磁性磁性荧光微球的制备及在转基因食品检测中的应用
77页1、 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果, 也不包含为获得 天津大学天津大学 或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 天津大学天津大学 有关保留、使用学位论文的规定。特授权 天津大学天津大学 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。 (保密的学位论文在解密后适用本授权说明) 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 摘 要 摘 要 聚合酶链式反应(PCR)和荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)是转基因食品检测的主要手段,其关键是从待检样品中快速高通量地提取到高质量的核酸,目前主要的核酸提取方法是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB
2、)法、十二烷基硫酸钠(SDS)法和各种试剂盒法,由于 CTAB 法和 SDS 法操作繁琐、需要使用有机溶剂并且不断离心,因而不能满足快速高通量的发展要求;而试剂盒法由于昂贵的价格也限制了它在日常检测中的应用;同时,基于核酸水平的转基因检测的发展趋势是多重检测, 其关键是制备不同种类的荧光微球和对微球的特异探针的修饰。 针对以上问题,本论文提出了以磁性分离技术为基础的核酸提取方法,该方法的关键是制备磁响应性高、单分散性良好和易于表面修饰的磁性微球;将该磁性微球用于大豆样品核酸提取进行综合评价; 并针对多重检测制备了不同荧光性能的荧光微球。本文的研究目标主要包括三个方面: (1)通过热溶剂还原法制备磁响应性高、单分散性良好、可重复性高和易于修饰的磁性微球; (2)将磁性微球用于食品核酸提取中并进行综合评价,同时对核酸的特异性提取做了基础研究; (3)制备了不同荧光性能的荧光/磁性荧光微球。具体工作如下所述: 首先采用热溶剂还原法制备了磁性微球,考察了不同的分散剂、还原剂和前躯体的种类及用量对磁性微球的形貌及分散性的影响,探讨了其反应机理。 并且通过溶胶-凝胶法法对其表面修饰以制备不同官能团
3、的磁性微球。 其次,将此磁性微球用于大豆样品中核酸的提取,并将此方法与传统核酸提取方法和市售试剂盒对比进行综合评价;将磁性微球进行了链霉亲和素-生物素-ssDNA 的修饰,考察了其对互补以及非互补 ssDNA 的提取效率。 最后,为了进一步完善转基因食品检测体系,针对多重检测的模式的优点:(可以同时检测样品的内源基因与多个外源基因,既减少核酸模板的用量,又提高检测速度) ,通过层层自组装的方法制备了以聚苯乙烯为基质的荧光/磁性荧光微球,该荧光/磁性微球的荧光发射峰可以通过制备的荧光量子点的大小进行调节,使荧光微球具有不同的荧光性能从而得以区分。 综上所述, 本论文对基于磁分离技术的转基因食品的核酸快速提取以及多重检测方面做了初步探讨,为推动转基因食品核酸提取的自动化、高通量和核酸多重检测的发展做了基础研究工作。 关键词关键词:转基因食品检测,溶剂热还原法,磁性微球,核酸提取,核酸探针, 磁性荧光微球 ABSTRACT Nowadays, the main ways of detecting genetically modified food are polymerase chain r
4、eaction (PCR) and real-time PCR (qRT-PCR). The key problem of the detection is how to extract high-quality DNA from food samples with high-through-put and fast speed. The main DNA-extraction methods are hexadecyl trimethyl ammonium bromide (CTAB), sodium dodecyl sulfate (SDS) and kinds of kits. But the CTAB and SDS methods need complex operations and large amount of organic solvent, so they cannot meet the demand of auto-extraction. And the kits are always expensive and cannot be used in the rou
《磁性磁性荧光微球的制备及在转基因食品检测中的应用》由会员小**分享,可在线阅读,更多相关《磁性磁性荧光微球的制备及在转基因食品检测中的应用》请在金锄头文库上搜索。
2020年高考真题——理科综合(全国卷Ⅲ)+Word版含答案
2021年绝味鸭脖策划书
2021年熟食店创业方案
2021年熟食店开店策划
2021年卤菜店创业计划书
2021年周黑鸭网络营销策划方案
东大21年1月考试《现代设计方法》考核作业
谈我国行政管理效率的现状及其改观对策(论文)
单证员考试-备考辅导-复习资料:无贸易背景信用证案分析.docx
土木工程毕业生答辩自述.docx
建筑学毕业后工作状态真实写照.doc
C#代码规范(湖南大学).doc
xx区食药监局2019年工作总结及2020年工作计划
2019年中医院药物维持治疗门诊工人先锋号先进事迹
2019年度xx乡镇林长制工作总结
2019年性艾科工作计划书
2019年人才服务局全国扶贫日活动开展情况总结
关于组工信息选题的几点思考
摘了穷帽子 有了新模样
2019年某集团公司基层党支部书记培训班心得体会
2024-03-21 2页
2024-03-04 3页
2024-03-04 40页
2024-03-04 42页
2024-03-04 49页
2024-03-04 14页
2024-03-04 12页
2024-03-04 20页
2024-03-04 4页
2024-03-04 5页