试验-脑脊液检验课件
26页1、脑脊液检验,实验一 脑脊液理学检查,(目的) 掌握脑脊液理学检查的内容,方法。 (标本) 新鲜脑脊液。 (操作) 1观察颜色 肉眼观察脑脊液颜色变化,分别以无色,乳白色,红色,棕色,或黑色,绿色等文字如实描述报告。,2观察透明度 肉眼观察脑脊液透明度变化。正常脑脊液清晰透明,病理情况下可出现不同程度浑浊,可分别以“清晰透明”。“微浑”,“浑浊”等如实报告。3观察凝块或薄膜 轻轻倾斜试管,肉眼仔细观察有无凝块或薄膜。正常脑脊液无凝块或薄膜,脑膜炎时可形成凝块或薄膜,分别以“无凝块”,“有凝块”,“有薄膜”等如实报告。,(注意事项),当标本颜色或透明度改变不明显时,应在灯光下以白色或黑色为背景仔细观察,同时观察有无凝块。 怀疑为结核性脑膜炎时,标本应在24环境中静置1224h再观察脑脊液表面有无薄膜形成。 参考值 :无色,清晰透明,放置后无凝块或薄膜形成。,实验二 脑脊液显微镜检查,(目的)掌握脑脊液显微镜检查的内容,方法。 (器材) 显微镜,改良牛鲍计数板,微量吸管。刻度吸管,小试管。 (试剂) 生理盐水或红细胞稀释液,冰乙酸,白细胞稀释液,瑞氏染液或瑞吉染液。 (标本)新鲜脑脊液。,(
2、操作) 细胞总数计数 直接计数法(适用于清晰透明或微浑脑脊液) 充池:微量吸管吸取混匀的脑脊液,充入血细胞计数板的上下2个计数池。 计数:静置23min,低倍镜下计数2个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。 计算:10个大方格内的细胞总数即为每微升脑脊液细胞总数,再换算,稀释计数法(适用于浑浊的脑脊液),稀释:如标本细胞过多,可根据标本内细胞多少,用生理盐水或红细胞稀释液对标本进行一定倍数稀释。 充池:用微量吸管吸取混匀后的稀释脑脊液充入1个计数池。 计数:静置23后,低倍镜计数1个计数池内四角和中央大方格共5个大方格内的细胞数。 计算:根据5个大方格内细胞总数及稀释倍数,计算每升脑脊液的细胞总数。,白细胞计数,直接计数法(非血性清晰透明或微浑脑脊液) 除去红细胞:在小试管内加入冰乙酸12滴,转动试管,使内壁粘附少许冰乙酸后倾去,滴加混匀的脑脊液34滴,混匀,放置数分钟,使红细胞破坏。 充池: 计数: 计算:,稀释计数法(浑浊脑脊液),稀释破坏红细胞:根据标本内白细胞多少情况,用白细胞稀释液对标本进行一定倍数的稀释,混匀,放置数分钟,破坏红细胞。 充池:用微量吸管吸取混匀
3、稀释后的脑脊液充入1个计数池。 计数:静置23min后,低倍镜计数1个计数池内的四角和中央大方格内的白细胞数。 计算:根据5个大方格内的白细胞总数和稀释倍数,计算每升脑脊液的白细胞总数,白细胞分类计数,直接分类法 白细胞计数后,转换高倍镜,根据细胞的形态和细胞核形态进行直接分类,共计数100个白细胞(包括内皮细胞),分别计数单(个)核细胞(包括淋巴细胞,单核细胞,内皮细胞)和多(个)核细胞(粒细胞系)的数量,结果以单核细胞百分比和多核细胞百分比报告。如白细胞不足100个,可直接写出单核细胞和多核细胞具体数,若白细胞数不足30个,可不做直接计数而改用涂片染色分类计数,涂片染色分类法 若直接分类不易区别细胞时,可将脑脊液以1000r/min离心5min,取沉淀物,制成均匀薄片,置于室温或37恒温箱内尽快干燥,瑞氏或瑞吉染色后,油镜下进行分类计数,结果报告与血液白细胞分类计数报告方式相同。若见激活型单核细胞(比普通单核细胞大,胞质边缘趁、呈花边状,胞质内有空泡),转化型淋巴细胞(形态似异型淋巴细胞)及室管膜细胞(形态似大淋巴细胞)应计入分类的百分比中,(注意事项),直接白细胞计数时,也可用微
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