2022年各种PH值的磷酸盐缓冲液配制.pdf

各种 PH 值的磷酸盐缓冲液配制PH=PKa+lg(a/b) K1=7.52X10-3, K2=6.23X10-8, K3=2.20X10-13.?设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1 磷酸氢二钾浓度为C2 pH=pK-lg （C1/C2）=7 这里的 pK 是 7.2（这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对，公式是通用的）解得 C1：C2=1.585（mol 比） 磷酸的二级电离常数）Ka，求出 PKa，然后根据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比C1：C2这时混合物中P 的质量分数为（31/136 1.585+31/174 1）/（ 1.585+1）=20.87% 混合盐的质量比136 1.585：174 1=215.56： 174 10mg/20.87%=47.916mg （47.916/（215.56+174） ） 215.56=26.51mg （47.916/2.575 ） 174=21.40mg 应取磷酸二氢钾26.51mg 磷酸氢二钾21.40mg 用蒸馏水稀释至1L磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g ，与磷酸氢二钠5.04g, 加水使成1000ml, 即得磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液 :取磷酸 16.6ml ， 加水至 1000ml ， 摇匀。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g ，加水使溶解成1000ml 取上述甲液72.5ml 与乙液 27.5ml 混合，摇匀，即得磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g ，加水 800ml ，用盐酸调节pH 至 2.5, 用水稀释至1000ml 磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH 值至 5.0 ，即得磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g 与磷酸氢二钾0.87g, 加水使溶解成1000ml ，即得磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g, 加 0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml ，用水稀释至100ml ，即得磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g 、磷酸氢二钠2.7g 与氯化钠1.7g ，加水使溶解成400ml ，即得精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 1 页，共 4 页 - - - - - - - - -精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 1 页，共 4 页 - - - - - - - - -磷酸盐缓冲液(含胰酶 )(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g, 加水 500ml 使溶解 ,用 0.1mol/L氢氧化钠溶液调节 pH 值至 6.8；另取胰酶10g ，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml ，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml ，加 0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml ，用水稀释至1000ml ，摇匀，即得磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g ，加 0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml ，用水稀释至100ml ，即得磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml 与 0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml ，加新沸过的冷水稀释至200ml ，摇匀，即得磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g, 加水使溶解成1000ml ，调节 pH 值至 7.3，即得磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g ， 加 0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml ，用水稀释至200ml ，即得磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g ，加水使溶解成1000ml ，取 50ml ，加 0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml ，再加水稀释至200ml ，即得磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g ，加水溶解，并稀释至500ml 乙液：取磷酸二氢钠2.76g ，加水溶解，并稀释至100ml 。

取上述甲液91.5ml 与乙液 8.5ml 混合，摇匀，即得磷酸盐缓冲液(pH7.8 8.0) 取磷酸氢二钾5.59g 与磷酸二氢钾0.41g ，加水使溶解成1000ml ，即得磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）试剂：NaH2PO4 2H2O Na2HPO412H2O配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4 和 0.2mol/L的 Na2HPO4 ，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB 和 PBS1）0.2mol/L的 Na2HPO4 ；称取 Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4 H2O 27.6g) 加重蒸水至1000ml 溶解2）0.2mol/L的 Na2HPO4 ：称取 NaHPO4. 12H2O 71.632g（或 Na2HPO4 7H2O 53.6g或Na2HPO4 2H2O 35.6g ）加重蒸水至1000ml 溶解精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 2 页，共 4 页 - - - - - - - - -精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 2 页，共 4 页 - - - - - - - - -3）0.2mol/L pH7.4的 PB 的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4 和 81ml 0.2mol/L的Na2HPO4 12H2O, 充分混合即为0.2mol/L的 PB（pH 约为 7.4 7.5）。

若 pH 偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7 8.0 ）pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.0精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 3 页，共 4 页 - - - - - - - - -精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 3 页，共 4 页 - - - - - - - - -7.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.7精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 4 页，共 4 页 - - - - - - - - -精品学习资料 可选择p d f - - - - - - - - - - - - - - 第 4 页，共 4 页 - - - - - - - - -。