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酶工程试卷B答案

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文档编号：470754638

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常见问题

1、酶工程课程试卷B答案一名词解释（共10小题，每题3分，共30分）1肽链有限水解修饰：是指通过将多肽链的一部分肽链水解改变酶的特性与功能的修饰方法。2分子印迹酶：是指通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中心的空腔，对底物产生有效的结合作用并在空腔内诱导产生催化基团。3主客体化学：主体和客体分子之间通过弱相互作用结合在一起形成特定复合物。 4酶比活力：是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力。5交联法：是指用双功能或多功能试剂使酶与酶或微生物与微生物细胞之间交联的固定化方法。6锁钥理论：是一种酶催化作用原理的假说，其观点认为：酶分子与底物分子的构象就像锁和钥匙的关系，两者的构象能够相互契合。7固定化细胞：固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞.该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢，又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。8抗体酶：是指具有抗体活性的酶蛋白,在其可变区赋予了酶的属性。9. DNA改组：又称有性PCR，指DNA分子的体外重组，是基因在分子水平上进行有性重组。10. 催化常数：是指单位时间内每个酶分子（或活性部位）转换底物为产物的数目。二、判断题（对打

2、“V”，错打“X”。共10小题，每小题1分，共10 分）1. x2- x3- V4- V5. x6.V 7. V8. V9. X10.X三、填空题（每空1分，共12分）1- Mg2+或Mn2+、鸟苷或鸟苷酸2. 剪切型核酶、剪接型核酶3. 非共价结合法（或吸附法）、共价偶联法、交联法、包埋法。4. 免疫诱导法、免疫拷贝法、人工构建法、化学修饰法。四问答题（共 8小题，每小题 6分，共48分）1酶分子修饰的常用方法包括哪些并简述其方法原理？（1）金属离子置换修饰（2）大分子结合修饰（3）肽链有限水解修饰（4）酶蛋白侧链基团修饰（5）氨基酸置换修饰（6）物理修饰（7）酶交联晶体修饰（8）酶的亲和修饰2。简述酶分子定向进化的概念及定向进化的主要策略。所谓酶分子定向进化，即人为创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，在体外对基因进行随机突变，从一个或多个已经存在的亲本酶出发，经过基因的突变和重组，构建一个人工突变酶库，通过一定的筛选或选择方法最终获得预先期望的具有某些特性的进化酶。定向进化的主要策略：易错PCR技术、DNA改组技术（DNA shuffling）、外显子改组、体外随机引发重

3、组、交错延伸技术。3. 酶的催化机理包括哪些方面？（1）酸碱催化（2）共价催化（3）邻近及定向效应（4）变形或张力（5）微环境效应4. 简述海藻酸钙包埋法固定化细胞的原理及基本过程。包埋法固定化细胞的原理是：将微生物或细胞截流在水不溶性的凝胶聚合物孔隙的网格空间中，凝胶聚合物的网格可以阻止细胞的泄漏，同时能让基质渗入和产物扩散出去。海藻酸钙包埋法固定化细胞的基本过程(1) 将海藻酸钠加热溶于水。(2) 将海藻酸钠溶液与细胞混合均匀，使海藻酸钠最终浓度为 2-4%(3) 将混合液用针形管滴入5-10%的CaCl2溶液中，固定化7-8小时。(4) 过滤出颗粒，用生理盐水洗净。5何谓手性药物？手性药物对映体所表现出的作用可能存在哪些差异？手性药物是指药物分子属于手性分子，而手性分子存在两种对映异构体其药物作用可能存在差异。手性药物立体异构体所表现出的作用可能存在以下差异：1) 一种异构体有显著的治疗作用，另一种异构体无或有很弱的作用。2) 一种异构体有治疗作用，另一种异构体有副作用。3) 两种异构体都有治疗作用，但其中一种异构体有副作用或另外一些辅助作用。4) 两种异构体的作用有互补

4、性。6. 固定化细胞技术与固定化酶技术相比较，有哪些优缺点？优点：(1) 无须进行酶的分离纯化。(2) 可连续发酵，反复使用，成本低，抗污染能力强。(3) 可保持酶的原始状态，稳定性高。(4) 适用于进行多酶顺序连续反应。(5) 易于进行辅因子的再生。缺点：(1) 必须保持菌体的完整，防止菌体的自溶，否则会影响产物的纯度。(2) 必须抑制细胞内蛋白酶的分解作用。(3) 往往有较多的副产物产生。(4) 细胞膜或细胞壁会造成底物渗透与扩散的障碍。7. 在酶的分离纯化过程中，细胞破碎的常用方法有哪些？1) 机械法：如高速捣碎、研磨等2) 物理法：如渗透压冲击法、超声波、反复冻融等3) 化学法：采用丙酮、甲醛、丁醇、氯仿、表面活性剂等4) 酶法：溶菌酶、纤维素酶、几丁质酶等8酶的可逆抑制作用常见的有哪几种类型？请用双倒数作图法比较几种酶抑制动力学参数的变化，并加以简要说明。常见的类型：(图略)(1) 竞争性抑制作用：Vm不变Km增大(2) 非竞争性抑制作用：Vm减小Km不变(3) 反竞争性抑制作用：Vm减小Km减小(4) 线性混合型抑制作用：Vm减小 Km增大(5) 产物抑制(6) 底物抑制

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