西医综合考研——分子生物学笔记及习题.doc

一、 判断题1、 鞘磷脂的代谢过程主要与细胞质膜的流动有关与细胞生物活性分子的生成调节无关2、 蛋白质的修饰与其运输和定位有关，而与其降解代谢无关3、 蛋白质的豆蔻酰化是蛋白质脂肪酸化的一种形式4、 可逆性膜锚定与蛋白激酶参与的信号转到有关，而与 G 蛋白（如 Ras）参与的信号转导无关5、 蛋白质溶液出现沉淀与蛋白质变性存在必然的关系6、 Km 值是酶的特性常数之一，与酶的浓度、pH、离子强度等条件或因素无关7、 一个酶的非竞争性抑制剂不可能与底物结合在同一个部位8、 蛋白质泛素化（ubiquitination）过程需要三种蛋白质（酶）的参与，其中之一是泛素--蛋白 连接酶9、 往线粒体悬液中加入 NADH 可以还原线粒体的辅酶 Q10、 膜上有些七次跨膜受体在与配基结合时会形成二体11、 低浓度不含钾离子的等渗缓冲液中悬浮着内含 0.154M 氯化钾的脂质体，此时往悬浮液中加入 缬氨霉素，悬浮液的 pH 会下降12、内质网系膜结合的钙 ATP 酶在催化 ATP 水解时促进 Ca+/2H+交换13、辅酶 I（NAD+ ）、辅酶 II（NADP+）、辅酶 A（CoA）、黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二 核苷酸（FAD）中都含有腺嘌呤（AMP）残基。

14 端粒酶（telomerase）是一种 RNA 蛋白质复合物，其作用机制是以 RNA 为模板，由蛋白质催化 逆转录; 所以广义上说，端粒酶是种逆转录酶15、Tm 是 DNA 的一个重要特性，其定义为：使 DNA 双螺旋 90％解开时所需的温度16、 与 DNA 双螺旋相反方向缠绕而形成的超螺旋叫做“负超螺旋”17、 细菌中的插入序列（IS）具有转座能力，能随机插入到任一 DNA 序列中，在靶点两侧形成一 段短的正向重复序列18、 细菌代谢酶的诱导和合成途径中酶的阻遏，调节蛋白都对操纵子起负调控作用19、 真核 RNA 聚合酶 II 最大亚基 C 末端重复序列上的乙酰化导致 RNA 聚合酶 II 与其它转录的起 始与延伸20 卫星 DNA 是一类高度重复序列，通常由串联重复序列组成二、选择题：30 题，30 题，每题 1.5 分，共 45 分.1、磷脂分子的代谢可直接产生A.肌酸；B.氨基酸；C.甾体激素；D.信号传导分子2、鞘磷脂分子的代谢不产生A．磷脂酰肌醇；B，神经酰胺；C，鞘胺醇；D，乙酰胆碱3.直接受 cAMP 调节的分子是A 蛋白激酶 C；B，蛋白激酶 A； C，蛋白激酶 G；D 蛋白激酶 B4 体内一氧化氮合成前体是A，脂类分子；B，核苷酸；C，精氨酸；D，尿素5 一氧化氮的受体是一种A，G 蛋白偶联受体； B，腺苷酸氧化酶；C，鸟苷酸环化酶；D,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶6，对于一个正协同效应别构酶当有激活剂（正调节物）存在下，其协同性A，减小；B，增加；C，不变7，亲核催化中酶蛋白上最常见的提供亲核基团的残基是A，His，Ser，Cys；B，His，Lys，Arg； C，Asp，Glu，Phe；D，Asn，Gln，Trp8，“自杀性底物”指的是A，一种可逆抑制剂；B，一种亲核标记试剂；C，一种不可逆抑制剂。

9，表面生长因子（EGF）受体和转化生长因子 β（TGFβ）受体A，皆为蛋白酪氨酸激酶；B，皆为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶；C，分别为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶和 蛋白酪氨酸激酶；D，分别为蛋白酪氨酸激酶和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶10，磷酸果糖激酶是葡萄糖酵过程中最关键的调节酶，ATP 与该酶的关系A，既是底物又是别构激活剂 ； B，既是底物又是别构抑制剂；C，只是底物；D，只是别构抑制剂11，底物分子上引进一个集团以后，导致酶与该底物结合能增加，此时酶反应速度增大，原因是A，增加的结合能被用来降低 Km；B，增加的结合能被用来增加 Km；C，增加的结合能被用来降低反 应活化能；D，增加的结合能被用来增加反应活化能12，在接近中性 pH 条件下，即可为氢离子受体，也可为氢离子供体的基团是A． His-咪唑基 ； B，Cys-巯基；C，Lys-ε-氨基； D，Arg-胍基13，细胞质内蛋白质浓度为（W/V)为A，0.1%左右；B，0.5%左右 C，2.5%左右 D，＞10%14，细胞色素 C 的 pIA,lO5)卫星 DNA(Satellite DNA)(二)中度重复序列1．中度重复序列的特点①重复单位序列相似，但不完全一样，②散在分布于基因组中．③序列的长度和拷贝数非常不均一，④中度重复序列一般具有种属特异性，可作为 DNA 标记．⑤中度重复序列可能是转座元件(返座子)，2．中度重复序列的分类①长散在重复序列(long interspersed repeated segments．) LINES②短散在重复序列(Short interspersed repeated segments) SINESSINES：长度105．如人 Alu 序列LINEs：长度>1000bp(可达 7Kb),拷贝数 104-105，如人 LINEl (三)单拷贝序列(Unique Sequence)包括大多数编码蛋白质的结构基因和基因间间隔序列， 三、基因家族(gene family)一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因．可能由某一共同祖先基因(ancestral gene)经 重复(duplication)和突变产生。

基因家族的特点：①基因家族的成员可以串联排列在一起，形成基因簇(gene cluster)或串联重复基因(tandemly repeated genes)，如 rRNA、tRNA 和组蛋白的基因；②有些基因家族的成员也可位于不同的染色体上，如珠蛋白基因；③有些成员不产生有功能的基因产物，这种基因称为假基因 (Pseudogene)．Ψa1 表示与 a1 相 似的假基因． 假基因分类加工过的假基因(processed pseudogene) 典型的基因家族 1．tRNA 基因 单倍体人基因组中 1300 个 tRNA 基因，tRNA 基因簇． 2．rRNA 基因>l00copy．rRNA 基因簇(重复单元 28S、18S、5.8s-rRNA) 3．组蛋白基因30-40copy．定位：7q32-q36组蛋白基因簇(重复单位：H1，H2A，H2B，H3、H4)特点：无 intron，Poly(A)- RNA． 4．珠蛋白基因α 类：16p13，基因簇(24Kb)：5’—ζ—Ψζ—Ψα1—α2—α1—3’β 类：11p15，基因簇(60Kb)：5’— ζ—Gr—Ar—Ψβ—δ—β—3’ 四、超基因家族(Supergene family ，Superfamily)由基因家族和单基因组成的大基因家族，结构上有程度不等的同源性，但功能不同． 五、人类基因组中的重复序列标记 1、A1u 序列 单倍体人基因组 50 万-100 万拷贝，平均每隔 3-6Kb 就有一个 Alu 序列，人 A1u 序列长 300bp：2X130bp 重复序列； +31bp 间隔序列(中间)；两侧 7-21bp 正向重复(direct repeats)，返座子?Alu 序列广泛散布于人基因组，约 90%巳克隆的人基因合有 Alu 序列Alu 序列标志。

2、可变数串联重复 · ， ·Variable number tamdem repeat， VNTR．又称小卫星 DNA(minisatellite DNA)由短重复单位(6-40bp)串联重复(6-100 次以上)而成，多位于基因的非编码区，广泛分布VNTR 多态性—分子标记—DNA 指纹图（fingerprint）.小卫星 DNA 突变与肿瘤，H-Ras 3、短串联重复（short tandem repeat,STR）又称微卫星 DNA（microstallite DNA）2-6 个核苷酸组成的重复单位串联重复(10-60 次),两侧为特异的单拷贝序列，人基因组中每 l0kb DNA 序列至少一个 STR 序列{CA)n，50，000-100，000 拷贝．新一代遗传标记，人类基因组研究，肿瘤，遗传病． 第三节 线粒体基因组 人线粒体基因组的特点： 1、人线粒体基因组为 16，569bp 的双链闭环分子，一条链为重链(H 链)，一条链为轻链(L 链)，两 条链均有编码功能，每个 mtDNA 分于编码 13 种蛋白质和 24 种结构 RNA(22rRNA，2tRNA)．2、线粒体 DNA 为母系遗传．3、结构基因不含内含子，部分区域有基因重叠，因此病理性 mtDNA 突变更易发生．4、mtDNA 突变频率更高．5、线粒体 DNA 突变的表型表达与核 DNA 不同。

第四节 细菌和病毒基因组 一、细菌基因组的特点1．功能相关的几个结构基因往往串联在—起，受它们上游的共同调控区控制，形成操纵子结 构，2．结构基因中没有内含子，也无重叠现象3．细菌 DNA 大部分为编码序列 二、病毒基因组的特点1．每种病毒只有一种核酸，或者 DNA，或者 RNA；2．病毒核酸大小差别很大，3X103 一 3X106bp；3．除逆病毒外，所有病毒基因都是单拷贝的4．大部份病毒核酸是由一条双链或单链分子(RNA 或 DNA),仅少数 RNA 病毒由几个核酸片段组 成． 5．真核病毒基因有内含子，而噬菌体（感染细菌的病毒）基因中无内含子．6．有重叠基因． 第五节 染色质和染色体 细胞分裂间期—染色质(chromatin)分裂期—染色体(chromosome) 一、染色质的基本单位—核小体 (一)核小体(nucleosome)结构DNA 绕在组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3、H4 各一对)核心外 1.8 周(146bp),形成核小体核心颗粒两个核小体核心颗粒之间有 Linker DNA(0-80bp)，核小体核心颗粒+Linker=核小体(长 180-210bp)核小 体 DNA Ladder． (二)组蛋白(histone)：一类小的带有丰富正电荷5%的人基因可在不同的组织或生理状态下，通过选择性剪接产生不同的蛋白质异构体，这是造成 真接生物高度异质性的基础。

第四节 翻译水平调控 一、翻译起始因子(IF)的调节：可逆磷酸化的作用．1．eIF-4F 的磷酸化激活蛋白质的合成．2．eIF-2 的磷酸化引起翻译起始受阻，降低蛋白质的生物合成水平 二、mRNA 结构与翻译控制 （一)5’-UTR 结构1、mRNA5’端 m7G 帽有增强翻译水平的作用． 2、“上游 AUG 密码子”(位于起始 AUG 上游的其他 AUG 密码子)的存在往往抑制下游开放读框的翻 译效率． 3、起始 AUG 旁侧序列对翻译效率的影响．Kozak 序列：GCCAUGG (二)3’-UTR 结构1．poly(A)尾增加翻译效率2．富含 UA 序列抑制翻译 三、mRNA 稳定性与翻译控制mRNA 稳定性主要取决于 3’—UTR 结构1．poly(A)尾增加 mRNA 稳定性，2．3’-UTR 中 UA 序列导致 mRNA 不稳定． 四、翻译后修饰1.氨基酸侧链的共价修饰：乙酰化、磷酸化、糖基化（N-、O-）；2,蛋白质前体的切割和成熟Proprotein→protein.例：胰岛素的成熟 五、蛋白质的分泌和胞内定位信号肽：作为蛋白质定位信号的短肽序列，指导蛋白质运输到正确位置，定位结束后通常被特异 的信号 肽酶切除。

常见几种信号肽的特点： 1 内质网和细胞分泌信号：N-端约 20 个左右氨基酸，疏水 2 线粒体定位信号：N-端，一面为正电残基另一面为疏水残基的两亲 α 螺旋 3 核定位信号：内部，常为碱性氨基酸加脯氨酸链两部分构成 如 SV40 T 抗原：pro-lys-lys-lys-Arg-lys(127-132)第四章 原癌基因与抑癌基因 第一节 概述病毒致癌作用，病毒癌基因 Viral oncogene，V-o。