年高考答案BC产漆酶的微生物主要生活在木质素含量较高的环境中,生活污水中含有大量的微生物,不是分离产漆酶菌株的首选样品;筛选产漆酶微生物的培养基中应加入木质素等漆酶降解的底物,因不同菌种的菌落特征不同,故可通过菌落特征挑选产漆酶的菌落;图示显示,通过涂布平板法进行初步筛选,再通过平板划线法进一步纯化;微生物长期保存应用甘油管藏法,保存温度为-20知识归纳微生物纯化方法:常采用选择培养基,用稀释涂布平板法、平板划线法纯化微生物用稀释涂布平板法接种的微生物经培养后,其菌落在培养基上接近均匀分布,且该接种法可以对微生物活菌计数解题关键解答本题关键是对选择培养基的理解。

培养基中加入的物质是用来选择分离产漆酶菌株的,依据题干中的信息可判断需向培养基中加入漆酶的底物另外,根据图示分析分离菌株的方法:稀释涂布平板法、平板划线法;保存菌株有两种方法:斜面保存(低温)和甘油管藏2.(2013安徽理综,6,6分)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图下列叙述正确的是()A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D.放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置答案D本题主要考查微生物的计数和DNA分子杂交等相关知识根据培养皿中菌落数只能估算样品中含有的活菌数目;外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能够进行转录;重组质粒与探针因碱基互补配对能进行分子杂交;用放射性标记的DNA探针与特定DNA分子杂交后,洗去未结合的探针,放射自显影结果可以显示原培养皿中含特定DNA的细菌菌落位置3.(2013江苏单科,18,2分)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理下列叙述正确的是()A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次答案B本题考查了微生物实验室培养的相关知识。

培养基灭菌后再分装到培养皿中;转换划线角度前要灼烧接种环,冷却后再从上次划线的末端开始进行划线;接种后的培养皿需放在恒温箱中进行培养,一般每隔12h或24h观察一次4.(2017课标全国,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定解析(1)能分解尿素的细菌体内应含有脲酶;能分解尿素的细菌是异养型生物,不能利用CO2来合成有机物,可用葡萄糖等有机物作为碳源。

进入细菌体内的葡萄糖既能为细胞生命活动提供能量,又可为其他有机物的合成提供原料2)筛选可分解尿素的细菌,应选择以尿素为唯一氮源的培养基,而能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,其他两组不能起到筛选作用3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,这两种物质既可为细菌生长提供无机营养,又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH相对稳定5.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐,以达到富集酚降解菌的目的若上图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分离制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为。

管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:51020)倍后,再进行比色答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8解析本题考查微生物分离的相关知识1)酚降解菌培养基中的蛋白胨和苯酚为酚降解菌生长提供碳源2)转接的目的之一是富集降解苯酚能力强的酚降解菌,随转接次数增多,培养基中的苯酚含量应逐渐增加若平板中菌落过于密集,则需进一步稀释,降低菌体密度后再涂布培养,以便于菌落分离与计数制备平板培养基时,需添加琼脂等凝固剂3)连续划线时,在划线的末端菌体密度最低,即在划线的末端最易获得单菌落4)1号比色管应为空白对照组,由6号比色管中苯酚浓度知,15号比色管苯酚浓度应为0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L废水为50mg/L苯酚溶液,降解后残留的苯酚浓度约为5021%=10.5(mg/L),则需对残留液进行20倍稀释后10.520=0.525(mg/L),才可以进行比色6.(2016四川理综,10,12分)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图乙是脲酶基因转录的mR-NA部分序列。

图甲图乙(1)图中选择培养基应以为唯一氮源;鉴别培养基还需添加作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成色2)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191该过程采取的接种方法是,每克土壤样品中的细菌数量为108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活,突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸,使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)突变基因转录的mRNA中,终止密码为,突变基因表达的蛋白含个氨基酸答案(12分)(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75少(3)UGA115解析(1)脲酶由分解尿素的细菌产生,故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,故培养基中加入酚红指示剂后,菌落周围将出现红色2)稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数,在计数时一般选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值每克样品中的菌株数=(C/V)M。

因培养基上两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故统计结果往往较实际数目少;而用血细胞计数板计数时,死亡的、活的菌体都计数在内3)乙图显示,mRNA在箭头以前有273个核苷酸(为91个密码子),箭头处增加的70个核苷酸与后续的AG刚好组成24个密码子,后面的UGA为终止密码突变基因表达的蛋白质含91+24=115(个)氨基酸知识归纳微生物菌体计数方法通常有稀释涂布平板法、显微镜直接计数法、滤膜法等稀释涂布平板法为活菌计数法,显微镜直接计数的是死、活菌的总数评析本题综合考查了分解尿素的细菌的筛选及基因表达的相关知识,难度适中7.(2015课标,39,15分,0.6127)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产回答有关问题:(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用染色微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培养基进行培养3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用直接计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。

4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35、40、45温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,条件下该酶活力最小为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕设计后续实验答案(15分)(1)苏丹(或苏丹)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)解析本题主要考查了植物油脂的染色和提取方法、选择培养基的配制、微生物的计数以及确定酶的最适温度的实验设计等1)脂肪可用苏丹染液(或苏丹染液)进行染色微生物A产生的油脂不易挥发,不能用水蒸气蒸馏法提取,应用萃取法加以提取2)能产生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物种子的腐烂物的土壤中,为了选择培养,固体培养基上应以油脂作为唯一碳源3)测定培养液中的微生物的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数;而要测定活菌数,则可利用稀释涂布平板法进行计数4)酶量需要最多的温度下,其酶活力最小,即酶活力最小的温度应为45三个温度下酶活力最大的温度是40,但40不一定是该酶的最适温度,故应围绕40设计后续实验以下为教师用书专用8.(2015江苏单科,19,2分)做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上答案D本题考查微生物的分离与培养的相关知识。

高压灭菌加热结束时,需先切断电源,让灭菌锅内温度降至100以下,压力表的指针回到零时,再打开锅盖,A错误;倒平板时,应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不能将培养皿盖完全打开,以防污染,B错误;接种环经火焰灭菌后需待冷却后挑取菌落,C错误易错分析错选的学生对高压灭菌锅使用方法不了解,未经过规范的操作训练高压灭菌通常采用的温度为121,灭菌刚结束时灭菌锅中的液体温度都超过100,必须通过缓慢降温、降压如未能充分冷却,锅内尚有剩余压力,打开放气阀会使锅内压力骤减,液体就会发生爆沸,冲出容器9.(2016课标全国,39,15分)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况实验步骤如下:配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);制作无菌平板;设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;将各组平板置于37恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数回答下列问题:(1)该培养基中微生物所需的氮来源于若要完成步骤,该培养基中的成分X通常是2)步骤中,实验组的操作是3)若在某次调查中,某一。