高效课堂同步幻灯片:2-1微生物的实验室培养(选修1)
56页1、课题1 微生物的实验室培养,课程标准 进行微生物的分离和培养。 课标解读 1.知道培养基的基础知识,进行无菌技术的操作。 2.进行微生物培养。,1培养基 (1)培养基概念 按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。,培养基的成分及无菌操作技术,营养物质,生长繁殖,(2)培养基种类 包括 培养基和 培养基等。 (3)培养基的化学成分 一般都含有 、 、 和 四类营养成分。还需要满足微生物生长对 、 及 等的要求。,固体,液体,水,碳源,氮源,无机盐,pH,特殊营养物质,氧气,2无菌技术 (1)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下四个方面 对实验操作的 、操作者的 ,进行清洁和 ; 将用于微生物培养的器皿、 和 等进行 ; 为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行; 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。,空间,衣着和手,消毒,接种用具,培养基,灭菌,酒精灯火焰,周围的物品,(2)消毒和灭菌 消毒:消毒是指使用 方法仅杀死物体表面或内部一部分 的微生物, (包括;不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。 灭菌:灭菌是指使用
2、 杀死物体内外 , (包括,不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 灭菌、 灭菌和 灭菌。,较为温和的物理或化学,对人体有害,不包括,煮沸,巴氏,化学药剂,强烈的理化因素,所有的,微生物,包括,灼烧,高压蒸汽,干热,思维激活1 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么? 提示 酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。,1碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳,2.培养基类型划分,3.无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别,(2)无菌技术主要操作要求 实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。 实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。,特别提示 (1)微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既是碳源,又是氮源、能源。 (3)大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物,其培养基中均需额外添加生长因子,而许多微生物能自行合成
3、生长因子,其培养基中不需再添加。,【巩固1】 下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是 ( )。,A. B C D 解析 高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。 答案 D,1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤: 称量 倒平板。 (2)倒平板的过程: 在火焰旁右手拿锥形瓶,左手 。 右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过 。 左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻 。 待平板冷却凝固后,将平板 放置,使皿盖在下、皿底在上。,培养基的制备与大肠杆菌的纯化技术,计算,溶化,灭菌,拔出棉塞,火焰,盖上皿盖,倒过来,2纯化大肠杆菌 (1)微生物接种的最常用方法是 和 。 (2)平板划线法:通过 在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集的菌种 。 (3)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的 ,然后将不同稀释度的菌液分别 ,进行培养。当稀释倍数足
4、够高时,即可获得 。,平板划线法,稀释涂布平板法,接种环,连续,划线,逐步稀释分散到培养基的表面,梯度稀释,涂布到琼脂固体培养基的表面,单个细菌形成的菌落,3菌种的保存 为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种,我们可以采用 法;对于需要长期保存的菌种,可以采用 法。,临时保藏,甘油管藏,思维激活2 除平板划线法与稀释涂布平板法外,还有哪些接种方法?微生物接种技术中最核心的内容是什么? 提示 微生物接种方法还有斜面接种及穿刺接种等方法,所有微生物接种方法中最核心的内容是“防止杂菌污染,保证培养物的纯度”。,1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算:依据牛肉膏蛋白胨培养基配方比例,计算配制100 mL 的培养基时,各种成分的用量 称量:牛肉膏比较黏稠,可用称量纸称取,牛肉膏和蛋白胨都 易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖,2微生物分离与纯化技术 (1)原理 微生物的分离与纯化就是将待检测微生物样品通过划线或涂布接种在固体培养基上,样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个菌落接种到斜面培养基上,经培养后,即可得到一个微生物的纯种。,(2)方法步骤 微生物
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