ABO血型鉴定标准操作程序
16页1、文件编号:YCXZYYJYK_SOP_10月亮县 中医院项 目页码:第- 1 -页,共 17 页 版本:第 3 版,第 1 次修订检验科血库日常操作血库日常操作 SOP 手册手册生效日期:20180101编写者:张三三审核者:李四四批准者:李四四 时 间:20180101时 间:20180101时 间:20180101SOP_10-1SOP_10-1 ABO 血型鉴定标准操作程序血型鉴定标准操作程序一、目的:确保输血安全,严格检验质量标准,为临床提供及时、可靠的结果报告。二、适用范围:血型鉴定。三、操作人员:检验科授权工作人员四、操作步骤:1 原理:血清中常存在反应强的抗体,而红细胞上缺乏相应的抗原。许多组织细胞上有规律地存在着 A、B、H 抗原,以及分泌型的分泌液中存在着 A、B、H 物质。红细胞上的 A/B /D 抗原与抗 B/A /D 标准血清发生凝集反应。ABO 血型的分类及其与抗血清的反应:红细胞与抗血清反应表型 红细胞上抗原 血清中抗体 抗 A 抗 BO 无 抗 A、抗 B A A 抗 B + B B 抗 A +AB A、B 无 + +2 试剂:A、B、O 标准血清;A、B
2、、O 定型红细胞;生理盐水。3 方法:3.1 样本采集:真空抽血 2ml 至一次性抗凝管(EDTAK2 干粉)中,混匀后备用。3.2 ABO 血型盐水介质鉴定(试管法):3.2.1 制备患者 35%的红细胞盐水悬液。3.2.2 正定型:抗-A 抗-B 抗-A、B标准血清(l) 100 100 100受检者 RBC 悬液(l) 50 50 503.2.3 反定型:Ac Bc Oc定型红细胞(l) 50 50 50受检者血清(l) 100 100 1003.2.4 混匀。3.2.5 以 1000r/min 离心 1min。3.2.6 取出试管,轻摇,使沉管底的红细胞浮起,认真观察有无溶血和/或凝集。文件编号:YCXZYYJYK_SOP_10月亮县 中医院项 目页码:第- 2 -页,共 17 页 版本:第 3 版,第 1 次修订检验科血库日常操作血库日常操作 SOP 手册手册生效日期:20180101编写者:张三三审核者:李四四批准者:李四四 时 间:20180101时 间:20180101时 间:201801013.3 ABO 血型正反定型结果判断:分型血清+受检者红细胞 受检者血清+试剂
3、红细胞抗-A 抗-B 抗-A、B 受检者血型 Ac Bc Oc+ + A + + + B + O + + + + + AB 3.4 正反定型不一致的原因:(1)技术和管理工作的错误 血样试管及玻片混淆 书写错误 红细胞过浓或过淡 未注意样品溶血现象 漏加试剂 未按试剂说明操作 试剂血清效价低、亲和力不强或污染/过期/失效 离心速度/温度改变(2)血清异常等其它原因 抗体:新生儿、老年人、白血病、肿瘤、免疫缺陷、骨髓移植、嵌合体双生子、异型输血交换、胎盘出血等引起的抗体改变。 红细胞抗原:亚型、血型物质过剩、类 B 等特殊物。 蛋白质或血浆:巨球蛋白、多发性骨髓瘤、恶质病、血浆扩容剂的应用等。 其它:缗钱状排列、多凝集现象、冷凝集、额外凝集素、细菌污染等。(3)正反定型结果不一致的解决办法如发现AB0正反定型结果不一致,首 先要重复作试验1次。严格执行操作规程使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果, 就可解决明显的问题, 对一些疑难问题必须进一步研究。初步的检查步骤包括:1.另从受检者采取1份新鲜血液标本,这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。2.将红细胞洗涤数次,配成5%盐水
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