大鼠尾加压素II收缩大鼠肺动脉干与蛋白激酶C通路相关性研究
9页1、大鼠尾加压素II收缩大鼠肺动脉干与蛋白激酶C通路相关性研究 作者:薛必成 陈少贤 龚永生 徐正 王良兴 范小芳 【摘要】 目的 研究大鼠尾加压素-II(RUII)收缩大鼠离体肺动脉干环与细胞信号转导通路蛋白激酶C通道的关系。方法 从雄性Sprague-Dauley大鼠中分离出肺动脉干,切成34mm的血管环,用RUII(10nmol/L)预收缩血管达坪台期后,加入蛋白激酶C通道阻断剂H-7,制备H-7(0.1100mol/L) 浓度效应舒张曲线,最后分别计算EC50和Emax。 结果 H-7呈浓度依赖性舒张大鼠RUII预收缩的肺动脉干 -logEC50=5.260.36, Emax =(97.2117.86)%。 结论 细胞信号转导通路蛋白激酶C通道的激活参与大鼠尾加压素-II收缩大鼠肺动脉干效应。 【关键词】 尾加压素-II 蛋白激酶C 肺动脉干【Abtract】 Objective The aim of our study was to investigate the influence of protein kianse C inhibition on rat urotensin
2、II induced vasoconstriction. Methods The main truncus pulmonalis was dissected from the male Sprague-Dawley rat, artery ring width was 34mm.Inhibitor of protein kinase C channel,H-7(0.1100mol/L) were added into medium after rat urotensin II(10nmol/L)induced vasoconstriction had reached plateau to construct the relaxant concentration-response curves and their EC50 and Emax. Results H-7 caused concentration-dependent relaxations of rat urotensin II precontracted arteries -logEC50=5.260.36, Emax =(
3、97.2117.86)% of the response to 10 nmol/L rat urotensin II. Conclusion Rat UII induced rat main pulmonary artery contraction is related to the activation of protein kinase C signal transduciton pathway.【Key words】 urotensin II protein kinase C truncus pulmonalis尾加压素-II(RU II)是最早从硬骨鱼尾部神经内分泌系统中提取出来的多肽,随后,两栖类及哺乳类动物大脑中也发现RUII,起生物学效应的羧基末端是环形六肽结构,它在从鱼到人的物种中呈高度的保守性。RUII受体为G蛋白藕联受体GPR-14,它是迄今为止所发现的最强效血管收缩活性肽。RUII收缩血管效应与多条细胞信号转导通路有关,例如已有的研究结果,表明RUII收缩血管作用与激活Ca离子通道、Rho激酶、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、酪氨酸激酶及磷
4、酯酶C通路等有关5。另外,研究表明RUII还通过c-Src/PKC/MAPK细胞信号转导途径调节血管平滑肌细胞的增生6,还可以通过激活PKC与MAPK增加细胞内钙离子浓度7。RUII是大鼠离体肺动脉干的有效收缩剂,并且其收缩作用可被MAPK阻断剂PD98059所阻断7,8,形成肺动脉高压后,肺动脉干对RUII的收缩反应增强9。因此,研究RUII收缩肺动脉效应与PKC通路的关系,对于阐明RUII对肺动脉的作用机制以及在肺动脉高压形成与发展等病理过程中所起的作用有着重要意义。1 材料与方法1.1 材料雄性Sprague-Dawley 大鼠(350450g)用戊巴比妥钠麻醉后,分离出肺动脉干,剔除周围结缔组织后切成3-4mm动脉环,垂直悬挂在含15ml Krebs 液的浴槽中。Krebs液成份(单位为mmol/L): NaCl 18.4,KCl 4.7, KH2PO4 1.2,MgSO4 1.2,CaCl2 2.5,NaHCO3 25,glucose 11 ,EDTA 23mol/L。 Krebs液pH 7.4,温度(371),并持续通含95%O25%CO2的气体。血管环在最适前负荷(1.0
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