消毒与灭菌_1课件

1、第四章 消毒与灭菌,四川大学华西公共卫生学院 王国庆,消毒与灭菌工作的意义？,控制传染病,提高产品质量,保证生物安全,第一节 基本概念及要求,一、消毒的概念及要求,消毒(disinfection)：杀灭或清除传播媒介上病原微生物,使其达到无害化的处理。,杀灭或清除无生命有机物中的微生物，可以防止其腐败，这种处理称为防腐（antisepsis）。,杀灭人体组织内的微生物属于治疗措施，不属消毒范畴。,消毒技术规范规定,如何确定消毒工作达到无害化的要求？,去除残留消毒剂效果鉴定试验合格 实验室试验结果符合： 悬液定量杀灭试验：杀灭对数5.00 载体定量杀灭试验：杀灭对数3.00 现场试验，自然菌杀灭对数1.0 用于饮用水消毒时，处理后的水符合饮用水卫生标准,杀灭对数值(KL)lg(No)lg(Nx) No: 对照组平均活菌浓度的对数值 Nx: 试验组平均活菌浓度的对数值。,医院消毒（disinfection in hospital）,杀灭或清除医院环境中和物体上污染的病原微生物的过程。,对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒。,疫源地消毒(disinfection of epidemic f

2、ocus),目的是防止医院感染的发生。,目的是杀灭或清除传染源排出的病原体。,（二）特殊消毒概念,随时消毒(concurrent disinfection),疫源地内有传染源存在时进行的消毒。,终末消毒（terminal disinfection）,传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。,目的是及时杀灭或清除患者排出的病原微生物。,“传染病防治法” 要求做终末消毒的传染病有鼠疫、霍乱、伤寒、副伤寒、细菌性痢疾、病毒性肝炎、脊髓灰质炎、肺结核、炭疽。,预防性消毒(preventive disinfection),对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行的消毒。,如：餐具、饮水、公共场所消毒、粪便污水处理等等。,进行预防性消毒，一般都不存在已知的传染源，容易被忽视，因此，必须制定相应制度，以利贯彻执行。,工业消毒、灭菌：在工业生产中防止产品染菌所进行的消毒和灭菌。,如：医疗器械及用品、制药、生物制品和食品等工业。 目的：防止产品作为传染病的传播媒介； 防止产品被微生物损坏。 优点：有利于降低成本，提高效益，监测效果，保证质量，提高技术和加强管理。,二、灭菌的概念及要求,灭菌(steriliza

3、tion)是指杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。,基本灭菌,部分灭菌,灭菌的概念是绝对的，灭菌处理后的物品必须是完全无菌的。,灭菌保证水平 sterility assurance level，SAL,指灭菌处理后单位产品上存在活微生物的概率。,一般为10-6，即在百万件物品中最多只允许有一件物品有活微生物存在。,在大量产品的工业化灭菌标准采用灭菌保证水平表示。,无菌：是指不存在任何微生物的状况。往往是灭菌处理的结果。,商业无菌（commercial sterilization）：指罐头食品经过适度的热杀菌后，不含有致病的微生物，也不含有在通常温度下能在其中繁殖的非致病性微生物。,与灭菌相关的其他概念,无菌操作：是指在无菌状态下的操作，如外科手术或注射用药的生产等，都必须在无菌条件下使用无菌操作技术。,消毒与灭菌的关系,消毒处理不一定都能达到灭菌的要求，而灭菌一定可达到消毒的目的。,第二节 消毒与灭菌方法,物理消毒与灭菌法,化学消毒与灭菌法,生物消毒法,消毒与灭菌方法,一、物理消毒与灭菌方法,物理消毒与灭菌效果可靠，不残留有害物质，是消毒工作中的首选方法。,消毒与灭菌所用的物理因子有

4、：,热力、紫外线、电离辐射、滤过、微波、高压、强光等,(一)热力消毒与灭菌,利用高温杀灭微生物,可分为干热和湿热,既可消毒，也可灭菌,干热和湿热的区别：处理过程中加热环境与微生物细胞的湿度水平不同,湿热灭菌法,杀菌机制：使菌体蛋白质变性和凝固；使细菌核酸降解；使细菌胞浆膜损伤。 湿热穿透力强；湿热中菌体吸收水分，使菌体蛋白质易于凝固变性。 湿热蒸汽有潜热，潜热可迅速提高被灭菌物品的温度。,常用的湿热消毒灭菌方法,压力蒸汽法、流通蒸汽法、低温蒸汽法、煮沸法、巴氏消毒法等,不耐热的物品选择巴氏消毒法或低温蒸汽法； 一般物品采取煮沸或流通蒸汽法； 能耐受高温高压的物品选择压力蒸汽法。,压力蒸汽法可用于灭菌。,温度与作用时间：,134 3min 126 10min 121 15min 115 25min,压力蒸汽灭菌温度与时间的选择随灭菌方式、物品性质、包装材料、要求灭菌过程长短而定。,压力蒸汽灭菌器,下排气式蒸汽灭菌器,预真空蒸汽灭菌器,根据冷空气排除方法分为：,下排气式蒸汽灭菌器有手提式、立式和卧式三种。操作时应注意：,彻底排出冷空气； 包装不能过紧； 装载量不得超过总体积的80%； 根据

5、物品的导热性和包装大小确定灭菌时间。,脉动真空压力蒸汽灭菌器： 先将空气抽出，再通入蒸汽至常压或略高。反复3次4次，最后一次抽真空后，通入蒸汽至182.41kPa(132)，持续34min进行灭菌。,脉动真空压力蒸汽灭菌器优点：,灭菌效果稳定：反复抽气，98%冷空气被抽出，加快了蒸汽对物品的穿透，减少了对容器透气性的要求；,对物品装载量和装载方式没有严格要求；,灭菌时间短，减少了高温对物品的氧化损害；,自动化、智能化：自动记录打印，有利于消毒监督工作。需先抽真空，不适用于液体的灭菌。,灭菌物品置放,压力蒸汽灭菌的监测:,chemical indicator,过程监测,效果检测,采用指示器材（Indicator）进行,biological indicator,mixed indicator,Chemical indicator：,灭菌指示胶带,灭菌指示卡,灭菌指示管,生物指示物:,将嗜热脂肪杆菌芽孢(ATCC 7953 或 SSIK 31株)染于纸片载体上，干燥后装入纸袋或安瓿内备用。,在 1210.5条件下,D值为 1.31.9min 杀灭时间(KT值)19min 存活时间(ST值)为

6、3.9min,菌量 5.01055.0106cfu/片；,生物指示物的质量要求:,D值（D Value）：,杀灭时间(Killing Time,KT）)：,存活时间(Survival Time,ST)：,杀灭试验微生物90%所需的时间(min) 。,用于生物指示物抗力鉴定时，指受试指示物样本，经杀菌因子作用后全部样本无菌生长的最短作用时间 (min)。,用于生物指示物抗力鉴定时，指受试指示物样本，经杀菌因子作用后全部样本有菌生长的最长作用时间 (min)。,超高温瞬时灭菌j技术 ultra-heat treatment，UHT）,137150保持420s 适用于牛奶、果汁、酸奶、葡萄酒等的工业灭菌,UHT 装置,干热灭菌法,杀菌机制：使菌体蛋白质变性；电解质浓缩。 穿透力与杀菌作用不及湿热，所需温度高(160)，时间长(13h)。 适用于耐热忌湿物品。,常用的干热消毒灭菌方法,热空气加热 红外线照射 强光加热 烧灼 焚烧等,干热温度通常要180以上方可达到灭菌,焚烧是最彻底的方法之一，可以直接将处理对象变为无害的灰烬，多用于处理医院或疫源地的垃圾。,(二)紫外线,紫外线为非电离辐射，波

7、长200280nm的紫外线具有其杀菌作用，其中以240280nm最强(以253.7nm为代表)。,紫外线杀微生物机制：,破坏微生物核酸，如形成嘧啶二聚体、DNA断链等,紫外线消毒的应用,空气消毒和物品表面消毒，水消毒,应用范围,紫外辐照度监测,人员防护,穿透力弱,【紫外线消毒监测】 测定辐照度值：用辐照度值测定仪或化学指示卡距放射源l m处测定。 表面消毒的效果监测：菌片定量法或棉拭涂抹采样定量法。 空气消毒效果的监测：琼脂平板沉降法或撞击法采样。消毒后菌落总数不应超过国家规定的卫生标准。,(三)电离辐射,60Co (或137Cs)辐射装置 电子加速器照射装置。,利用放射性同位素钴60或铯137产生的射线和高能电子加速器产生的电子束或X射线杀灭微生物。,电离辐射消毒灭菌的特点与应用,不会使被处理物品升温,穿透力强，不受物品包装的影响,(四)滤过除菌,原理：是用特殊的器具将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌目的。,主要用于不耐高温的血清、毒素、抗生素、药液以及空气的除菌。 效果取决于滤菌器的孔径大小 0.22m：灭菌 0.45m：消毒,生物安全柜,洁净工作台,生物安全柜,微孔滤膜滤器,层

8、流车间,（五）微波,可使物质中偶极子(如水分子)产生高频运动，从而将存在的微生物杀灭,波长在0.001nm1m，频率为（300300000）MHz的电磁波,属于非电离辐射,消毒上常用的微波频率为915MHz 25MHz和2450MHz50MHz，二者的穿透力不同,可用于食品饮料、餐饮具、文件、衣物和皮毛以及废弃物的消毒,可用于医院药品和医疗器材的消毒灭菌,二、化学消毒灭菌法,化学消毒剂：用于消毒的化学药物。,适用性广泛,使用方便,消毒剂种类多,优点：,效果不稳定,腐蚀性、刺激性和毒性,缺点：,环境或生态毒性,化学消毒与灭菌：利用化学药物杀灭微生物,【微生物对化学消毒剂的耐受力】,朊 毒,细菌芽孢,分枝杆菌,亲水病毒或小型病毒,真 菌,细菌繁殖体,亲脂病毒或中型病毒,(克雅病病原体),(枯草杆菌芽孢),(结核杆菌),(脊髓灰质炎病毒),(发癣菌属),(绿脓杆菌、金葡菌),(单纯疱疹、乙肝病毒等),【消毒剂的分级】,高效消毒剂 (high-level disinfectant),低效消毒剂 (low-level disinfectant),中效消毒剂 (intermediate-level

9、 disinfectant),【常用消毒剂及其作用机制】,【消毒剂杀菌机制】,使菌体蛋白质变性或凝固,改变细胞膜的通透性,干扰细菌的酶系统和代谢,破坏微生物核酸,使用规定的剂量才能获得预期效果,消毒剂应用剂量的确定,安全系数,浓度的计算：,作用时间：,按所含主要杀菌成分的浓度为准,注意药物有效成分的下降,不得任意缩短规定的作用时间,提高浓度，缩短时间的方法必须有试验基础，而且也应有一定限度,指溶于水中产生次氯酸的消毒剂。,（一）含氯消毒剂,作用机制:,次氯酸的氧化作用 新生氧的氧化作用 氯化作用,主要产品类型,次氯酸钠、漂白粉精、二氯异氰尿酸钠、三氯异氰尿酸、液氯,杀菌谱广、价格低廉、作用迅速,易受有机物影响，有刺激性和漂白作用，有效氯容易丧失。,优点：,缺点：,在饮水消毒、预防性消毒、疫源地消毒及医院消毒方面应用较广。,（二）过氧化物类消毒剂,作用机制:,强大的氧化力破坏蛋白质分子结构,主要产品类型,过氧乙酸、过氧化氢、过氧戊二酸、二氧化氯、臭氧,优点：,缺点：,杀菌谱广、易溶于水、杀菌力强、杀菌时间短、分解后生成无毒成分、无残留毒性。,性质不稳定、易分解，未分解前有刺激性或毒性，对物品有漂白或腐蚀作用。,（三）碘类消毒剂,杀微生物机制：通过碘元素卤化菌体蛋白质形成沉淀，最终杀灭微生物。,属于中效消毒剂，不能杀灭芽胞,常用的醇类消毒剂：碘酊（有效碘2%） 碘伏（有效碘0.5% 1%）,主要应用：皮肤消毒、食具及物表擦拭消毒,（四） 醇类消毒剂,杀微生物机制：使微生物蛋白质变性，酶变性失活，从而干扰微生物代谢。,属于中效消毒剂，不能杀灭芽胞,常用的醇类消毒剂：70%75%乙醇、 50%70%异戊醇,主要应用：皮肤消毒、器械及物表擦拭消毒,杀微生物机制：主要依靠醛基，醛基作用于菌体蛋白，使之烷基化，引起蛋白质凝固。,（五）醛类消毒剂,属高效消毒剂，广谱、高效、低毒、对金属腐蚀性小、受有机物影响小、稳定性好,重要的醛类消毒剂：,甲醛、戊二醛、邻苯二甲醛,戊二醛,2%浸泡10h：医疗器械灭菌 2%浸泡1020min：医疗器械消毒,邻苯二甲醛,5000mg/L浸泡10h：内镜消毒,（六）季胺盐类消毒剂,（七）双胍类消毒剂,（八）酚类消毒剂,（九）气体消毒剂

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